유전자 염기서열의 직접적인 변화 대신 염기의 수정 또는 변형을 통해 유전자 발현이 조절되는 후성유전은 크게 DNA 메틸화(methylation), 히스톤 변형(modification), ncRNA(non-coding RNA)에 의해 제어가 가능하다. 본 연구에서는 후성유전을 이해하기 위해 노화 관련 유전자를 대상으로 데이터베이스를 구축하고, DNA 메틸화를 중심으로 후성 유전학적 특성을 분석하였다. 유전자의 upstream 부위와 프로모터(promoter) 부위에 있는 CpG island(CGI)에 메틸화가 될 경우 유전자 발현을 억제하기 때문에 CGI를 중심으로 전체 유전자 그룹과 노화 관련 유전자 그룹간의 분포도를 비교 분석하였다. 또한 메틸화와 관련된 CGI로부터 얻은 메틸화 관련 motif 패턴을 이용하여 노화 유전자와의 관계를 분석하였다. 노화 관련 유전자의 CGI 분포는 전사인자 결합자리의 분포와 일치하였다. 본 연구에서 제공하는 DNA 메틸화 중심의 후성유전학적 정보는 노화 관련 유전자의 조절과 노화를 이해하는데 도움이 될 것으로 사료된다.
Our objective is to identify molecular factors which contribute to the increased risk of smoke in human. About 677 workers who had control and experimental groups according to their urinary Naphthol levels were enrolled in our study. In the present study, we investigated the effects of smoking on gene expression profiles in human. We determined differential gene expression patterns in smoker versus non-smoker using cDNA microarray. Specific genes were up-or down-regulated according to smoking and age. Inflammatory related genes such as cytokine, interleukin, and tumor necrosis factor were up-regulated, DNA repair related genes such as high-mobility group (nonhistone chromosomal) protein 1, and protein 2 were down-regulated, apoptosis related genes such as myeloperoxidase and Bcl-2-associated athanogene were down-regulated, and cell cycle related genes were down-regulated. In our epidemiological study, notably, inflammatory, DNA repair, apoptosis, signal transduction, metabolism, cell cycle, cell proliferation, transcription related genes were regulated.
Objectives : Mangifera indica leaves are well known for having a variety of benefits, including anti-inflammatory, anti-tumor, diabetic retinopathy and diabetic vasculosis. However, the effects of Mangifera indica leaves on hair loss inhibition have not been studied. In this study, we investigated to find out the activity of Mangifera indica leaves on hair loss. Methods : 2,2'-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid(ABTS) analysis was performed to confirm the antioxidant efficacy of the water extract of Mangifera indica leaves (WEML). To examine the effect of WEML on cell viability in dermal papillar (DP) cells, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetra Zolium (MTS) analysis was performed. The changes in the mRNA expression level of the hair loss and hair growth-related genes in dermal papilla cells by WEML treatment were confirmed by quantitative RT-PCR. Results : In dermal papilla (DP) cells, ABTS analysis and MTS analysis of WEML showed antioxidant efficacy and low cytotoxicity. As a result of gene expression analysis through Quantitative RT-PCR, no changes in hair growth-related genes BMP6 and CTNNB1 was confirmed. but inhibitory activity of WEML on hair loss-related genes EGR1, SGK, DKK1, SRD5A1 and SRD5A2 was confirmed. Conclusion : We confirmed that WEML has excellent antioxidant efficacy and a inhibitory activity of hair loss-related genes including 5α-reductase genes. These results suggest that Mangifera indica leaves have a potential activity as a hair loss treatment for hair loss and hair growth. Biochemical or molecular biological research on hair loss is needed.
The study aimed to compare the necrotic enteritis (NE)-induced transcriptome differences between the spleens of Marek's disease resistant chicken line 6.3 and susceptible line 7.2 co-infected with Eimeria maxima/Clostridium perfringens using RNA-Seq. Total RNA from the spleens of two chicken lines were used to make libraries, generating 42,736,296 and 42,617,720 usable reads, which were assembled into groups of 29,897 and 29,833 mRNA genes, respectively. The transcriptome changes were investigated using the differentially expressed genes (DEGs) package, which indicated 3,255, 2,468 and 2,234 DEGs of line 6.3, line 7.2, and comparison between two lines, respectively (fold change ${\geq}2$, p<0.01). The transcription levels of 14 genes identified were further examined using qRT-PCR. The results of qRT-PCR were consistent with the RNA-seq data. All of the DEGs were analysed using gene ontology terms, the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) database and the DEGs in each term were found to be more highly expressed in line 6.3 than in line 7.2. RNA-seq analysis indicated 139 immune related genes, 44 CD molecular genes and 150 cytokines genes which were differentially expressed among chicken lines 6.3 and 7.2 (fold change ${\geq}2$, p<0.01). Novel mRNA analysis indicated 15,518 novel genes, for which the expression was shown to be higher in line 6.3 than in line 7.2 including some immune-related targets. These findings will help to understand host-pathogen interaction in the spleen and elucidate the mechanism of host genetic control of NE, and provide basis for future studies that can lead to the development of marker-based selection of highly disease-resistant chickens.
Objective: The aim of this study is to identify single nucleotide polymorphisms (SNPs) and genes related to pig IMF and estimate the heritability of intramuscular fat content (IMF). Methods: Genome-wide association study (GWAS) on 704 inbred Berkshires was performed for IMF. To consider the inbreeding among samples, associations of the SNPs with IMF were tested as random effects in a mixed linear model using the genetic relationship matrix by GEMMA. Significant genes were compared with reported pig IMF quantitative trait loci (QTL) regions and functional classification of the identified genes were also performed. Heritability of IMF was estimated by GCTA tool. Results: Total 365 SNPs were found to be significant from a cutoff of p-value <0.01 and the 365 significant SNPs were annotated across 120 genes. Twenty five genes were on pig IMF QTL regions. Bone morphogenetic protein-binding endothelial cell precursor-derived regulator, forkhead box protein O1, ectodysplasin A receptor, ring finger protein 149, cluster of differentiation, tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 1, SRY (sex determining region Y)-box 9 (SOX9), MYC proto-oncogene, and macrophage migration inhibitory factor were related to mitogen-activated protein kinase pathway, which regulates the differentiation to adipocytes. These genes and the genes mapped on QTLs could be the candidate genes affecting IMF. Heritability of IMF was estimated as 0.52, which was relatively high, suggesting that a considerable portion of the total variance of IMF is explained by the SNP information. Conclusion: Our results can contribute to breeding pigs with better IMF and therefore, producing pork with better sensory qualities.
β-1,3-glucanosyltransferases play essential roles in cell wall biosynthesis in yeast. Kluyveromyces lactis has six putative β-1,3-glucanosyltransferase genes. KlGAS1-1 and KlGAS1-2 are homologs of Saccharomyces cerevisiae gene GAS1. RT-qPCR indicated the transcription level of KlGAS1-1 was significantly reduced while heterologous protein (thermostable xylanase B) secretion was enhanced during medium optimization. To evaluate if these two events were related, and to improve xylanase B secretion in K. lactis, we constructed KlGAS1-1 and KlGAS1-2 single deletion strains and double deletion strain, respectively. KlGAS1-1 gene deletion resulted in the highest xylanase B activity among the three mutants. Only the double deletion strain showed morphology similar to that of the GAS1 deletion mutant in S. cerevisiae. The two single deletion strains differed in terms of cell wall thickness and xylanase B secretion. Transcription levels of β-1,3-glucanosyltransferase genes and genes related to protein secretion and transport were assayed. The β-1,3-glucanosyltransferase genes displayed transcription complementation in the cell wall synthesis process. KlGAS1-1 and KlGAS1-2 affected transcription levels of secretion- and transport-related genes. Differences in protein secretion ratio among the three deletion strains were associated with changes of transcription levels of secretion- and transport-related genes. Our findings indicate that KlGAS1-1 deletion is an effective tool for enhancing industrial-scale heterologous protein secretion in K. lactis.
Interplay between Cymbidium mosaic virus (CymMV)/Odontoglossum ringspot virus (ORSV) and its host plant Phalaenopsis equestris remain largely unknown, which led to deficiency of effective measures to control disease of P. equestris caused by infecting viruses. In this study, for the first time, we characterized viral small interfering RNAs (vsiRNAs) profiles in P. equestris co-infected with CymMV and ORSV through small RNA sequencing technology. CymMV and ORSV small interfering RNAs (siRNAs) demonstrated several general and specific/new characteristics. vsiRNAs, with A/U bias at the first nucleotide, were predominantly 21-nt long and they were derived predominantly (90%) from viral positive-strand RNA. 21-nt siRNA duplexes with 0-nt overhangs were the most abundant 21-nt duplexes, followed by 2-nt overhangs and then 1-nt overhangs 21-nt duplexes in infected P. equestris. Continuous but heterogeneous distribution and secondary structures prediction implied that vsiRNAs originate predominantly by direct Dicer-like enzymes cleavage of imperfect duplexes in the most folded regions of the positive strand of both viruses RNA molecular. Furthermore, we totally predicted 54 target genes by vsiRNAs with psRNATarget server, including disease/stress response-related genes, RNA interference core components, cytoskeleton-related genes, photosynthesis or energy supply related genes. Gene Ontology classification showed that a majority of the predicted targets were related to cellular components and cellular processes and performed a certain function. All target genes were down-regulated with different degree by vsiRNAs as shown by real-time reverse transcription polymerase chain reaction. Taken together, CymMV and ORSV siRNAs played important roles in interplay with P. equestris by down modulating the expression levels of endogenous genes in host plant.
Beef consumers valued meat quality traits such as texture, tenderness, juiciness, flavor, and meat color that determining consumers' purchasing decision. Most research on meat quality has focused on marbling, a key characteristic related to meat eating quality. However, other important traits such as meat texture, tenderness, and color have not much studied in cattle. Among these traits, meat tenderness and texture of cattle are among the most important factors affecting quality evaluation of consumers. Collagen is the main component of connective tissues.It greatly affects meat tenderness. The objective of this study was to determine significant variants and candidate genes associated with collagen contents trait (total collagen) through genome-wide association studies (GWAS). Phenotypic and genomic data from 135 Hanwoo were used. The BLUPF90 family program and GRAMMAR method for GWAS were applied in this study. A total of 73 potential single nucleotide polymorphisms (SNPs) showed significant associations with collagen content. They were located in or near 108 candidate genes. TMEM135 and ME3 genes were identified to have the most significant SNPs associated with collagen contents trait. Data indicated that these genes were related to collagen. Biological processes and pathways for the prediction of biological functions of candidate genes were confirmed. We found that candidate genes were involved in positive regulation of CREB transcription factor activity and actin cytoskeleton related to tenderness and texture of beef. Three genes (CRTC3, MYO1C and MYLK4) belonging to these biological functions were related to tenderness. These results provide a basis for improving genomic characteristics of Hanwoo for the production of tender beef. Furthermore, they could be used they could be used as an index to select desired traits for consumers.
Objectives: Previously, we sought to compile a list of genes expressed during early folliculogenesis by using cDNA microarray to investigate follicular gene expression and changes during primordialprimary follicle transition and development of secondary follicles (Yoon et al., 2005). Among those genes, a group of genes related to the cell size growth was characterized during the ovarian development in the present study. Methods: We determined ovarian expression pattern of six genes related to the cell size growth (cyr61, emp1, fhl1, socs2, wig1 and wisp1) and extended into CCN family (${\underline{c}}onnective$ tissue growth factor/${\underline{c}}ysteine$-rich 61/${\underline{n}}ephroblastoma$-overexpressed), ctgf, nov, wisp2, wisp3, including cyr61 and wisp1 genes. Expression of mRNA and protein according to the ovarian developmental stage was evaluated by in situ hybridization, and/or semiquantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), and immunohistochemistry, respectively. Results: Among 6 genes related to the cell size growth, cyr61 and wisp1 mRNA was detected only in oocytes in the postnatal day5 mouse ovaries. cyr61 mRNA expression was limited to the nucleolus of oocytes, while wisp1 was expressed in the cytoplasm and nucleolus of oocytes, except nucleus. cyr61 mRNA expression, however, was found in granulosa cells from secondary follicles. The rest 4 genes in the cell size growth group were detected in oocytes, granulosa and theca cells. Cyr61 and Wisp1 proteins were expressed in the oocyte cytoplasm from primordial follicle stage. Especially, Cyr61 protein was detected in pre-granulosa cells, Wisp1 protein was not. By using RT-PCR, we evaluated and decided that Cyr61 protein is produced by their own mRNA in pre-granulosa cells that was not detected by in situ hybridization. cyr61 and wisp1 genes are happen to be the CCN family members. The other members of CCN family were also studied, but their expression was detected in oocytes, granulose and theca cells. Conclusions: We firstly characterized the ovarian expression of genes related to the cell size growth and CCN family according to the early folliculogenesis. Cyr61 protein expression in the pre-granulosa cells is profound in meaning. Further functional analysis for cyr61 in early folliculogenesis is under investigation.
Doxorubicin and daunorubicin are excellent chemotherapeutic agents utilized for several types of cancer but the irreversible cardiac damage is the major limitation for its use. The biochemical mechanisms of doxorubicin- and daunorubicin- induced cardiotoxicity remain unclear. There are many reports on toxicity of doxorubicin and doxorubicin in cardiomyocytes, but effects in cardiovascular system by these drugs are almost not reported. In this study, we investigated gene expression profiles in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) to better understand the causes of doxorubicin and doxorubicininduced cardiovascular toxicity and to identify differentially expressed genes (DEGs). Through the clustering analysis of gene expression profiles, we identified 124 up-regulated common genes and 298 down-regulated common genes changed by more than 1.5-fold by all two cardiac toxicants. HUVECs responded to doxorubicin and doxorubicin damage by increasing levels of apoptosis, oxidative stress, EGF and lipid metabolism related genes. By clustering analysis, we identified some genes as potential markers on apoptosis effects of doxorubicin and doxorubicin. Six genes of these, BBC3, APLP1, FAS, TP53INP, BIRC5 and DAPK were the most significantly affected by doxorubicin and doxorubicin. Thus, this study suggests that these differentially expressed genes may play an important role in the cardiovascular toxic effects and have significant potential as novel biomarkers to doxorubicin and doxorubicin exposure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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