Cytoplasmic $\alpha$-glycerol-3-phosphate dehydrogenase from fruit-bat-breast muscle was purified by ion-exchange and affinity chromatography. The specific activity of the purified enzyme was approximately 120 units/mg of protein. The apparent molecular weight of the native enzyme, as determined by gel filtration on Sephadex G-100 was $59,500{\pm}650$ daltons; its subunit size was estimated to be $35,700{\pm}140$ by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The true Michaelis-Menten constants for all substrates at pH 7.5 were $3.9{\pm}0.7\;mM$, $0.65{\pm}0.05\;mM$, $0.26{\pm}0.06\;mM$, and $0.005{\pm}0.0004\;mM$ for L-glycerol-3-phosphate, $NAD^+$, DHAP, and NADH, respectively. The true Michaelis-Menten constants at pH 10.0 were $2.30{\pm}0.21\;mM$ and $0.20{\pm}0.01\;mM$ for L-glycerol-3-phosphate and $NAD^+$, respectively. The turnover number, $k_{cat}$, of the forward reaction was $1.9{\pm}0.2{\times}10^4\;s^{-1}$. The treatment of the enzyme with 5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid (DTNB) under denaturing conditions indicated that there were a total of eight cysteine residues, while only two of these residues were reactive towards DTNB in the native enzyme. The overall results of the in vitro experiments suggest that $\alpha$-glycerol-3-phosphate dehydrogenase of the fruit bat preferentially catalyses the reduction of dihydroxyacetone phosphate to glycerol-3-phosphate.
The effects of antimetabolite 6-aminonicotinamide on levels of soluble proteins, free amino acids and protease activity in various tissues of quail have been in vestigated. The levels of soluble proteins m liver, heart and pectoral muscle were markedly lowered and the specific activity of protease in kidney and pectoral muscle was markedly increased. The concentrations of aspartic acid / asparagine, alanine, valine, methionine, isoleucine, leucine and lysine in the liver were markedly increased. En the kidney the concentrations of aspartic acid I asparagine, arginine, threonine, alanine, proline and lysine were markedly increased but those of glutamic acid I glutamine were decreased. The concentrations of glutamic acid / glutamine and serine in the heart were reduced but those in glycine and methionine were increased. In the pectoral muscle the concentration of arginine was decreased but the concentration of alanine and threonine was increased. The overall results suggest that antimetabolite 6-aminonicotinamide may act to enhance concentrations of amino acids related to the generation of energy and to depress the biosynthesis of some specific amino acids.
Myogenic satellite cells (MSCs) are mononuclear, multipotent progenitors of adult skeletal muscle possessing a capacity of forming adipocyte-like cells (ALC). To identify the skeletal muscle type-specific myogenic and adipogenic genes during MSCs differentiation, total RNA was extracted from bovine MSCs, myotube-formed cell (MFC), and ALC from each of Beef shank, Longissimus dorsi, Deep pectoral, and Semitendinosus. DNA microarray analysis (24,000 oligo chip) comparing MSCs with MFC and ALC, respectively, revealed 135 differentially expressed genes (> 4 fold) among four cuts. Real-time PCR confirmed expression of 29 genes. Furthermore, the whole tissue sample RNAs analysis showed 6 differentially expressed genes in Beef shank. Among which, 1 gene in MSCs, 4 in MFC, and 1 in ALCs were highly expressed. This study will provide an insight for better understanding the molecular mechanism of differentiation of skeletal muscle type-specific MSCs. The identified genes may be used as marker to distinguish skeletal muscle types.
Paschal Chukwudi Aguihe;Amanda Barroso Castelani;Camilo Ivan Ospina-Rojas;Eustace Ayemere Iyayi;Paulo Cesar Pozza;Alice Eiko Murakami
Animal Bioscience
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v.37
no.6
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pp.1053-1064
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2024
Objective: This study aims to investigate the interactive effect of a glycine equivalent (Glyequi) and standardized ileal digestible threonine (SID Thr) levels in low crude protein diets on performance, blood biochemistry, pectoral muscular creatine content and oxidative stability of meat in broiler chickens from 21 to 42 days. Methods: A total of 1,500, twenty-one-day-old Cobb-Vantress male broiler chickens were distributed in a completely randomized 5×3 factorial arrangement of Glyequi×SID Thr with five replicates of 20 birds each. Fifteen dietary treatments of 16.5% CP were formulated to contain five levels of total Glyequi (1.16%, 1.26%, 1.36%, 1.46%, and 1.56%) and three levels of SID Thr (0.58%; 0.68% and 0.78%). Results: Interaction effects (p<0.05) of Glyequi and SID Thr levels were observed for weight gain, carcass yield, pectoral muscular creatine content and serum uric acid. Higher levels of Glyequi increased (p = 0.040) weight gain in 0.58% and 0.68% SID Thr diets compare to the 0.78% SID Thr diet. The SID Thr level at 0.68% improved (p = 0.040) feed conversion compared to other SID Thr diets. Levels of Glyequi equal to or above 1.26% in diets with 0.78% SID Thr resulted in birds with higher (p = 0.033) pectoral muscular creatine content. The breast meat yield observed in the 0.68% SID Thr diet was higher (p = 0.05) compared to the 0.58% SID Thr diet. There was a quadratic effect of Glyequi levels for pectoral pectoral muscular creatine content (p = 0.008), breast meat yield (p = 0.030), and serum total protein concentrations (p = 0.040), and the optimal levels were estimated to be 1.47%, 1.35%, and 1.40% Glyequi, respectively. The lowest (p = 0.050) concentration of malondialdehyde in the breast meat was found in 0.68% SID Thr diets at 1.36% Glyequi. Conclusion: The minimum dietary level of Glyequi needed to improve performance in low crude protein diets is 1.26% with adequate SID Thr levels for broiler chickens.
To investigate the properties of ryanodine binding sites of the bird skeletal SR vesicles, SDS PAGE, purification of RyR, and $[^3H]ryanodine$ binding study were carried out in the SR vesicles prepared from the chicken pectoral muscle. The chicken SR vesicles have two high molecular weight (HMW) protein bands as in eel SR vesicles on SDS PAGE. The HMW bands on SDS PAGE were found in the $[^3H]ryanodine$ peak fraction $(Fr_{3-5})$ obtained from the purification step of the ryanodine receptor protein. Bmax and KD of the chicken $[^3H]ryanodine$ binding sites were 12.52 pmol/mg protein and 14.53 nM, respectively. Specific $[^3H]ryanodine$ binding was almost maximal at $50{\sim}100$${\mu}M$$Ca^{2+}$, but was not increased by 5 mM AMP and not inhibited by high $Ca^{2+}$. Binding was significantly inhibited by $20{\sim}100$${\mu}M$ ruthenium red and 1 mM tetracaine, but slightly inhibited by $Mg^{2+}$. From the above results, it is suggested that chicken SR vesicles have the ryanodine binding sites to which the binding of ryanodine is almost maximal at $50{\sim}10$${\mu}M$$Ca^{2+}$, is significantly inhibited by ruthenium red and tetracaine, slightly inhibited by $Mg^{2+}$, but not affected by AMP and not inhibited by high $Ca^{2+}$.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.14
no.1
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pp.77-81
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1985
It was investigated about extractability and biological property(ATPase activity) of actomyosin from skeletal muscle of chi(:ken differed feeding period. The extractabilities of actomyosin from pectoral muscle were increased from 184.5 to 1020.1 mg per 100g muscle as feeding period prolonged from 3 weeks to 8 weeks. In case of leg-muscles, extractability was revealed the similar tendency as pectoral muscles. EDTA ATPase activity of actomyosin in various chicken muscles for 3 weeks feeding was 0.6 Brmole Piimg Protein/min., 0.59 for 6 Iveeks feeding and 0.50 for 8 weeks. The Ma^{+2}$-ATPase of actomyosin in various chicken muscles was showed inverted relationship with ionic strength. EGTA ($125\;{\mu}mole$)inhibited Ma^{+2}$-ATPase activity to below $0.1\;{\mu}mole$ Pi/mg protein/min. regardless the feeding period.
The aim of this study was to analyze the proteome of proliferating bovine satellite cells from longissimus dorsi, deep pectoral and semitendinosus muscle depots which had been subjected to hormonal deprivation or addition in culture. For hormone deprivation or addition studies, the cells were either grown in 10% charcoal-dextran stripped fetal bovine serum (CD-FBS) or in 10% FBS supplemented medium. Further to analyze the effect of insulin like growth factor (IGF-1) and testosterone (TS), the cells were grown in 10% CD-FBS containing IGF-1 (10 ng/ml) or TS (10 nM). Results have shown that hormone deprivation had a negative impact on proliferation of the cells from each of the muscle depots. In case of IGF-1 and TS addition, the proliferation levels were low compared with that of the cells grown in 10% FBS. Hence, to gain the insights of the proteins that are involved in such divergent levels of proliferation, the proteome of such satellite cells proliferating under the above mentioned conditions were analyzed using 2D-DIGE and MALDI-ToF/ToF. Thirteen proteins during hormone deprivation and nine proteins from hormone addition were found to be differentially expressed in all the cultures of the cells from the three depots. Moreover, the results highlighted in this study offer a role for each differentially expressed protein with respect to its effect on positive or negative regulation of cell proliferation.
Purpose: Weight lifting is a good training to control body weight, to correct body shape and to relieve stress. How-ever if the training is continued by inadequate training method and technique, the risks of the shoulder injuries are relatively high. Main Subject: The rotator cuff injury is the most common disorder to wright lifters and often results from the train- ing program of upright row, military press and pectoral deck. The chances of subacromial impingement in these postures are high because the shoulder rotates under the acromion at 90 abduction state. Shoulder instability in weight lifters can develop due to various causes. aepeated microtrauma and excessive abduction and external rotation may result in laxity of the anterior capsular structure, ligament and muscles. Behind the neck and bench press are high risk training postures. Other than those injuries, idiopathic osteolysis of distal clavicle, acromioclavicular separation, pectoralis major muscle rupture, and triceps muscle rupture nay develop. Conclusion: The best treatment option of the shoulder injury to weight lifters is to eliminate the possible risk elements for the weight lifters in training program and to provide proper and prompt treatment as soon as possible.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2006.11a
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pp.60-61
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2006
Effect of dietary salmonella lysate in broiler chicks inoculated with Salmonella typhimurium on the antioxidant system(freshness) of broiler meats during 4$^{\circ}$C refrigeration was investigated. In Pectoral and leg muscle, regardless experimental diets, as the refrigeration day passed, CuZnSOD activity decreased gradually, while at 7d MnSOD activity and peroxide level raised and then lowered at 14d. MnSOD and peroxidase activity, however, had differed according to experimental diets. The results indicated that antioxidant system of broiler meats will be changed according to experimental diets(nutrients). As the CuZnSOD, MnSOD and peroxidase activity are responsible for proteolysis of muscle protein, it was concluded that change of antioxidant system during 4$^{\circ}$C storage explain the biological activity(freshness) of broiler meats.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.1
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pp.70-75
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2009
For the effective use of salmon processing by-products, the food components of muscle around pectoral fin (MAPF) were investigated and compared with those of salmon fillet muscle (SFM). The proximate composition of MAPF was 64.4% for the moisture, 17.2% for the crude protein, 16.2% for the crude lipid and 1.4% for the ash. The pH, volatile basic nitrogen (VBN) content and yield of MAPF were 6.73, 7.8 mg/100 g and 7.4 (g/100 g SFM), respectively. The trichloroacetic acid (TCA) soluble-N content of MAPF was 479 mg/100 g, which was lower than that (612 mg/100 g) of SFM. The Hunter value of MAPF was 54.86 for L value, 22.08 for a value, 22.41 for b value and 52.35 for ${\Delta}$E value, which were similar to those of SFM. The total content in amino acids of MAPF was 17.1 g/100 g, its major amino acids were aspartic acid, glutamic acid, leucine and lysine. The major fatty acids of MAPF were 16:0, 18:1n-9 and 18:2n-6, 20:5n-3 and 22:6n-3. No differences were found in the major fatty acids and the major amino acids between MAPF and SFM. The calcium and phosphorus contents of MAPF were 19.1 mg/100 g and 211.7 g/100 g, respectively. These results suggested that MAPF could be used as seafood resources.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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