The nonobese diabetic / severe combined immune deficiency (NOD/SCID) has been used for determination of proliferation and differentiation of hematopoietic stem cells as xenotransplantation animal model. In this study, we transplanted porcine hematopoietic cells from bone marrow into NOD/SCID mice via intravenous injection to confirm the activity of differentiation and proliferation for porcine hematopoietic cells in vivo. Interestingly, we observed the result of high efficiency with pig T lymphocytes in hematopoietic organs, liver, spleen lymph node, and bone marrow in NOD/SCID mice. The porcine $CD3^{+}$ T cells were detected with $5.4{\pm}1.9%$ in bone marrow, $15.4{\pm}7.3%$ in spleen, $21.3{\pm}1.4%$ in liver, and $33.5{\pm}32.8%$ in lymph node of NOD/SCID mice at 6 weeks after trans-plantation Furthermore, immunohistochemical analysis showed the high engraftment of porcine T lymphocytes in spleen of NOD/SCID mice. Our data suggest that NOD/SCID mice are excellent animal model to determinate the generation md function of pig T lymphocytes.
Pigs have anatomically and physiologically very similar to human and because of this, pigs are the possible xenotransplantation donors for human organs. PERVs (Porcine Endogenous Retroviruses) are known to be one of the possible obstacles for using porcine organs regardless of the immunological barriers. In order to understand the expression patterns of PERVs in Korean native pigs, we investigated PERV expressions in porcine liver, heart, spleen, and lung samples. After RNA extraction, two types of specific PERV envelope genes (ENV-A and ENV-B) were amplified using specific primers by RT-PCR. The results indicated that the variable PERV expressions were observed in inconsistent patterns among animals and tissues. The PERV expressions were verified with semi-quantitative real-time PCR with three replicates. Even though, these results confirm the previous findings that the PERVs were differentially expressed between animals and tissues. These results also give some valuable information for xenotransplantation when using the Korean native pigs as the organ donor.
Several animal species including pigs are directly involved in the zoonotic transmission of the hepatitis E virus (HEV) to humans. This study was conducted to detect HEV in bovine and porcine raw livers by nested reverse transcription-polymerase chain reaction. Zoonotic HEV strains were identified in 1.0 and 3.0% of the tested bovine and porcine livers, respectively. HEV-4 was detected in the bovine livers, but both HEV-3 and HEV-4 were identified in the porcine livers. These results indicate that zoonotic transmission of HEV may occur via consumption of raw or undercooked livers of pigs and cattle.
Optimal conditions for utilizing the slaughtered porcine blood and liver for yeast culture and the effects of the yeast cultures on the growth of broiler chicks were investigated. The quantity of yeast cultured for 24hours in the BSG medium containing blood extracts containing 5% glucose and in the LSG medium containing liver extracts containing 5% glucose were higher by 4% and 10%, respectively, than that in the YEPD medium containing 1% yeast extracts, 2% bacto pepton and 2% glucose. Optimal concentrations of ammonium sulfate supplementation to the BSG medium to increase the quantity of yeast cultured for 24 and 48 hours were 100 mM(1.3%) and 50 mM(0.65%), respectively. The optimal pH for yeast culture in BSG medium ranged from 6 to 7. One percent supplementation of either ammonium sulfate or taurine to LSG medium increased the quantity of yeast by 18% and 9%, respectively, compared to no supplementation. The body weight of chicks fed with 2% and 4% yeast culture supplementations cultivated increased at the 4th week by 10%, with relative to no supplementation. The results from this study suggest that the slaughtered porcine blood and liver can be utilized for yeast culture which is used in animal diets.
Wang, Y.F.;Yu, M.;Liu, B.;Fan, B.;Wang, H.;Zhu, M.J.;Li, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.17
no.7
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pp.897-902
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2004
PSMC5 subunit, which belongs to the 26S proteasomal subunit family, plays an important role in the antigen presentation mediated by MHC class I molecular. Full-length cDNA of porcine PSMC5 was isolated using the in silico cloning and rapid amplification of cDNA ends (RACE). Amino acid was deduced and the primary structure was analyzed. Results revealed that the porcine PSMC5 gene shares the high degree of sequence similarity with its mammalian counterparts at both the nucleotide level and the amino acid level. The RT-PCR was performed to detect the porcine PSMC5 expression pattern in seven tissues and the result showed that high express level was observed in spleen, lung, marrow and liver while the low express level was in muscle. The full-length genomic DNA sequence of porcine PSMC5 gene was amplified by PCR and the genomic structure revealed that this gene was comprised by 12 exons and 11 introns. Best alignment of the cDNA and genomic exon DNA sequence presents 4 mismatches and this information potentially bears further study in gene polymorphisms.
The gene expression of porcine adiponectin and stearoyl coenzyme A desaturase (SCD) was investigated in this study. The partial gene sequences for adiponectin and SCD were amplified by RT-PCR from subcutaneous adipose tissue and cloned by TA cloning techniques. Sequences of these genes were determined and found to be highly homologous to that of other species, suggesting similar function of these genes as in other species. The transcripts of these adipocyte-related genes in pig tissues were measured by Northern analysis. The transcripts for adiponectin and SCD were highly expressed in porcine subcutaneous adipose tissue; the transcripts for SCD were also barely detected in the liver, but the greatest concentrations were in the adipose tissue. In porcine stromalvascular cells (S/V cells) cultured in vitro, transcripts for adiponectin and SCD increased gradually during adipocyte differentiation. The level of adipocyte adiponectin mRNA was associated with late adipocyte differentiation, indicating the gene may not be involved in adipocyte differentiation but has great importance in porcine adipocyte functions. The SCD transcripts were not detectable until 2 d after induction of adipocyte differentiation. It was highly expressed in differentiating porcine adipocytes (2 to 10 d after the induction of adipocyte differentiation), indicating a significant role of SCD in adipocytes.
Ahn, Bum-Mo;Kim, Yeong-Jin;Shin, Jennifer H.;Kim, Jung
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
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v.33
no.11
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pp.1202-1208
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2009
An inverse finite element (FE) model parameter estimation algorithm can be used to characterize mechanical properties of biological tissues. Using this algorithm, we can consider the influence of material nonlinearity, contact mechanics, complex boundary conditions, and geometrical constraints in the modeling. In this study, biomechanical experiments on macro and micro samples are conducted and characterized with the developed algorithm. Macro scale experiments were performed to measure the force response of porcine livers against mechanical loadings using one-dimensional indentation device. The force response of the human liver cancer cells was also measured by the atomic force microscope (AFM). The mechanical behavior of porcine livers (macro) and human liver cancer cells (micro) were characterized with the algorithm via hyperelastic and linear viscoelastic models. The developed models are suitable for computing accurate reaction force on tools and deformation of biomechanical tissues.
Lee Chang-Woo;Bak Ung-Bok;Chang Byoung-Sun;Kim Nam-Joong;Lee Byung-Gueon
Journal of Veterinary Clinics
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v.9
no.1
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pp.333-366
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1992
Safety of recombinant porcine somatotropin administration on pig was studied using 32 Landrace x Yorkshire crossbred pigs. The starting body weight ranged from 55.5kg to 65.3kg. Eight pigs were allotted to each low dose group of sustained releasing rPST(SL), high dose group of sustained releasing rPST(SH), daily injection group of rPST(DI), and control group(C). Pigs in SL group and SH group were injected subcutaneously twice in 3 week-interval with 1000$\mu\textrm{g}$ and 2000$\mu\textrm{g}$ of sustained releasing rPST per kg body weight, respectively. Pigs in DI group were injected intramuscularly with 100$\mu\textrm{g}$ of rPST everyday for 6 weeks. Blood was collected from anterior vena cava just before the first treatment, and at four weeks and six weeks of experiment. Hematological parameters and blood chemical parameters indicating liver function, kidney function, electrolyte metabolism, mineral metabolism and lipid metabolism were determined. Necropsy and urinalysis were performed after final blood collection. The results were summarized as follows, and it is concluded that rPST administration does not affect pig health negatively. 1. rPST administration did not affect kidney function as manisfested by BUN, creatinine and urinalysis. 2. rPST administration did not affect liver function as manisfested by total protein, albumin, serum AST activity serum ALT activity serum ALP activity, serum LDH activity, serum GGT activity and serum SDH activity. 3. rPST administration did not affect skeletal muscle, cardiac muscle and brain as manifasted by serum AST activity and serum LDH activity. 4. rPST administration increased blood glucose level within normal range. 5. rPST administration did not affect lipid metabolism as manisfested by triglyceride, cholesterol, and phospholipid concentrati on. 6. rPst administration dia not affect mineral metabolism as manisfested by calcium, phosphorus, magnesium and iron concentration. 7. rPST administration did not affect electrolyte metabolism as manisfested by Na, K, chloride concentration. 8. rPST administration did not affect erythrocyte count, leukocyte count, thrombocyte count, and plasma fibrinogen level.
The full-length cDNA of the porcine peroxisomal ${\Delta}^3$,${\Delta}^2$-enoyl-CoA isomerase (PECI) gene encodes a monofunctional peroxisomal ${\Delta}^3$,${\Delta}^2$-enoyl-CoA isomerase. Cloning and sequencing of the porcine PECI cDNA revealed the presence of an 1185-base pair open reading frame predicted to encode a 394-amino acid protein by the 5'rapid amplification of cDNA ends (5'RACE) and EST sequences. The porcine PECI gene was expressed in seven tissues (heart, liver, spleen, lung, kidney, skeletal muscle, fat) which was revealed by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). The porcine PECI was mapped to SSC71/2 p11-13 using the somatic cell hybrid panel (SCHP) and the radiation hybrid panel (RH) (LOD score 12.84). The data showed that PECI was closely linked to marker S0383. A C/T single nucleotide polymorphism in PECI exon 10 (3'UTR) was detected as a PvuII PCR-RFLP. Association analysis in our experimental pig population showed that different genotypes of PECI gene were significantly associated with the Average Backfat thickness (ABF) (p<0.05) and Buttock backfat thickness (p<0.01).
Objective: Mutations in low-density lipoprotein receptor (LDLR), which encodes a critical protein for cholesterol homeostasis and lipid metabolism in mammals, are involved in cardiometabolic diseases, such as familial hypercholesterolemia in pigs. Whereas microRNAs (miRNAs) can control LDLR regulation, their involvement in circulating cholesterol and lipid levels with respect to cardiometabolic diseases in pigs is unclear. We aimed to identify and analyze LDLR as a potential target gene of SSC-miR-20a. Methods: Bioinformatic analysis predicted that porcine LDLR is a target of SSC-miR-20a. Wild-type and mutant LDLR 3'-untranslated region (UTR) fragments were generated by polymerase chain reaction (PCR) and cloned into the pGL3-Control vector to construct pGL3 Control LDLR wild-3'-UTR and pGL3 Control LDLR mutant-3'-UTR recombinant plasmids, respectively. An miR-20a expression plasmid was constructed by inserting the porcine premiR-20a-coding sequence between the HindIII and BamHI sites in pMR-mCherry, and constructs were confirmed by sequencing. HEK293T cells were co-transfected with the miR-20a expression or pMR-mCherry control plasmids and constructs harboring the corresponding 3'-UTR, and relative luciferase activity was determined. The relative expression levels of miR-20a and LDLR mRNA and their correlation in terms of expression levels in porcine liver tissue were analyzed using reverse-transcription quantitative PCR. Results: Gel electrophoresis and sequencing showed that target gene fragments were successfully cloned, and the three recombinant vectors were successfully constructed. Compared to pMR-mCherry, the miR-20a expression vector significantly inhibited wild-type LDLR3'-UTR-driven (p<0.01), but not mutant LDLR-3'-UTR-driven (p>0.05), luciferase reporter activity. Further, miR-20a and LDLR were expressed at relatively high levels in porcine liver tissues. Pearson correlation analysis revealed that porcine liver miR-20a and LDLR levels were significantly negatively correlated (r = -0.656, p<0.05). Conclusion: LDLR is a potential target of miR-20a, which might directly bind the LDLR 3'-UTR to post-transcriptionally inhibit expression. These results have implications in understanding the pathogenesis and progression of porcine cardiovascular diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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