Wang Zhifeng;Lauwerijssen Maarten J. C.;Yuan Jingqi
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.10
no.2
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pp.142-148
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2005
This paper proposes a cell age model for Penicillium chrysogenum fed-batch cultivation to supply a qualitative insight into morphology-associated dynamics. The average ages of the segregated cell populations, such as growing cells, non-growing cells and intact productive cells, were estimated by this model. A combined model was obtained by incorporating the aver-age ages of the cell sub-populations into a known but modified segregated kinetic model from literature. For simulations, no additional effort was needed for parameter identification since the cell age model has no internal parameters. Validation of the combined model was per-formed by 20 charges of industrial-scale penicillin cultivation. Meanwhile, only two charge-dependent parameters were required in the combined model among approximately 20 parameters in total. The model is thus easily transformed into an adaptive model for a further application in on-line state variables prediction and optimal scheduling.
Clavulanic acid (CA) produced by Streptomyces clavuligerus is degraded during the bacterial cultivation. The degradation was examined in three different aspects, including physical, chemical, and enzymatic effects, in order to understand the degradation during the cultivation. The result showed that CA was unstable in the production medium containing ammonium salts and amino acids, owing to ammonium ions and amine groups. In addition, the degradation was not only due to instability of CA by metabolites and proteins, but also enzymes from S. clavuligerus such as $\beta-lactamase$ and penicillin-binding proteins. However, the degradation caused by these enzymes was not highly significant compared with the degradation during the cultivation, owing to irreversible reactions between CA and enzymes.
Huh, Yoon Sun;Lee, Joung Kwan;Kim, Ik Jei;Kang, Bo Goo;Lee, Ki Yeol
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.2
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pp.111-116
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2015
Interest and great demand for blueberry (Vaccinium corymbosum) have increased, as V. corymbosum is now one of the most economically important crops in Korea. It is expected that blueberry production and the area planted for cultivation will increase consistently in the years ahead because of high profitability and the consumer's demand for healthy ingredients. Effective mass production of blueberry is urgently needed for commercial cultivation establishment, but a main limitation is lack of a propagation system that produces a disease-free plant material for commercial plantation. A large amount of research has focused entirely on developing tissue culture techniques for blueberry propagation. However, controlling fungal and bacterial contamination of woody plant material is extremely difficult. Our study was conducted to investigate the effect of biocide addition during the in vitro culture of blueberry on plantlet growth and contamination occurrence. Four biocides, including Plant Preservative Mixture ($PPM^{TM}$), vancomycin, nystatin and penicillin G, were used in varying concentrations during the in vitro propagation of blueberry. When nystatin was added into the medium at low concentrations, the overall growth of blueberry plantlets was retarded. Addition of vancomycin and penicillin G in high concentrations decreased contamination but induced plantlet mortality. On the other hand, when 1ml/L $PPM^{TM}$ was added, the growth characteristics of blueberry plantlets did not significantly differ from non-treatment (control), and the contamination occurrence rate was very low. From these results, we found that the addition of the appropriate biocide could provide an effective method to reduce contamination in the culture process, thereby raising in vitro production efficiency.
Kim, Se-Ri;Cha, Min-Hee;Chung, Duck-Hwa;Shim, Won-Bo
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.30
no.1
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pp.51-58
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2015
Thirty one of Staphylococcus aureus isolated from perilla leaf cultivation areas in Miryang were investigated on the characteristics, such as enterotoxin genes and antibiotic susceptibility. Five toxin genes (sea, seb, sec, sed, and see) were examined by PCR method. Disc diffusion method was used to examine the antibiotic susceptibility of S. aureus by using 18 types of antibiotic discs with different concentrations. Among enterotoxin-encoding genes, sea and sed genes were co-detected from 4 isolates (12.9%), sed gene was founded in 9 isolates (29.0%), and see gene was founded in 1 isolate (3.2%). However seb and sec and tsst were not detected in any isolates. As a result of antibiotic susceptibility test, 7 isolates (22.6%) were resistant to 12 antibiotics (penicillin, ampicillin, oxacillin, amoxicillin-clavulanic acid, cefazolin, cephalothin, imipenem, gentamicin, tetracycline, ofloxacin, norfloxacin, and erythromycin). 2 isolates (6.5%) were resistant to 5 antibiotics (penicillin, ampicillin, amoxicillin-clavulanic acid, gentamycin, and telithromycin). MRSA (Methicilline Resistant Staphylococcus aureus) was founded in packing vinyl, hands, and perilla leaves.
Kim, Bong-Hee;Seong, Baik-Lin;Mheen, Tae-Iek;Moon H. Ban
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.9
no.1
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pp.29-34
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1981
To maximize the production of penicillin amidase from Estherichia coli (ATCC 9637), the media composition and several factors affecting the engyme production during fermentation were studied. The optimal media composition was found to be; 3.5% tryptone, 1.5% monosodium glutamate and 0.5% yeast extract. The addition of 0.15% phenylacetic acid as an enzyme inducer at the initial stage of cultivation increased the engyme productivity about 5 fold. It was found that the engyme activity reached maximum within 16hr of cultivation. The maximum production of the enzyme obtained was about 102.5 units/l broth under the optimized condition. The enzyme production was markedly increased by the optimization as compared with those previously reported.
Kim, Jin-Hee;Kang, Hye-Jin;Kim, Eung-Soo;Kim, Jeong-Ho;Koo, Yoon-Mo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.2
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pp.231-236
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2004
The inexpensive large-scale production of pure PGA (Penicillin G Acylase) has been a commercial goal. PGA has been used as a model enzyme in the development of simple one-step purification methods. In this study, the purification of poly-His tagged PGA protein secreted into the periplasmic space was carried out by using immobilized metal-ion affinity chromatography (IMAC). The PGA gene was obtained from E. coli ATCC 11105. Codons encoding histidines were fused at the C-terminus of the PGA gene by PCR. E. coli JM109 harboring pPGA-HIS6 vector produced active his-tagged acylases in the presence of lac promoter during cultivation at $26^{\circ}C$. The maximum specific activity of the acylase purified by using one-step chromatography after osmotic shock was 38.5 U/mg and was recovered with the yield of 70%. Both 23 kDa ($\alpha$) and 62 kDa ($\beta$) subunits were recovered by using IMAC with just C-terminus tagging of the $\beta$ subunit. The purification of the periplasmic fraction by osmotic shock and that of purified acylase was increased by 2.6-fold and 19-fold, respectively, compared to the crude extract.
For the production of trehalose, microorganisms capable of producing trehalose extracellularly were screened from the stock cultures in our laboratory. among them, Micrococcus luteus IFO 12708 showed the highest productivity of trehalose. For the increase of productivity, the mutant strai Hs-208 having higher trehalose production was selected with NTG(N-methyl-N'-nitrosoguanidine) mutagenesis, which led to the decrease of the specific activity of trehalose phosphorylase(3.2-fold) as compared to the wild strain. The optimum condition for the trehalose production was established as follows: 20g/l of glucose and 6g/l of tryptone were used as a sole carbon source and nitrogen source, respectively, and cultivations were carried out at 3$0^{\circ}C$ and pH 6.0. After 20hrs cultivation, addition of 20unit/ml penicillin G led to the higher conversion yield of trehalose. Under the optimum condition, 6.547g/l trehalose was produced with conversion yield of 32.7%.
The possibilities of utilizing acid-hydrolyzate of "Sliced and dried sweet potatoes" as a carbon source for the microbial production of L-Glutamic Acid(L-GA) with Micrococcus glutamicus were investigated and the results showed as follows: 1) The highest hydrolysis rate, 74.6% of the reducing sugar based on the weight of dry matter, was obtained when the sweet potatoes were hydrolyzed with 0.8% of HCI at 2.0kg/$cm^2$ for 30 minutes. The most favorable hydrolyzate for the growth of the cells, however, was found to be the one obtained by treating the sweet potatoes with 0.5% HCI at 2. 0kg/$cm^2$ for 10 minutes. Reducing sugar content of the hydrolyzate was 10% as glucose. 2) Biotin content of the hydrolyzate was 25$\mug$/1 and it was proved to be excess in amount for the L-GA production. 3) The effects of addition of antibiotics, alcohols and fatty acid esters on the L-GA production were tested in the biotin excess medium. The production of L-GA was most increased to 32.5g/l with the addition of 10 I. U. of penicillin per ml. to the culture medium at 4 hours after inoculation. But the addition of alcohols, especially fatty acid esters, showed no significant effects. 4) Among the organic nutrients tested. " Gluten acid hydrolyzate" greatly enhanced the production of L-GA adding it's concentration of 1.0% to the medium. 5) The maximum production of L-GA resulted in 35g/1 when the cells were grown for 48 hours in the hydrolyzate medium supplemented with 1.0% of "Gluten acid hydrolyfate" and with 10 I. U. of penicillin per ml added at 4 hours after cultivation.
Two-hundred Bacillus cereus isolated from perilla leaf cultivation areas in Miryang, Korea were investigated for toxin genes and antibiotic susceptibility. Toxigenic patterns of isolates were identified to be 11 groups through toxin gene profiles. 21% of strains isolated from the perilla leaves had both enterotoxin and emetic toxin. Toxin genes entFM (100%), nheA (100%) and hblA, C, D (65.5%) were frequently found in the perilla leaves, whereas EM (21.0%) was less common. Most isolates were susceptible to 10 antibiotics, but they were highly resistant to penicillin (100%), ampicillin (100%), oxacillin (94.9%), amoxicillin-clavulanic acid (95.6%), cefazolin (78.2%), and rifampicin (58.0%). These results indicate that food-borne outbreak caused by B. cereus might lead to diarrhea and emetic syndromes.
Under the light intensity of 25-72$\mu$E/ m$^{2}$/s Botryococcus braunii UTEX 572 grew faster than Botryococcus sp. GE 24 isolated from a freshwater lake. The specific growth rate ($\mu$) of B. braunii UTEX 572 was highest at 0.260 (1/day) on a dry weight basis in Chu 13 medium from 1 to 9 days of incubation and then continuously decreased. Carbohydrate concentration and cellular nitrogen and phosphorus contents of B. braunii UTEX 572 gradually decreased with light intensity over a range of 25-72$\mu$E/m$^{2}$2/s, whereas the concentrations of protein and cellular N:P ratio increased with light intensity. Chlorophyll-a concentration showed a decreasing tendency with light intensity. The dry weight of B. braunii UTEX 572 increased in the highest rate of 83 mg/l/day at pH 8.0. When the N: P ratio of Chu 13 medium was adjusted to 50: 1 by addition of nitrogen source, dry weight increasing rate was 115 mg/l/day between 20 and 28 days of incubation which was the highest value during the cultivation. Cell growth in an open culture of B. braunii UTEX 572 was highest with Chu 13 medium, whereas that with Chu 13 medium adjusted to pH 7.0, containing 250 mg/l penicillin, or containing 1% glucose was reduced on a large scale. However, this result shows the possibility of the mass cultivation of B. braunii UTEX 572 in an open system competing with other microorganisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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