Soybean is the one of recalcitrant legume species for shoot induction. Shoot regeneration via direct organogenesis was investigated in five soybean cultivars, 'Dawon', 'Pungsan', 'Daewon', 'Taekwang' and 'Chongdoo 1' by using cotyledonary node explants. Out of 5 soybean cultivars, an efficient shoot regeneration condition was developed in the two soybean cultivars, 'Dawon' and 'Pungsan'. When various kinds of plant growth regulators with different concentration were estimated, the optimum medium condition for shoot induction in both soybean cultivars was MS + B5 vitamin supplemented with BA at concentration 2 mg/L. In addition, shoot formation efficiency was increased with 97.09% and 93.88% by the pretreatment of BA onto the explants before in vitro culture in both cultivars. Shoot induction in 'Dawon' cultivar was originated from epidermal tissue and sub-epidermal layers when histological changes were investigated under shoot regeneration after culturing cotyledonary node segments on shoot induction medium for 0 to 21 days. Especially, cell dedifferentiation was observed from parenchyma cells to meristematic cell in 3-day cultured segments.
Jang, Won Seok;Kim, Min Gu;Hwang, Dae Suk;Kim, Gyoo Cheon;Kim, Uk Kyu
International Journal of Oral Biology
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v.42
no.4
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pp.203-211
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2017
The aim of this study was to evaluate the role of demineralized and particulate autogenous tooth, and interleukin-6 in bone regeneration. A demineralized and particulate autogenous tooth was prepared and human osteoblast-like cells (MG63) and human osteosarcoma cells were inoculated into the culture. The rate of cell adhesion, proliferation and mineralization were examined, and the appearance of cellular attachment was observed. An 8 mm critical size defect was created in the cranium of rabbits. Nine rabbits were divided into three groups including: An experimental group A (3 rabbits), in which a demineralised and particulate autogenous tooth was grafted; an experimental group B (3 rabbits), in which a demineralized, particulate autogenous tooth was grafted in addition to interleukin-6 (20 ng/mL); and a control group. The rabbits were sacrificed at 1, 2, 4 and 6 weeks for histopathological examination with H-E and Masson's Trichrome, and immunohistochemistry with osteocalcin. The cell-based assay showed a higher rate of cell adhesion, mineralization and cellular attachment in the experimental group A compared with the control group. The animal study revealed an increased number of osteoclasts, newly formed and mature bones in the experimental group A compared with the control group. Eventually, a higher number of osteoclasts were observed in the experimental group B. However, the emergence of newly formed and mature bone was lower than in the experimental group A. The current results suggest that treatment with demineralized and particulate autogenous tooth and interleukin-6 is not effective in stimulating bone regeneration during the bone grafting procedure.
Neural cell survival is an essential concern in the aging brain and many diseases of the central nervous system. Neural transplantation of the stem cells are already applied to clinical trials for many degenerative neurological diseases, including Huntington's disease, Parkinson's disease, and strokes. A critical problem of the neural transplantation is how to reduce their apoptosis and improve cell survival. Neurotrophic factors generally contribute as extrinsic cues to promote cell survival of specific neurons in the developing mammalian brains, but the survival factor for neural stem cell is poorly defined. To understand the mechanism controlling stem cell death and improve cell survival of the transplanted stem cells, we investigated the effect of plausible neurotrophic factors on stem cell survival. The neural stem cell, HiB5, when treated with PDGF prior to transplantation, survived better than cells without PDGF. The resulting survival rate was two fold for four weeks and up to three fold for twelve weeks. When transplanted into dorsal hippocampus, they migrated along hippocampal alveus and integrated into pyramidal cell layers and dentate granule cell layers in an inside out sequence, which is perhaps the endogenous pathway that is similar to that in embryonic neurogenesis. Promotion of the long term-survival and differentiation of the transplanted neural precursors by PDGF may facilitate regeneration in the aging adult brain and probably in the injury sites of the brain.
Recombinant chimeric plasmid constructed with Xba I digested pUBl10 and -pE194 was transformed by polyethylene glycol induced protoplast transformation system into Bacillus subtilis BR 151 on the mannitol regeneration media, and two genes of antibiotics resistance were expressed simultaneously in the transfromant. Transformation frequency of the recombinant plasmid was 6.5 $\times$ 10$^{-5}$ on the mannitol regeneration agar plate containing neomycin and erythromycin. The replication of recombinant plasmid in the recipient cells was confirmed by the alkaline extraction method and agarose gel electrophoresis.
The influences of ethylene inhibitors ($AgNO_3$ and silver thiosulfate) and cytokinins (BAP and TDZ) on shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of B. napus cv. Youngsan were investigated. The presence of $50{\mu}M$ Silver thiosulfate (STS) in shoot regeneration medium formed shoots at 60-68% after 3-4 weeks of culture, which was enhanced by 2-fold compared to that of Silver nitrate ($AgNO_3$). Moreover, cotyledon explants were more regenerative than hypocotyls; shoots from cotyledon explants began to occur 4-5 days earlier than that of hypocotyl explants. TDZ at a concentration of $8-10{\mu}M$ was effective for shoot regeneration, compared with BAP. Consequently, the optimal shoot regeneration response was observed in medium supplemented with $50{\mu}M\;STS+8{\mu}M\;TDZ$. In transmission electron microscopy (TEM) analysis, higher density of silver nanoparticles was shown to be accumulated widely inside the cell wall and plasmodesmata of regenerating leaf cultured in medium supplemented with $AgNO_3$. By contrast, in the cell cultured in medium with STS, fine-grained deposits were partly observed in the surroundings of the cell wall.
The purpose of this study was to evaluate the osteogenic capacity of water extract of danshen (Salvia miltiorrhiza Bunge). We have established in rat critical-sized calvarial defect model using the combination with collagen scaffold and danshen hydrophilic extract. All rats were extinguished at 8 weeks after bone graft surgery, and the bone regeneration ability of bone grafting sides was evaluated by plain radiography and micro-CT. These results revealed water extract of danshen had the potential to promote osteogenesis especially continuous oral administration with local treatment compared to one-shot local treatment. This compound may provide a new alternative agent for growth factors to promote bone healing and bone regeneration. In conclusion, these results suggest that danshen hydrophilic extract have the potential to promote osteogenesis in bone defects. Further studies about fusion technology with salvianolic acid B, peptides, growth factors, and scaffolds using of the combination of tissue engineering, cell engineering and mechanical engineering are needed.
To improve Bacillus strains producing biopolymer, conditions for protoplast formation and regeneration were investigated in biopolymer producing Bacillus subtilis K-1 and lactose utilizing Bacillus coagulans. Bacillus subtilis K-1 mutant (SM-2) and Bacillus coagulans mutants (CM-12) were marked auxotrophic and antibiotics-resistant (SM-2) and an antibiotics-resistant mutants, respectively. To formate protoplasts derived from the mutants, conditions were established as follows. For B. subtilis mutant SM-2, its culture in mid-logarithmic phase was added with penicillin G (1.0 unit/ml) and further reacted for 1.5 hr. Cells were collected and then treated in lysis fluid (pH 7.0) containing 0.4 M sucrose and lysozyme $25\;{\mu}g/ml$ for 40 min at $37^{\circ}$. Protoplast formation was very successful (99.6%) and the ratio of cell wall regeneration was 2.4%. For Bacillus coagulans mutant CM-12, its mid-logarithmic phase culture was treated with penicillin G (0.3 unit/ml) and glycine (0.5%) for 1hr. Cells were collected and then resuspended in lysis buffer (pH 7.0) containing 0.6 M lactose and lysozyme $(300\;{\mu}g/ml)$ for 30 min at $37^{\circ}$. Protoplast formation was also successful (90.8%) and cell wall regeneration ratio was similar to SM-2 (2.2%). To improve regeneration frequency, regeneration medium was obtained as followed condition,. Cell wall regeneration was improved 2-4 folds with 5.1% for B. subtilis SM-2 and 10.3% for B. coagulans CM-12 when protoplasts mixed with soft top agar(0.4%) was overlaid onto trypticase soy broth medium containing 0.4 M sucrose, 0.7% casamino acid, 1% PVP, 25 mM $MgCl_2,\;25\;mM\;CaCl_₂$ and 1.5% agar.
Eun Ji Lee;Seung-Ho Baek;Chi Hun Song;Yong Hwan Choi;Kyung Ho Han
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.12
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pp.1615-1621
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2022
Tissue regeneration is the ultimate treatment for many degenerative diseases, however, repair and regeneration of damaged organs or tissues remains a challenge. Previously, we showed that B1 Ab and H3 Ab induce stem cells to differentiate into microglia and brown adipocyte-like cells, while trafficking to the brain and heart, respectively. Here, we present data showing that another selected agonist antibody, P1 antibody, induces the migration of cells to the pancreatic islets and differentiates human stem cells into beta-like cells. Interestingly, our results suggest the purified P1 Ab induces beta-like cells from fresh, human CD34+ hematopoietic stem cells and mouse bone marrow. In addition, stem cells with P1 Ab bound to expressed periostin (POSTN), an extracellular matrix protein that regulates tissue remodeling, selectively migrate to mouse pancreatic islets. Thus, these results confirm that our in vivo selection system can be used to identify antibodies from our library which are capable of inducing stem cell differentiation and cell migration to select tissues for the purpose of regenerating and remodeling damaged organ systems.
We examined the effects of ${\beta}$-glucan-reinforced PLGA film and scaffold on HDFs (human dermal fibroblast) attachment and proliferation. The PLGA films were prepared by simple solvent-casting method. The prepared films were grafted with $(1{\to}3)(1{\to}6)-{\beta}-glucan$ in various ratios after plasma treatment on surface. The surface of the film was characterized by contact angle measurement, scanning electron microscope (SEM), and Fourier-transform infrared spectrophotometer (FT-IR). The amount of $(1{\to}3)(1{\to}6)-{\beta}-glucan$ in the prepared film was indirectly determined by phenol-sulfuric acid method. The HDFs (Human dermal fibroblasts) were used to evaluate the cell attachment and proliferation on PLGA specimens before and after plasma/${\beta}-glucan$ treatment. The result showed that the plasma treated groups exhibited more mont of ${\beta}-glucan$ might be grafted than the non plasma treated groups. Cell attachment was significantly enhanced in the plasma/${\beta}-glucan$ grafted group after 4 hours incubation (p<0.05) due to the improved hydrophilicity and cytoactivity effect of the ${\beta}-glucan$. The cell proliferation of plasma/${\beta}-glucan$ (2mg/ml) grafted group was the highest rate among the groups (p<0.05).
The Journal of Korea Institute of Information, Electronics, and Communication Technology
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v.15
no.5
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pp.387-395
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2022
PDRN (Polydeoxyribonucleotide) is a DNA-derived polymer that promotes self-renewal of damaged cells and tissues as a tissue regeneration active material. PDRN is a DNA fragment cut into small sizes by various physical or chemical methods. When administered to the body, PDRN binds and stimulates the adenosine A2A receptor on the surface of tissue cells to promote cell regeneration, accelerate wound healing, and reduce pain. Although PDRN is prepared from testis or semen of fish in most cass, PDRN extraction from various plants species was performed in the present study. Among 7 tested plant species, the highest DNA yield and purity was obtained form mugwort (Chrysanthemum coronarium, C.c), followed by broccoli (Brassica oleracea, B.o). Then, we evaluated the in vitro wound healing capacity of PDRNs prepared from these two selected plants. PDRN from C.c and B.o. significantly stimulated the wound healing process at ㎍/ml range. The present study suggests that PDRN from plant species can be an effective alternative to PDRN from marine organism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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