Here, we have cloned and sequenced Streptococcus parauberis pgm gene, encoding the enzyme phosphoglucomutase (PGM), which is known to be in association with virulence in other streptococcal species. The PGM of S. parauberis is the most closely related to that of S. iniae based on their amino acid sequences.
Melhylovorus sp. strain SS1 grown on methanol was found to show activities of key enzymes of the linear route, $NAD^+$-linked formaldehyde and formate dehydrogenases, and the cyclic route, hexulose-6-phosphate synthase, glucose-6-phosphate isomerase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, and 6-phosphogluconate dehydrogenase, for formaldehyde oxidation. The activities of the cyclic route enzymes were higher than those of the linear route enzymes. The bacterium also exhibited activities of the key enzymes of the ribulose monophosphate and Entner-Doudoroff pathways and transaldolase involved in the formaldehyde assimilation and the enzymes involved in the biosynthesis of extracellular polysaccharide. Cells grown in the presence of 2.3 mM ammonium sulfate were higher in the productivity of extracellular polysaccharide, but lower in the growth yield, than those grown in the presence 7.6 mM ammonium sulfate. The activities of 6-phosphogluconate dehydrogenase, phosphoglucomutase, and UDP-pyrophosphorylase in cells grown under nitrogen-limited condition were higher, but that of 6-phosphogluconate dehydratase/2-keto-3-deoxy-6-phosphogluconate aldolase was lower, than those in cells grown in the presence of sufficient amount of nitrogen source.
Four polymorphic allozymes were used for genetic analysis of overwintering populations of field diamondback moth, Plutella xylostella (Linne). Different allele frequencies were found among three local populations of Andong, Youngchon, and Yangsan in all loci. Two allozyme loci (acid phosphatase and phosphoglucomutase) showed significant deviation from Hardy-Weinberg equilibrium in allele frequencies among these populations. Estimated Nei's genetic distance varied from 0.0151 between Yangsan and Youngchon to 0.0877 between Andong and Youngchon. Compared with the previous genetic distances in this moth, a little higher genetic differentiation among these overwintering populations suggests that there would be a specific genetic bottleneck in each local population during overwintering period.
Oh, Ryunkyoung;Moon, Soo Young;Cho, Hwa Jin;Jang, Won Je;Kim, Jang-Ho;Lee, Jong Min;Kong, In-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.44
no.3
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pp.355-362
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2016
The phosphomannomutase/phosphoglucomutase gene (pmm/pgm) of Vibrio anguillarum (the causative agent of fish vibriosis) was cloned, and the open reading frame corresponded to a protein with 446 amino acids. The pmm/pgm gene showed a significant degree of sequence homology with the previously reported genes from V. mimicus, V. vulnificus, V. splendidus, and V. harveyi, with 92.3%, 91.4%, 89.9%, and 89.9% amino acid identity, respectively. By reverse transcriptase-polymerase chain reaction, we found that the pmm/pgm gene was upregulated under cold stress condition. The PMM/PGM protein is known to catalyze the interconversion between mannose-1-phosphate and mannose-6-phosphate or glucose-1-phosphate and glucose-6-phosphate, which are important intermediates for lipopolysaccharide (LPS) biosynthesis. To confirm the role of PMM/PGM in the LPS biosynthetic pathway, we constructed a knock out mutant by homologous recombination. The respective LPSs were isolated from the V. anguillarum wild-type and mutant strains, and changes were compared by subjecting them to sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Based on the different patterns of the LPSs, we expect the pmm/pgm gene to have an important role in LPS biosynthesis. The pmm/pgm-deficient mutant of V. anguillarum will contribute to further studies about the role of LPS in V. anguillarum pathogenesis.
Thirty six strains of Pleurotus spp., from world-wide nations, were examined for interspecific isozyme variation. A comparison of isozymes in mycelial extracts of the fungal genus Pleurotus was made by polyacrylamide gel isoelectric focusing. A total of one hundred and sixty six bands was resolved from six isozymes. A cluster analysis was done based on the zymograms for esterase, glucosephosphate isomerase, leucine aminopeptidase, malate dehydrogenase, peroxidase, and phosphoglucomutase. From the isozyme analysis, esterase showed higher degree of variability, while it was observed less variability for the enzymes such as glucosephosphate isomerase, malate dehydrogenase, and phosphoglucomutase. The species P. ostreatus, whose taxon is controversial, was discriminated from P. pulmonarius, while P. florida was classified as a distinct taxon. The clustering of P. sapidus and P. spodoleucus strains appeared to be more difficult. It was found that some strains were included to another cluster based on electrophoretic banding patterns. These results show that this lack of congruence among data sets may help explain the taxonomic difficulty within the genus Pleurotus. A dendrogram of genetic similarities was presented, and applications of isozyme data to the systematics of these commercially important fungi was discussed.
Phosphosugars are found in all living organisms and are commercially valuable compounds with possible applications in the development of a wide range of specialty chemicals and medicines. In carbohydrate metabolism, fructose 6-phosphate (F6P) is an essential intermediate formed by phosphorylation of 6' position of fructose in glycolysis, gluconeogenesis, pentose phosphate pathway and Calvin cycle. In glycolysis, F6P lies within the glycolysis metabolic pathway and is produced by isomerisation of glucose 6-phosphate. For large-scale production, F6P could be produced from starch using many enzymes such as pullulanase, starch phosphorylase, isomerase and mutase. In enzymatic reactions carried out at high temperatures, the solubility of starch is increased and microbial contamination is minimized. Thus, thermophile-derived enzymes are preferred over mesophile-derived enzymes for industrial applications using starch. Recently, we reported the production of glucose 1-phosphate (G1P) from starch by Thermus caldophilus GK24 enzymes. Here we report the production of F6P from starch through three steps; from starch to glucose 1-phosphate (glucan phosphorylase, GP), then glucose 6-phosphate (phosphoglucomutase, GM) and then F6P (phosphoglucoisomerase, GI). Using 200 L of 1.2% soluble starch solution in potassium phosphate buffer, 1,253 g of G1P were produced. Then, 30% yields of F6P were attained at the optimum reaction conditions of GM : G1 (1 : 2.3), 63.5$^{\circ}C$, and pH 6.85. The optimum conditions were found by response surface methodology and the theoretical values were confirmed by the experiments. The optimum starch concentrations were 20 g/L under the given conditions.
By spectrophotometric assay method, the following enzymes could be detected in Dunaliella tertiolecta and Chlorella pyrenoidosa cell-free extracts: Hexokinase; Glucose-6-phosphate, 6-Phosphogluconate and Triosephosphate dehydrogenase; Transketolase; Phosphogluco and Ribosephosphate isomerase; Phosphoglucomutase; Phosphofructokinase; Fructosediphosphate aldorase and Ribulosephosphate 3-epimerase. Such enzymes are in accordance with the proposed pathway of glucose catabolism by D. tertiolecta as well as C. pyrenoidosa. Also, it could be estimated, under the presence of NADP, that pentose phosphate pathway were more active than glycolytic pathway in D. tertiolecta cell-free systems.
These studies have been carried out to examine the stability of enzyme activity of PGM$_1$subtypes in seminal stains and vaginal stains according to the period of storage time by means of polyacryiamide gel(PAG) isoelectric focusing. The results from the experiments were as follows. (1) The stabflity of enzyme activity of PGM$_1$subtypes was detennined from seminal stains and vaginal stains according to the period of storage time. The PGM$_1$ subtypes of seminal stains stored at room temperature could be detennined 86% after 7 days and 15% after 14 days, but almost impossible after 21 days. (2) In the case of vaginal stains stored at room temperature, PGM$_1$ subtypes could be determined 67% after 7 days, but almost impossible after 14 days. On the other hand, when the vaginal fluid was mixed with seminal fluid, PGM$_1$ subtypes of the seminal fluid could be postulated by the determination of PGM$_1$ subtypes from the vaginal fluid.These results lead to the possibility of application in forensic biology.
Matrix Assisted Laser Desorption ionization Time of Flight (MALDI-TOF) was used for enzymes identification related to B -1,3-glucan synthesis. Agrobacterium sp. ATCC31750 was cultivated with two stage Continuous Stirrer Tank Reactor (CSTR) and the cells were harvested and their protein profiles were analysed by two dimensional electrophoresis. The specific enzyme spot was treated with trypsin and ana lysed by MALDI-TOF to get peptide molecular weight. The peptide molecular weights were matched with Agrobacterium tumefacience's Data Base from the matrix science site, then could identify the avaliable key enzymes. In this study, we identified key metabolite of synthesis of beta-1,3-glucan, such as glucose-6-phosphate isomerase, phosphoglucomutase, B-1,3-glucan synthase and glucokinase, and we also identified uracil phosphoribocyl transferase and Ribosome recycling factor also.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.18
no.2
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pp.131-134
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2009
The purpose of this study was to establish whether there are differences in the productivity of the same silkworm(Bombyx mori L.) parthenoclones, obtained by two different methods-thermal and combined, as well as to study their genotype structure by several enzyme loci. It was established that all individuals of parthenoclones Joana, Joana(${\downarrow}{\uparrow}$), Pohi and Pohi(${\downarrow}{\uparrow}$), are homozygous by the studied esterase and phosphoglucomutase loci, which substantiated the clones' genetic stability. By comparative analysis of some biological and technological properties, it was found that parthenoclone Pohi(${\downarrow}{\uparrow}$) obtained by low-high temperature activation is characterized by higher values of these properties as compared to parthenoclone Pohi obtained by thermal parthenogenesis. Comparing the two methods of inducing ameiotic parthenogenetic development, we would recommend that parthenoclone Joana is sustained by thermal parthenogenesis, and parthenoclone Pohi-by the combined method (low-high temperature).
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