A thermophilic bacterium producing the extracellular cellulase-free xylanase was isolated from soil and has been identified as Bacillus sp. The optimal growth temperature was 50$\circ$C and the optimal pH, 7.0. Under the optimal growth condition, maximal xylanase production was 2.2 units/ml in the flask culture. The enzyme production was induced by xylan and xylose, but was repressed by sucrose or trehalose. The partially purified xylanase was most active at 70$\circ$C. It was found that the enzyme was stable at 65$\circ$C for 10 hours with over 75% of the activity. The enzyme was most active at pH 7.0 and retained 90% of its maximum activity between pH 5.0 and pH 9.0 though Bacillus sp. was not grown on alkaline conditions (>pH 8.0). In addition, the activity of xylanase was over 60% at pH 10.0. At the ambient temperature, the enzyme was stable over a pH range of 5.0 to 9.0 for 10 h, indicating that the enzyme is thermostable and alkalotolerant. The activity of xylanase was completely inhibited by metal ions including Hg$^{2+}$ and Fe$^{2+}$, while EDTA, phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), $\beta$-mercaptoethanol and SDS didn't affect its activity. The enzyme was also identified to exert no activity on carboxymethylcellulose, laminarin, galactomannan, and soluble starch.
Four chitinase producing bacteria, Arthrobacter nicotinae CH4, Arthrobacter nicotinae CHI3, Arthrobacter sp. CH5 and Micrococcus sp. CH3, were isolated from small crabs and shrimps. We investigated the optimum medium condition for the production of enzyme and high cell mass. The preferable medium composition was as follows: colchitin 0.1 %(w/v), glycerol 0.25%(w/v) and yeast extract 0.05%(w/v) in minimal midium ($K_{2}HPO_{4}$ 0.7 g/l, $KH_{2}PO_{4}$ 0.3 g/l, $MgSO_{4}{\cdot}5H_{2}O$ 0.5 g/l, $FeSO_{4}}{\cdot}7H_{2}O$ 0.01 g/l, $ZnSO_{4}$ 0.001 g/l, $MnCI_2$ 0.001 g/l, pH 7.0). This cell culture medium could be used directly as sample for measuring chitinase activity. Because it hardly conreducing sugar such as glucose (blank value=0), the detected reducing sugar can be considered as a chitinase reaction product. The results can be used for easy preparation method for determination of enzyme activity and analysis of enzyme-substrate reaction in step of screening of chitinase producing bacteria.
In this study, we tested possibility of replacing nitrite salts, which were always added during the meat product processing, with the metabolites produced by antimicrobial and red pigment producing Monascus strains. We have already shown that Monascus No. 116 strain has the highest antimicrobial activity among the strains isolated from Ang-Khak. Monascus isolate No. 229 was chosen due to its outstanding red pigment producing ability. The red pigment production by No. 229 was highest in the medium containing 8% sucrose, 2% yeast extract, 0.1% K2HPO4, 0.5% MgSO4. Optimum pH and temperature for the red pigment production were pH 6.2 and 3$0^{\circ}C$, was found in spot or Rf value 0.54 on TLC plate using ethyl acetate-acetone-water (4:4:1, v/v/v) as development solvent system. Isolate No. 116 and No. 229 were cultured in a optimal condition for the antimicrobial activity and red pigmentation. The culture concentrates were applied in situ to the production of instantly processed ham. Mixed application of 89 ppm Na-nitrite and 300 ppm of culture broth concentrate of Monascus isolate No. 116 and 500 ppm of red color produced by Monascus isolate No. 229 showed similar results with the single application of 94 ppm Na-nitrite. These results confirmed that the antimicrobial activity and red pigment of Monascus strains might be valuable to replace Na-nitrite salt in meat processing.
In this study, a halophilic protease-producing bacterium was isolated from the west seaside mud flats of Korea. The 16S rDNA nucleotide sequences of the isolate showed 99.5% sequence homology with those of Vibrio vulnificus and Vibrio fluvialis; therefore, the isolate was named Vibrio sp. YH-127. Gram staining and the carbohydrate metabolism test results supported the isolate as one from the Vibrio family. Optimum condition for the cell growth and for the protease activity were obtained when the isolate was cultured at 25$^{\circ}C$ and pH 7.0, with the salt concentration of the medium similar to that of sea water. Finally, the addition of Mg$^{++}$ ions into medium increases protease activity suggesting that the protease produced by the isolate was a metalloprotease.
과즙 및 과실주 제조에서 착즙 수율 향상, 혼탁방지, 삼의 벌효정제, 식물 조직배양들에 pectinase가 널리 이용되고 있다. 본연구에서는 삼지닥나무의 이용 및 응용하는 연구의 일환으로서 토양으로 부터 높은 pectinase 활성을 나타내는 균주를 분리, 동정하여 삼지닥나무를 분해시키는 pecrinase의 생산조건을 검토하였다. 경남일대에서 채취된 토양시료 100여점으로 부터 pectinase 활성이 높은 6균주의 형태학적, 생화학적특성을 조사하여 동정한 결과 Bacillussp.로 밝혀졌다. Bacillus sp.BS-214의 배양 특성과 pectinase 생성조건을 검토한 결과 온도 4$0^{\circ}C$,pH8.5, 배양시간 36시간에서 효소생산이 가장 양호햐였다. 균의 생육과 효소 생산에는 탄소원으로 1%의 농도의 polygalacturonic acid 와 질소원으로서 0.25%의 yeast extract가 가장 적합하였으며, 본 균주에서 생산된 효소에 의한 삼지닥나무의 펙틴질 분해도 관찰되었다.
식물조직을 분해하여 단세포화하는 효소, protopectinase를 생산하는 다수의 미생물을 토양에서 분리하였다. 이들 분리된 미생물의 배양여액에서 얻어진 조효소를 감자조직에 처리하여 단세포화된 감자세포를 확인할 수 있었다. 이들 미생물 중에서 비교적 높은 protopectinase의 효소활성을 보이는 균주를 선택하여 형태관찰 결과로부터 Rhizopus sp.임을 알 수 있었다. 선별된 균주 Rhizopus sp. R2의 배양여액에서 얻어진 protopectinase를 이용하여 감자조직의 단세포화를 시도하여 $40^{\circ}C$, pH 4 하에서 최적의 효소반응 조건을 보였다.
About 75 strains which utilize cholesterol as sole carbon and energy source were isolated from 10 samples of Kimchi and 18 samples of fermented fish food (2 Ojingo-jeots, salt-fermented squid ; 5 Changran-jeots, salt-fermented pollack tripe ; 5 Myungran-jeots, salt-fermented Alaska pollack roe ; 3 Gajami-sikhae-jeots, fermented flat fish ; 2 Gul-jeots, salt-fermented oyster ; a Juneo-jeots, salt-fermented shad). Among them tested, the 3T6-5Mj strain isolated from Changran-jeot showed the highest activity on cholesterol degradation. The optimal composition of medium for the producing cholesterol degradation enzyme by 3T6-5Mj strain was 1.0 g/L NH4NO3, 1.0 g/L K2HPO4, 0.1 g/L MgSO4.7H2O, 1.0 g/L FeSO4.7H2O, 1 g/L NaCl, 5 g/L Trypton, 1 g/L Cholesterol, and 5 g/L Maltose at 30$^{\circ}C$, pH 7.5, and the enzyme production reached a maximum level at 140 hours of cultivation.
A screening was performed to isolate exoploysaccharide-producing microorganisms, which synthesized specific exopolysaccharide for the substitutive of commercial polysaccharides, from natural sources. Soil bacterium, one of 378 mucoid isolates, was finally selected as potential producer of polysaccharides which made the culture broth very viscous and thus examined in detail for optimal medium composition. Isolated strain was identified as Xanthomonas sp. EPS- 1 from the results of morphological and biochemical characteristics. The composition of optimal medium for exopolysaccharide production was as follows: 50 g sucrose, 1.5 g peptone, 2 g KH$_{2}$PO$_{4}$, 2 g MgSO$_{4}$, -7H$_{2}$O, 3 g NaCl, 0.05 g CaCO$_{3}$, 0.07 g FeSO$_{4}$-7H$_{2}$O and 0.05 g MnSO$_{4}$-7H$_{2}$O in 1 liter of distilled water. From the experiments of temperature and pH dependence, the optimal conditions for exopolysaccharide biosynthesis seemed to be 30$\circ$C and 8.0, respectively. About 14.9 gram of maximum exopolysaccharide per liter was obtained at the initial pH 8.0, 30$\circ$C and 250 rpm in a flask culture. The exopolysaccharide EPS-1 had such potential as an emulsifying agent and a gelling agent in comparision with commercial exopolysaccharide.
At present, tendency of ERP(Enterprise Resource Planning) enterprises is that many ERP enterprises from abroad are rushing into capture of small and medium enterprises at home actively. SAP Korea and Korean Oracle have already showed their new product targeting domestic market of small or medium standing enterprise, and more, even MS(Micro Soft) also rushes into this market in earnest. The domestic business circle of ERP should prepare countermeasure by raising the perfection of product and having good command of minute marketing strategy to survive from aggressive strategy of SMB market. In addition, about the computerization of main affairs of business, ordering developing process was general that developing staffs analysed the affairs of each department that needed computerization and construct according to the operation process by using different tools, but condition is changing that businesses themselves are purchasing business application package from expert soft program enterprise and construct. Therefore, in this study, I try to grasp the problem of management, and define a new process that can help for more efficient management by making it an object producing and management module of enterprise 'K' that is one of domestic small and medium enterprise and that is operating ERP at present. As well, through the analysis of affair related producing, we are aiming to prepare for establishment of target, its range, and making the standard of result evaluation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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