Jang Ji Wook;Lee Bong;Han Chang Whan;Kim Mun Suk;Cho Sun Hang;Lee Hai Bang;Khang Gilson
Polymer(Korea)
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v.28
no.5
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pp.382-390
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2004
One of the significant natural bioactive materials is demineralized bone particle (DBP) whose has a powerful induce. of new bone growth. In this study, we developed the DBP loaded poly-lactide (PLA) and poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds for the possibility of the application of the tissue engineered bone. PLA/DBP and PLGA/DBP scaffolds were prepared by solvent casting/salt leaching method and were characterized by porosimeter, scanning electron microscopy. BMSCs were stimulated by osteogenic medium and characterized by histological stained Wright-Giemsa, Alizarin red, von Kossa, and alkaline phosphate activity (ALP). DBP impregnated scaffolds with BMSCs were implanted into the back of athymic nude mouse to observe the effect of DBP on the osteoinduction compared with control scaffolds. It can be observed that the porosity was above $90.2\%$ and the pore size was above 69.1$\mu$m. BMSCs could be differentiated into osteoprogenitor cells as result of wright-giemsa, alizarin red, von Kossa and ALP staining. In in vivo study, we could observed calcification region in PLA/DBP and PLGA/DBP groups, but calcification did not occur almost in control scaffolds. From these results, it seems that DBP as well as BMSCs play an important role for bone induction in PLA/DBP and PLGA/DBP scaffolds.
Kim, Cho-Min;Kim, Soon-Hee;Oh, A-Young;Kim, Geun-Ah;Lee, Il-Woo;Rhee, John-M.;Khang, Gil-Son
Polymer(Korea)
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v.32
no.6
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pp.529-536
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2008
We manufactured poly (L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds impregnated demineralized bone particle (DBP) and hyaluronic acid (HA) by ice-particle leaching method and tested their ability of sustained release of brain derived neurotrophic factor (BDNF). BDNF (50 and 200 ng) mixed with PLGA, DBP/PLGA, HA/PLGA and DBP/HA/PLGA scaffold. The release profiles of BDNF from BDNF loaded scaffolds were assayed using ELISA. Morphological changes of scaffolds by BDNF release were also observed by SEM. BDNF stably and sustainedly released from DBP/HNPLGA than from PLGA and DBP/PLGA scaffolds. DBP/HA/PLGA scaffolds showed the great structural changes, which demonstrated BDNF release amount from DBP/HA/PLGA scaffolds were highest in all groups. We suggest that BDNF loaded DBP/HNPLGA scaffold would be very useful for nerve regeneration.
Articular cartilage has an intrinsic difficulty in recovering damages, which requires its tissue engineering treatment. Demineralized bone particle (DBP) contains various bioactive molecules. It is widely used biomaterials in the field of tissue engineering. We developed the synthetic/natural hybrid scaffolds with poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) and solution of DBP. The chondrocytes were seeded on the PLGA-DBP scaffolds and MTT assay, morphological observation, biological assay for collagen, sGAG, and RT-PCR were performed to analyze the effect of the DBP on cell viability and extracellular matrix secretion. In SEM observation, we observed that PLGA-DBP scaffolds had uniform porosity. As MTT assay showed scaffolds containing DB solution had higher cell viability then only PLGA scaffolds. The PLGA-DBP scaffolds had better ECM production than PLGA scaffold. It was proven by the higher specific mRNA expression in the PLGA-DBP scaffold than that in PLGA scaffold. These results indicated that PLGA-DBP scaffolds might serve as potential cell delivery vehicles and structural bases for in vitro tissue engineered articular cartilage.
Oh, A-Young;Kim, Soon-Hee;Lee, Sang-Jin;Yoo, James J.;Dyke, Mark van;Rhee, John M.;Khang, Gil-Son
Polymer(Korea)
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v.32
no.5
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pp.403-408
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2008
Keratin is the major structural fibrous protein providing outer covering such as wool, hair, and nail. Keratin is useful as natural protein. We developed the keratin loaded poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds (keratin/PLGA) for the possibility of the application of the tissue engineering using bone marrow mesenchymal (BMSCs). Keratin/PLGA (contents 0%, 10%, 20% and 50% of PLGA weight) scaffolds were prepared by solvent casting/salt leaching method. We characterized porosity, wettability, and water uptake ability, DSC of keratin/PLGA scaffold. We seeded BMSCs isolated from the femurs of rat into the inner core of the hybrid scaffold. Celluar viability were assayed by 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) test. We confirmed that keratin/PLGA scaffold is hydrophilic by wettability, and water uptake ability measurement results. In MTT assay results, cell viability in scaffolds impregnated 10 and 20 wt% of keratin were higher than other scaffolds. In conclusion, we suggest that keratin/PLGA scaffold may be useful to tissue engineering using BMSCs.
Proceedings of the Polymer Society of Korea Conference
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2006.10a
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pp.263-263
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2006
Poly (ethylene glycol)(PEG) - Poly (${\varepsilon}-caprolactone(CL)$) - Poly (D,L lactide(LA) (PCLA-PEG-PCLA) was synthesized by ring-opening polymerization to form temperature sensitive hydrogel triblock copolymer. The triblock copolymer was acrylated by acryloyl chloride. ${\beta}-amino$ ester was used as a pH sensitive moiety, in this study ${\beta}$- amino ester obtained from 1,4-butandiol diacrylate, and 4, 4' trimethylene dipiperidine, it have pKb around 6.6. pH/temperature sensitive penta-block copolymer (PAE-PCL-PEG-PCL-PAE) was synthesized by addition polymerization from acrylated triblock copolymer, 1,4-butandiol diacrylate, and 4, 4' trimethylene dipiperidine. Their physicochemical properties of triblock and penta-block copolymers were characterized by $^1H-NMR$ spectroscopy and gel permeation spectroscopy. Sol-gel phase transition behavior of PAE-PCL-PEG-PCL-PAE block copolymers were investigated by remains stable method. Aqueous media of the penta-block copolymer (at 20 wt%) changed from a sol phase at pH 6.4 and $10^{\circ}C$ to a gel phase at pH 7.4 and $37^{\circ}C$. The sol-gel transition properties of these block copolymers are influenced by the hydrophobic/hydrophilic balance of the copolymers, block length, hydrophobicity, stereo-regularity of the hydrophobic of the block copolymer, and the ionization of the pH function groups in the copolymer depended on the changing of environmental pH, respectively. The degradation and the stabilization at pH 7.4 and $37^{\circ}C$, and the stabilization at pH 6.4 and $10^{\circ}C,\;5^{\circ}C,\;0^{\circ}C$, of the gel were determined. The results of toxicity experiment show that the penta block copolymer can be used for injection drug delivery system. The sol?gel transition of this block copolymer also study by in vitro test ($200{\mu}l$ aqueous solution at 20wt% polymer was injected to mouse). Insulin loading and releasing by in vitro test was investigated, the results showed that insulin can loading easily into polymer matrix and release time is around 14-16days. The PAE-PCL-PEG-PCL-PAE can be used as biomaterial for drug, protein, gene loading and delivery.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.34
no.6
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pp.635-639
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2008
Objectives : the effect of different sterilization methods on the surface morphology of PPDO-hybrid-PLGA nanofiber scaffold and attachments of PC12 cell were investigated. Methods : Poly (p-dioxone)-hybrid-Poly (lactide-glycolide) (PPDO-hybrid-PLGA) nanofiber scaffold, fabricated in a tube form with 1.5 mm internal diameter, 0.2 mm thickness and 5 mm length, was prepared using electrospinning method. To study the surface morphology using SEM, The study group and control group in respective were; Control:Non-sterilized scaffold, Group I:scaffold sterilized with 70% Alcohol, Group II: scaffold sterilized with Ethylene Oxide at $65^{\circ}C$, and Group III: scaffold sterilized with Ethylene Oxide at $37^{\circ}C$. To investigate viability of the PC12 cell on the scaffold, The study group and control group in respective were; Control: sterilized with 70% Alcohol, Group I: sterilized with Ethylene Oxide at $65^{\circ}C$, and Group II: sterilized with Ethylene Oxide at $37^{\circ}C$. Results : 1. The surface morphology was slightly changed in Group I, II and Group III, compared with control. 2. The attachment of PC12 cells in Group I, II was not higher than in control Discussion : The attachment of PC12 cell is not influenced by different sterilization methods.
Background and Aims: Advances in the treatment of cervical cancer over the last decade have predominantly involved the development of genes directed at molecular targets. Gene therapy is recognized to be a novel method for the treatment of cervical cancer. Genes can be administered into target cells via nanocarriers. This study aimed to develop systemically administrable nano-vectors. Floate (Fa) containing gene loaded nanoparticles (NPs) could target HeLa human cervical cancer cells through combination with receptors on the cells to increase the nuclear uptake of genetic materials. Methods: Fa was linked onto Poly (ethylene glycol)-b-poly (D, L-lactide) (PEG-PLA) to form Fa-PEG-PLA, and the resulting material was used to load plasmids of enhanced green fluorescence protein (pEGFP) to obtain gene loaded nanoparticles (Fa-NPs/DNA). Physical-chemical characteristics, in vitro release and cytotoxicity of Fa-NPs/DNA were evaluated. The in vitro transfection efficiency of Fa-NPs/DNA was evaluated in HeLa cells and human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). PEG-PLA without Fa was used to load pEGFP from NPs/DNA as a control. Results: Fa-NPs/DNA has a particle size of 183 nm and a gene loading quantity of 92%. After 72h of transfection, Fa-NPs/DNA displayed over 20% higher transfection efficiency than NPs/DNA and 40% higher than naked DNA in HeLa cells. However, in HUVECs, no significant difference appeared between Fa-NPs/DNA and NPs/DNA. Conclusions: Fa-PEG-PLA NPs could function as excellent materials for gene loading. This nano-approach could be used as tumor cell targeted medicine for the treatment of cervical cancer.
Biodegradable poly(D,L-lactide-co-glycolide) (PLGA) nanoparticles were developed for sustained delivery of water-soluble macromolecules. PLGA nanoparticles were fabricated by spontaneous emulsification solvent diffusion method generating negatively charged particles and heterogeneous size distribution. As a model drug, blue dextran was encapsulated in PLGA nanoparticles. In addition, nanoparticles were also prepared with varying ratio of poloxamer 188 (P188) and poloxamer 407 (P407), and coating with poly(vinyl alcohol) (PVA). Then, the particle size, zeta potential and encapsulation efficiency of nanoparticles containing blue dextran were studied. In vitro release of blue dextran from nanoparticles was also investigated. The surface and morphology of nanoparticles were characterized by scanning electron microscopy (SEM). In case of nanoparticles prepared with PLGA, P407, and different organic solvents, particle size was in the range of $230{\sim}320\;nm$ and zeta potentials of nanoparticles were negative. The SEM images showed that ethyl acetate is suitable for the formulation of PLGA nanoparticles with good appearance. Moreover, ethyl acetate showed higher encapsulation efficiency than other solvents. The addition of P188 to formulation did not affect the particle size of PLGA nanoparticles but altered the release patterns of blue dextran from nanoparticles. However, PVA, as a coating material, altered the particle size with increasing the PVA concentration. The nanoparticles were physically stable in the change of particle size during long-term storage. From the results, the PLGA nanoparticles prepared with various contents of poloxamers and PVA, could modulate the particles size of nanoparticles, in vitro release pattern, and encapsulation of water-soluble macromolecules.
Background: Polymeric nanoparticles are attractive materials that have been widely used in medicine for drug delivery, with therapeutic applications. In our study, polymeric nanoparticles and the anticancer drug, chrysin, were encapsulated into poly (D, L-lactic-co-glycolic acid) poly (ethylene glycol) (PLGA-PEG) nanoparticles for local treatment. Materials and Methods: PLGA: PEG triblock copolymers were synthesized by ring-opening polymerization of D, L-lactide and glycolide as an initiator. The bulk properties of these copolymers were characterized using 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy and Fourier transform infrared spectroscopy. In addition, the resulting particles were characterized by scanning electron microscopy. Results: The chrysin encapsulation efficiency achieved for polymeric nanoparticles was 70% control of release kinetics. The cytotoxicity of different concentration of pure chrysin and chrysin loaded in PLGA-PEG ($5-640{\mu}M$) on T47-D breast cancer cell line was analyzed by MTT-assay. Conclusions: There is potential for use of these nanoparticles for biomedical applications. Future work should include in vivo investigation of the targeting capability and effectiveness of these nanoparticles in the treatment of breast cancer.
Objective: The study aim was to prepare poly-DL-lactide-poly (PELA) microspheres encapsulating recombinant tissue inhibitors of metalloproteinase-1 (TIMP-1) in an adenovirus to investigate its inhibition on the proliferation of hepatocellular carcinoma cells HepG2. Methods: Microspheres were prepared by encapsulating the recombinant TIMP-1 adenovirus into biodegradable PELA. The particle size, viral load, encapsulation efficiency and in-vitro release were measured. Microspheres were used to infect HepG2 cells, then infection efficiency was examined under a fluorescent microscope and ultrastructural changes assessed by TEM. Expression of TIMP-1 mRNA in HepG2 cells was examined by semi-quantitative RT-PCR and proliferation by MTT and cell growth curve assays. Results: We successfully prepared microspheres encapsulating recombinant TIMP-1 adenovirus with a diameter of $1.965{\mu}m$, an encapsulation efficiency of 60.0%, a viral load of $10.5{\times}10^8/mg$ and approximate 60% of virus release within 120 h, the total releasing time of which was longer than 240 h. The microspheres were confirmed to be non-toxic with blank microspheres. Infected HepG2 cells could stably maintain in-vitro expression of TIMP-1, with significantly effects on biological behaviour Conclusion: PELA microspheres encapsulating a recombinant TIMP-1 adenovirus can markedly inhibit the proliferation of HepG2 cells, which provides an experimental basis for polymer/chemistry-based gene therapy of hepatocellular carcinomas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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