Plastids, which are organelles unique to plant cells, bear their own genome that is organized into DNA-protein complexes (nucleoids). Regulation of gene expression in the plastid has been extensively investigated because this organelle plays an important role in photosynthesis. Few attempts, however, have been made to characterize the regulation of plastid gene expression at the chromosomal structure, using plastid nucleoids. In this report, we summarize the recent progress in the characterization of DNA-binding proteins in plastids, with special emphasis on CND41, a DNA binding protein, which we recently identified in the choloroplast nucleoids from photomixotrophically cultured tobacco cells. CND41 is a protein of 502 amino acids which consisted of a transit peptide of 120 amino acids and a mature protein of 382 amino acids. The N-terminal of the 'mature' protein has lysine-rich region which is essential for DNA-binding. CNA41 also showed significant identities to some aspartyl proteases. Protease activity of purified CND41 has been recently confirmed and characterized. On the other hand, characterization of accumulation of CND41 both in wild type and transgenic tobacco with reduced amount of CND41 suggests that CND41 is a negative regulator in chloroplast gene expression. Further investigation indicated that gene expression of CND41 is cell-specifically and developmentally regulated as well as sugar-induced expression. The reduction of CND41 expression in transgenic tobacco also brought the stunted plant growth due to the reduced cell length in stem. GA3 treatment on apical meristem reversed the dwarf phenotype in the transformants. Effects of CND41 expression on GA biosynthesis will be discussed
.betha.-galactosidase activity of Escherichia coli cells containing operon fusion nhaA'-'lacZ was monitored to study the regulation of expression of nhaA gene under various conditions. The expression of the fusion was enhanced only by chemicals containing Na$^{+}$ or Li$^{+}$. This Na$^{+}$ or Li$^{+}$. This Na$^{+}$(Li$^{+}$)-specific enhancement of .betha.-galactosidase activity represented the increase in the rate of synthesis of .betha.-galactosidase rather than the decrease in the breakdown rate. The induction pattern was influenced by copy numbers of the gene. Induction by Na$^{+}$ or Li$^{+}$ was concentration and time dependent, reaching maximum 5-6 fold induction after 2 hours at 0.4-0.5 M for Na$^{+}$ or at 0.25-0.35 M for Li$^{+}$, Although the expression was induced at much lower concentration of Na$^{+}$ at alkaline pH values than at neutral pH in the presence of Na$^{+}$, alkaline pH itself did ot induced the expression of the fusion in the absence of Na$^{+}$. Temperature shift and growth phase of culture did not affect the level of induction.he level of induction.
The histone-like nucleoid structuring protein (H-NS) is an abundant global regulator of environmentally controlled gene expression. Herein, we demonstrate that H-NS represses the expression of LeuO, the master regulator of the cyclic(Phe-Pro)-dependent signaling pathway, by directly binding to the upstream region of the gene. H-NS binds to a long stretched region (more than 160-bp long), which overlaps with binding sites for ToxR and LeuO. A high quantity of H-NS outcompetes ToxR for binding to the cis-acting element of leuO. However, our footprinting analyses suggests that the binding of H-NS is relatively weaker than LeuO or ToxR at the same molarity. Considering that the DNA nucleotide sequences of the upstream regions of leuO genes are highly conserved among various Vibrio, such patterns as those found in V. vulnificus would be a common feature in the regulation of leuO gene expression in Vibrionaceae. Taken together, these results suggest that, in species belonging to Vibrionaceae, H-NS regulates the expression of leuO as a basal stopper when cFP-ToxR mediated signaling is absent.
Melatonin, which is the main product of the pineal gland, has well documented antioxidant and immune-modulatory effects. Macrophages produce molecules that are known to play roles in inflammatory responses. We conducted microarray analysis to evaluate the global gene expression profiles in response to treatment with melatonin in lipopolysaccharide (LPS) activated RAW 264.7 macrophage cells. In addition, eight genes were subjected to real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) to confirm the results of the microarray. The cells were treated with LPS or melatonin plus LPS for 24 hr. LPS induced the up-regulation of 1073 genes and the down-regulation of 1144 genes when compared to the control group. Melatonin pretreatment of LPS-stimulated RAW 264.7 cells resulted in the down regulation of 241 genes and up regulation of 164 genes. Interestingly, among genes related to macrophage-mediated immunity, LPS increased the expression of seven genes (Adora2b, Fcgr2b, Cish, Cxcl10, Clec4n, Il1a, and Il1b) and decreased the expression of one gene (Clec4a3). These changes in expression were attenuated by melatonin. Furthermore, the results of real-time PCR were similar to those of the microarray. Taken together, these results suggest that melatonin may have a suppressive effect on LPS-induced expression of genes involved in the regulation of immunity and defense in RAW 264.7 macrophage cells. Moreover, these results may explain beneficial effects of melatonin in the treatment of various inflammatory conditions.
Rock bream iridovirus (RBIV) is a megalocytivirus widely infected in various fish species in Korea, causing symptoms of acute inflammation and enlargement of spleen. In our previous study, RBIV induced the initial upregulation but later down-regulation of proinflammatory cytokines and IFN1 gene expression. Signal transducers and activators of transcriptions (STAT) are transcription factors involved in the regulation of immune genes including IFNs. This study was conducted to analyse the expression of STAT2. The expressional study of STAT2 gene was performed in head kidney and spleen upon RBIV infection and immune stimulants like LPS or poly I:C in vitro. Consequently, STAT2 gene expression pattern was different in head kidney and spleen as it was significantly up-regulated by LPS from 4 h to 8 h but down-regulated at 24 h while up-regulated by poly I:C at 8 h in head kidney while, in spleen, STAT2 gene expression was down regulated by LPS but significantly up-regulated by poly I:C. Upon RBIV stimulation, STAT2 gene expression was significantly down-regulated by high dose RBIV at 4 h but up-regulated at 8 h and 24 h in head kidney. In spleen cells, it was up-regulated by medium dose RBIV at 4 h and by high dose RBIV at 4 h and 8 h but down regulated later then. In vivo, STAT2 gene expression was not significantly affected by RBIV infection while significant up-regulated by vaccination at day 7 post-vaccination, indicating STAT2 gene can be involved in adaptive immune response in rock bream.
Kyung-il Kim;Rajib Hossain;Jiho Ryu;Hyun Jae Lee;Choong Jae Lee
Biomolecules & Therapeutics
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제31권5호
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pp.544-549
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2023
In this study, artesunate, an antimalarial agent, was investigated for its potential effect on the gene expression of airway MUC5AC mucin. The human pulmonary epithelial NCI-H292 cells were pretreated with artesunate for 30 min and then stimulated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), for the following 24 h. The effect of artesunate on PMA-induced nuclear factor kappa B (NF-kB) signaling pathway was also examined. Artesunate inhibited the glycoprotein production and mRNA expression of MUC5AC mucins, induced by PMA through the inhibition of degradation of inhibitory kappa Bα (IkBα) and NF-kB p65 nuclear translocation. These results suggest artesunate suppresses the gene expression of mucin through regulation of NF-kB signaling pathway, in human pulmonary epithelial cells.
Kwon, Kisang;Suh, Hyun-Woo;Kim, Hong Geun;Kwon, O-Yu
대한의생명과학회지
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제26권1호
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pp.37-41
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2020
The hemolymph of Korean rhinoceros Allomyrina dichotoma consists of blood and lymph in which various kinds of proteins function physiologically. We have previously demonstrated that A. dichotoma hemolymph has the potential to treatment and prevent diabetes through activating transcription factor 3-gene (ATF3) regulation. In this study, we investigate the expression of Kruppel-like factor 4 (KLF4) in A. dichotoma hemolymph-treated INS-1 pancreatic β-cells. The new findings show that A. dichotoma hemolymph, which upregulates KLF4 gene expression in a dose-dependent and time-dependent manner. In addition, hemolymph combine with mild endoplasmic reticulum (ER) stress, which also differentially regulates KLF4 gene expression. These results may provide insights to KLF4 gene-related disease therapies through KLF4 gene regulation.
The glpD genes encoding gly-3-p dehydrogenase is essential for the aerobic growth of E. coli on glycerol or gly-3-p. The glpE gene, the function of which is unknownm is transcribed divergently with respect to glpD gene. Expression of the adjacent but divergently transcribed glpD the glpE genes is positively regulated by the cAMP-CRP complex. In this study, for a precise investigation of the functional elements in the regulatory region for transcription activation by cAMP-CRP, deletion mutation have been introducted into the regulatory region. The effect of the deletion mutant on transcriptional regulation was tested in vivo by $\beta$-galctosidase activity. Deletion mutants in the regulatory region of glpD demonstrated that the presence of the CRP-binding site resulted in an sixfold increase in promoter activity. And also deletion mutants of glpE gene demonstrated that the presence of the CRP-binding site resulted in an eightfold increase in promoter activity. Insertion of 22 bp oligomer in the deletion mutants has shown that the CRP binding site is need for maximal expression of glpD and glpE genes. glpD and glpE gene, cAMP-CRP complex, deletion mutant, transcriptional regulation.
An, Byung Chull;Jung, Nak-Kyun;Park, Chun Young;Oh, In-Jae;Choi, Yoo-Duk;Park, Jae-Il;Lee, Seung-won
Molecules and Cells
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제39권8호
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pp.631-638
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2016
Glutathione peroxidase 3 (GPx3), an antioxidant enzyme, acts as a modulator of redox signaling, has immunomodulatory function, and catalyzes the detoxification of reactive oxygen species (ROS). GPx3 has been identified as a tumor suppressor in many cancers. Although hyper-methylation of the GPx3 promoter has been shown to down-regulate its expression, other mechanisms by which GPx3 expression is regulated have not been reported. The aim of this study was to further elucidate the mechanisms of GPx3 regulation. GPx3 gene analysis predicted the presence of ten glucocorticoid response elements (GREs) on the GPx3 gene. This result prompted us to investigate whether GPx3 expression is regulated by the glucocorticoid receptor (GR), which is implicated in tumor response to chemotherapy. The corticosteroid dexamethasone (Dex) was used to examine the possible relationship between GR and GPx3 expression. Dex significantly induced GPx3 expression in H1299, H1650, and H1975 cell lines, which exhibit low levels of GPx3 expression under normal conditions. The results of EMSA and ChIP-PCR suggest that GR binds directly to GRE 6 and 7, both of which are located near the GPx3 promoter. Assessment of GPx3 transcription efficiency using a luciferase reporter system showed that blocking formation of the GR-GRE complexes reduced luciferase activity by 7-8-fold. Suppression of GR expression by siRNA transfection also induced down-regulation of GPx3. These data indicate that GPx3 expression can be regulated independently via epigenetic or GR-mediated mechanisms in lung cancer cells, and suggest that GPx3 could potentiate glucocorticoid (GC)-mediated anti-infla-mmatory signaling in lung cancer cells.
유전자 염기서열의 직접적인 변화 대신 염기의 수정 또는 변형을 통해 유전자 발현이 조절되는 후성유전은 크게 DNA 메틸화(methylation), 히스톤 변형(modification), ncRNA(non-coding RNA)에 의해 제어가 가능하다. 본 연구에서는 후성유전을 이해하기 위해 노화 관련 유전자를 대상으로 데이터베이스를 구축하고, DNA 메틸화를 중심으로 후성 유전학적 특성을 분석하였다. 유전자의 upstream 부위와 프로모터(promoter) 부위에 있는 CpG island(CGI)에 메틸화가 될 경우 유전자 발현을 억제하기 때문에 CGI를 중심으로 전체 유전자 그룹과 노화 관련 유전자 그룹간의 분포도를 비교 분석하였다. 또한 메틸화와 관련된 CGI로부터 얻은 메틸화 관련 motif 패턴을 이용하여 노화 유전자와의 관계를 분석하였다. 노화 관련 유전자의 CGI 분포는 전사인자 결합자리의 분포와 일치하였다. 본 연구에서 제공하는 DNA 메틸화 중심의 후성유전학적 정보는 노화 관련 유전자의 조절과 노화를 이해하는데 도움이 될 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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