Monitoring for megalocytivirus infection was conducted for ten months from March to December in 2013 in 15 aquatic farms culturing, red sea bream, rock bream, rock fish and black sea bream around Tongyoung coastal area in Korea, to assess spatial and temporal variability of detection prevalence, and to explore possible links with seawater temperature. In nested-PCR targeted major capsid protein (MCP) gene, asymptomatic megalocytivirus infection was detected in the externally healthy farmed fish with a significant prevalence in range from 0 to 58.3% for ten months. Higher prevalence of megalocytivirus (46.7% - 57.1%) was observed in high water temperature season from September to November than that in other months with lower prevalence of 0.0% to 20.0%. Even though an acute infection of megalocytivirus was occurred in rock bream (positive in the first PCR) with high mortality in one of fifteen farms, there was no expansion or transmission of the disease to the rock fish and red sea bream culturing in net cage just proximal to the rock bream cage in which disease outbreaked. Nucleotide sequence analysis of the cloned MCP gene isolated asymptomatically infected rock fish revealed that the megalocytivirus in this study was clustered together with the rock bream iridovirus (RBIV) under the subgroup II of the genus megalocytivirus (Iridoviridae), which is known to be the major megalocytivirus strain in Korea. The typical histopathological signs were not found in the spleen of rock fish asymptomatically infected by megalocytivirus. Experimental infection of rock bream with the spleen homogenate of the rock fish infected asymptomatically did not induce any mortality unlike the homogenate of infected rock bream with hih mortlity. However, these results may suggest that the asymptomatic infection of megalocytivirus in other fish species can be a potential risk threatening aquaculture industries as a transmission factor of megalocytivirus to susceptible fish species, especially rock bream.
Rock bream (Oplegnathus fasciatus) is a highly valued aquaculture species in Korea. However, the aquaculture industry suffers huge economic losses due to rock bream iridovirus (RBIV) infection in summer. The objective of this study was to determine genetic diversity and relationships of DNAs isolated from two groups of rock bream after RBIV infection using five microsatellite (MS) markers. The first group of fish died early and the second group of fish died later after RBIV infection. In this experiment, 90 fish (5.1±1.0 cm and 4.1±1.3 g) were injected with 50 μl of RBIV (104 TCID50/ml) and maintained at 26℃ for 15 days. Genomic DNAs were extracted from fins of 20 fish that died earlier or later after RBIV infection. These DNAs were subjected to genotyping using five MS markers (CA-03, CA3-05, CA3-06, CA-10, and CA3-36). Of these markers, CA3-05 (early death group), CA3-06 (late death group), and CA3-36 (both early and late death groups) showed different alleles distribution rates. In-depth studies are needed to provide valuable information for selecting RBIV-resistant fish. In conclusion, microsatellite marker distribution pattern differences between early- and late- death groups of rock bream after RBIV infection showing different RBIV susceptibilities were determined using MS markers and genotyping. Results of this study suggest that MS markers could be used to facilitate the selection of RBIV resistant rock bream.
Zenke, Kosuke;Yoon, Ki Joon;Kim, Min Sun;Choi, Seung Hyuk;Kim, Ki Hong
한국어병학회지
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제27권2호
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pp.85-89
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2014
Water temperature is a key environmental factor controlling the epizootics of viral diseases in fish. High water temperature is associated with the rapid spread of rock bream iridovirus (RBIV) disease and with high mortality of RBIV infected fish. Although protection of fish against iridoviral disease by active immunization has been reported, little information is available concerning whether fish survived from an epizootic of iridoviral disease can naturally acquire resistance against the viral disease. In the present study, we have demonstrated that juvenile rock bream, which survived from a natural epizootic of RBIV, acquired resistance against recurrence or reinfection of RBIV, and this resistance was established during the subsequent low water temperature period. Furthermore, the possible involvement of the adaptive humoral immune response in the resistance of the juvenile rock bream was suggested by in vivo neutralization experiment.
This study was performed both to explore the host of nervous necrosis virus (NNV) between mariculturing fish species and to examine the phylogenic position of the NNV in Korea. NNV was confirmed on the basis of histopathological and molecular biological examination, then VNN infection was Preyed from either moribund or dead fishes including red drum, Sciaenops ocellatus; oblong rock fish, Sebastes oblongus and flounder, Paralichthys olivaceus. As a result of sequencing for a part of ms, virus from red drum was showed $98\%, $97\%, $86\% and $74\% homology with oblong rock fish, grouper, Japanese flounder and striped jack, respectively. On the other hand, NNV from oblong rock fish was demonstrated $96\%, $85\% and $72\% homology with grouper, Japanese flounder and striped jack, respectively. NNV from red drum and oblong rock fish was exhibited phylogenically distant from the representative NNV, SJNNV originated from striped jack. On the contrary, the viruses appeared to be similar species with Taiwan NNV isolated from culturing grouper.
To determine whether rock bream Oplegnathus fasciatus can be protected from rock bream iridovirus (RBIV) infection by intramuscular injection of long double-stranded RNAs (dsRNAs), we compared protective effect of virus-specific dsRNAs corresponding to major capsid protein (MCP), ORF 084, ORF 086 genes, and virus non-specific green fluorescent protein (GFP) gene. Furthermore, to determine whether the non-specific type I interferon (IFN) response was associated with protective effect, we estimated the activation of type I IFN response in fish using expression level of IFN inducible Mx gene as a marker. As a result, mortality of fish injected with dsRNAs and challenged with RBIV was delayed for a few days when comparing with PBS injected control group. However, virus-specific dsRNA injected groups exhibited no significant differences in survival period when compared to the GFP dsRNA injected group. Semi-quantitative analysis indicated that the degree of antiviral response via type I IFN response is supposedly equal among dsRNA injected fish. These results suggest that type I IFN response rather than sequence-specific RNA interference might involve in the lengthened survival period of fish injected with virus-specific dsRNAs.
Duminda, S.K. Tilan Chamara;Kim, Yeo-Reum;Kim, Jong-Myoung
Fisheries and Aquatic Sciences
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제24권1호
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pp.32-40
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2021
Monitoring fish movement is important to understand how physiology adapts to environmental change. To explore the applicability of a video tracking system for determining if chemical cues attract or repel aquatic animals, the movement patterns of rock bream, Oplegnathus fasciatus, were analyzed upon exposure to various materials, including extracts of sea urchin, rock worm, bait worm, krill, barley kernel, and commercial fish feed. Pellets were prepared by mixing freeze-dried tissues with a cellulose and corn flour mixture. Behavioral analysis was carried out with five fish that had been acclimated in the adaptation zone of a Y-shaped tank. Preference toward chemical cues was quantified by assessing the frequency rock bream were observed in a discrete zone around the test material located at the end of each arm and the duration each fish stayed in each zone. The analysis of fish movement upon exposure to commercial feed and barley kernel at each end, respectively, indicated a clear preference toward the feed relative to the barley kernel. Movement responses were further tested with pellets containing extracts of sea urchin, one of the species collected on a large scale, and other materials including krill and worms. A stronger preference toward sea urchin (100%) was observed based on the duration of stay in the test zone, compared to krill (90.1 ± 44.2%), bait worm (81.1 ± 39.1%), rock worm (73.7 ± 28.9%), and barley (63.9 ± 25.9%), under the conditions tested. A detailed comparison of rock bream movements toward each material revealed significant differences in frequency and duration, respectively, between pairs of test materials including krill (74 ± 29.8 and 375.6 ± 118.9) vs. rock worm (41.5 ± 18.7 and 160.2 ± 42.6), krill (86.3 ± 22.9 and 477.1 ± 84) vs. bait worm (36.2 ± 5.5 and 166.1 ± 50.7), and rock worm (45.9 ± 26.2 and 213.7 ± 100.1) vs. bait worm (34.6 ± 21.7 and 159.5 ± 98.5). Rock bream exhibited preference for the test materials in the following order: commercial fish feed > sea urchin > krill > rock worm > bait worm > barley. The results suggest a higher potency of sea urchin extract as a rock bream fishing bait compared to the other materials that are used as commercial bait.
We compared the nutritional requirements of whole larvae of the black seabream Acanthopagrus schlegeli, sweet fish Plecoglossus altivelis, olive flounder Paralichthys olivaeus and rock fish Sebastes schlegeli. The larvae were 20, 30, 14 and 5 DAH (or spawning) of black seabream, sweet fish, olive flounder and rock fish, respectively. Specific ${\alpha}$-amylase activity (mU/mg protein) was highest (8,324.9 mU/mg protein) in rock fish larvae (P<0.05). Specific trypsin-like protease activity was highest (11,330.1 mU/mg protein) in black seabream larvae (P<0.05), which also exhibited the highest activity, 685.5 mU/mg dry weight (P<0.05). The specific activities per mg protein and mg dry weight of black seabream were the highest (187.4 mU/mg protein and 11.3 mU/mg dry weight, respectively) (P<0.05). A/P, P/L and A/L ratios of rock fish were 1.47, 90.3 and 133.1, respectively (P<0.05). We present here basic larval digestive enzymatic nutritional requirement data.
Epitheliocystis in cultured rock firth was examined Epitheliocystis infected gill epithelial cells resulted in the cells enlarging to 20 to 400${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter. Key diagnostic feature is a large, granular, basophilic inclusion. filled with coccoid bodies, which occupies virtually the entire cell.
Various antibiotics, that could induce the appearance of resistant microorganisms, have been used for treatment or prevention of bacterial diseases in marine and ornamental fish. We determined and characterized the level of antibiotic-resistant bacteria and proportion of multi-drug resistant bacteria in intestinal microflora of both marine fish cultured in Korea and imported ornamental freshwater fish. For this the bacterial species and resistance to antibiotics were investigated in intestine of rock bream Oplegnathus fasciatus cultured in Korea and pearl gourami Trichogaster leeri imported from Singapore to characterise. Although the bacterial species were different, proportions of resistant bacteria to single antibiotics or multi-drug were higher in intestinal microflora of pearl gourami Trichogaster leeri imported from Singapore than in rock bream Oplegnathus fasciatus cultured in Korea. These results indicate that various antibiotics have been being used before trading without measures in the market of asian ornamental fishes, providing high risks for the emergence of multi-drug resistant bacteria.
Rock bream iridovirus (RBIV) is a member of the Megalocytivirus genus that causes severe mortality to rock bream (Oplegnathus fasciatus) with characteristic clinical signs of spleen enlargement. In this study, we assessed spleen size and RBIV copy number patterns in RBIV-infected rock bream to determine lethal and safe levels of virus copy number/spleen index that may define disease progress. We found that rock bream infected with RBIV ($1.1{\times}10^7virus\;copy\;number/100{\mu}l$) and held at 29, 26, 23 or $20^{\circ}C$ exhibited significantly higher levels of spleen size compared to $17^{\circ}C$. In dead condition (100% mortality at $20{\sim}29^{\circ}C$), the spleen index ($spleen\;weight/fish\;weight{\times}100$) and virus copy number were 3.00~5.38 and $10^6{\sim}10^8/{\mu}l$, respectively. Conversely, in survived condition (0% mortality at $17^{\circ}C$), spleen index and virus copy number was as low as not-infected control ($0.34{\sim}1.22/10^0{\sim}10^1/{\mu}l$, respectively). These findings suggest that spleen index can be an indicator of disease severity of RBIV disease.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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