• 약학회지
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• 제37권4호
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• pp.362-364
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• 1993

The sensitive detection of free fatty acids was investigated by using H$_{2}$O$_{2}$-bis(2,4,6-trichlorophenyl) oxalate chemiluminescence system after monodansyl cadaverine labeling. Because dansvl moiety is well excited by this chemiluminescence system, monodansyl cadaverine was a prominent reagent to this system for the determination of free fatty acids. The cluent of 50mM tris-HCI buffer (pH 7.7)-acetonitrile (1:4, v/v) was run through TSK gel ODS 80 TM column. The reagent solutions were mixed with the eluent containing the monodansyl cadaverine derivative of fatty acids from the column. By this system, linolic acid was detected 50 fmol by injected amount.

• 한국염색가공학회지
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• 제25권3호
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• pp.172-180
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• 2013

Aramid fibers are being used increasingly in a wide range of application due to low density, high specific strength, high modulus, and high thermal resistance. But owing to its special physical and chemical structures, it is sensitive to absorb the ultraviolet light which will degrade the fiber's useful mechanical properties and structure. In this paper, the sol-gel technique was used to improve the photo-stability of p-aramid fibers. $TiO_2$, modified $SiO_2$/$TiO_2$ sol were used as coating solutions. The influence of the such coatings on the photo-stability of p-aramid fiber was investigated by an accelerated photo-ageing method using xenon lamp. The photo-stability of p-aramid fiber showed obvious improvement after the modified silica binding coating. But the amorphous $TiO_2$ sol coatings showed a negative effect. After 144h light exposure, the modified silane binder-coated fibers showed less degradation in mechanical properties with the retained tensile strength greater than about 70% of the original value.

• 센서학회지
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• 제25권1호
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• pp.51-56
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• 2016

This study evaluates the performance of an optical sensor and measurement system (CMA-24) which can analyze the fluctuation of dissolved oxygen and pH simultaneously. In the optical sensor system, the fluorescent materials, Rudpp and HPTS which are sensitive to dissolved oxygen and pH, respectively, are coated on the bottom of a 24-well -plate by the sol-gel technology. The detection times of the emission light of the oxygen sensor were $4,186{\pm}13.90{\mu}s$ and $4,452{\pm}36.68{\mu}s$ for the dissolved oxygen of 17% $O_2$ and 7.6% $O_2$, respectively. On the other hand, the detection times of the pH sensor were $6,699.43{\pm}14.64{\mu}s$, $6,722.24{\pm}6.21{\mu}s$, and $6,748.52{\pm}2.63{\mu}s$ using pH 6, 7, and 8, respectively. When we determined cellular respiration levels of C2C12 myocytes with CMA-24, $O_2$/pH measurement system, the ratio of the uncoupled to coupled OCR (oxygen consumption rate) was 1.41. The results mean that this CMA-24 system shows almost the same sensitiveness as the commercial system.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제21권5호
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• pp.483-493
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• 2011

An acid phosphatase (HppA) activated by $NH_4Cl$ was purified 192- and 34-fold from the periplasmic and membrane fractions of Helicobacter pylori, respectively. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis revealed that HppA from the latter appears to be several kilodaltons larger in molecular mass than from the former by about 24 kDa. Under acidic conditions (pH${\leq}$4.5), the enzyme activity was entirely dependent on the presence of certain mono- and/or divalent metal cations (e.g., $K^+$,$ NH_4{^+}$, and/or $Ni^{2+}$). In particular, $Ni^{2+}$ appeared to lower the enzyme's $K_m$ for the substrates, without changing $V_{max}$. The purified enzyme showed differential specificity against nucleotide substrates with pH; for example, the enzyme hydrolyzed adenosine nucleotides more rapidly at pH 5.5 than at pH 6.0, and vice versa for CTP or TTP. Analyses of the enzyme's N-terminal sequence and of an $HppA^-$ H. pylori mutant revealed that the purified enzyme is identical to rHppA, a cloned H. pylori class C acid phosphatase, and shown to be the sole bacterial 5'-nucleotidase uniquely activated by $NH_4Cl$. In contrast to wild type, $HppA^-$ H. pylori cells grew more slowly. Strikingly, they imported $Mg^{2+}$ at a markedly lowered rate, but assimilated urea rapidly, with a subsequent increase in extracellular pH. Moreover, mutant cells were much more sensitive to extracellular potassium ions, as well as to metronidazole, omeprazole, or thiophenol, with considerably lowered MIC values, than wild-type cells. From these data, we suggest that the role of the acid phosphatase HppA in H. pylori may extend beyond 5'-nucleotidase function to include cation-flux as well as pH regulation on the cell envelope.

• 생명과학회지
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• 제15권1호
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• pp.94-99
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• 2005

충청남도 목천과 충청북도 오창 근교의 토양으로부터 망간을 산화하는 64 집락을 분리하고 이 중 망간 산화능이 가장 우수한 한 균주를 최종 선별하여 생리, 생화학적 특성을 조사하고, 16S rRNA 염기 서열분석 등을 통하여 동정한 결과 최종 선별된 균주는 Aeromonas sp. MN44로 확인되었다. 최종 선별된 Aeromenas sp. MN44는 lactose를 제외한 여러 당들은 이용하지 못하였으며, 중금속내성은 lithium과 manganese에 대해서는 mg/ml 단위의 높은 농도까지 중금속 내성을 가지고 있었지만 cadmium에는 전혀 내성을 나타내지 않았다. 또 kanamycin, chloramphenicol, ampicillin, tetracycline, spectinomycin등 조사한 모든 항생제에 대해 전혀 내성을 갖지 않았다. Aeromonas sp. MN44가 생성하는 망간산화물질의 최적 pH는 pH 7.4로 확인되었으며, 이 균이 생성하는 망간 산화 factor는 proteinase K와 가열처리에 의해 저해되는 단백질이고, ammonium sulfate 침전과 ion exchange chromatography 그리고 gel filtration의 단계를 통해 부분 정제한 망간 산화 factor의 분자량은 약 113 kDa로 확인되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권4호
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• pp.297-302
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• 1998

Bacillus stearothermophilus No.236 xylB 유전자가 삽입된 재조합 플라스미드 pKMG12를 가지고 있는 E. coli HB101 균주를 이용하여 B. stearothermophilus $\beta$-xylosidase B을 생산, 정제하고 효소의 일반특성을 조사하였다. Ammonuim sulfate 분획, DEAE-Sepharose CL-6B 이온 교환 크로마토그래피, Sephacryl S-200 및 Superdex 200HR 젤 크로마토그래피의 과정을 거쳐 정제하였으며 정제된 효소는 SDS-PAGE 및 zymogram 실험을 통해 $\beta$-xylosidase B의 단백질임을 확인하였다. 정제 $\beta$-xylosidase B는 반응액의 수소이온 농도와 온도에 매우 민감하며 최적 활성 pH 및 온도는 각각 pH 6.5와 $50^{\circ}C$로 결정되었다. $\beta$-Xylosidase 활성은 1 mM $Mn^{2+}$ 첨가에 의해 약 35% 활성화됨을 보였으나 $Ag^{+}$, $Cu^{2+}$ 및 $Hg^{2+}$ 등의 중금속이온의 존재하에서는 거의 완전한 저해를 나타내었다. 또한 본 효소는 비록 높지는 않으나 $\alpha$-arabinofuranosidase 활성도 가지고 있어 B. stearothermophilus No 236의 $\beta$-xylosidase A 효소 보다 최소한 arabinoxylan의 분해에 있어서 더 우수한 효소로 판단되며 o-nitrophenyl-$\beta$-D-xylopyranoside 기질에 대한 $K_{m}$ 값과 $V_{max}$ 값은 각각 6.43 mM과 $1.45\mu$mole/min 로 계산되었다. 한편, $\beta$-xylosidase B 분자량은 gel 여과법으로는 약 160 kDa, 그리고 SDS-PAGE에 의해서는 약 54 kDa로 측정되어 본 효소는 trimer의 구조를 가지고 있음을 알 수 있었다.

• 한국수산과학회지
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• 제22권5호
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• pp.363-369
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• 1989

산업적으로 속성젓갈을 대량 생산하기 위하여, 우선 시중 젓갈에서 단백질분해력이 강한 균주 4 종을 분리하여 속성 분해정도와 분해 생성물의 풍미를 비교 검토한 결과 B. subtilis p-4 및 B. licheniformis p-5 균이 가장 양호하였으며, 이들 균주와 그 pretense의 특성은 다음과 같다. pH 7.0, $40^{\circ}C$ 식염$1\%$ 농도에서 균체 및 조효소 활성이 가장 양호하였으며, 이때의 비증식속도는 p-4 균 및 p-5 균이 각각 0.48/hr, 0.49/hr이었고, 최대 효소활성 농도는 p-4 는 30시간 후 335n mole-Tyr/min.ml, p-5는 28시간 후 300n mo1e-Tyr/min.ml이였다. 그리고 sephadex G-100 겔 여과에 의한 효소 정제도는 조효소에 비해 비활성이 p-4 및 p-5 균 protease의 경우 각각 25.4배, 8.6배씩 증가하였으며, pH 7.0, $50^{\circ}C$에서 활성이 가장 높았다. 또한 겔여과에 의한 분자량은 p-4가 18,000, p-5 protease가 30,000이었고, 저해제의 효과에서는 두 Protease 모두 $Ni^{2+},\;Cu^{2+}$ 이온과 EDTA, o-phenanthroline에 의해 강하게 활성이 소실되는 것으로 보아 metal chelator sensitive neutral protease에 속하는 것으로 추정되었다.

• 미생물학회지
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• 제29권3호
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• pp.172-178
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• 1991

Intracellular purine nucleoside phosphorylase (PNP) from Saccharomyces cerevisiae was partially purified using ammonium sulfate fractionation, heat treatment, a DEAE-Sephadex A-50 anion exchange chromatography and a Sephadex G-100 gel filtration chromatography. The enzyme was purified 20 fold with 3% recovery. The stability of enzyme was kept by addition of inosine and dithiothreitol. The pH optimum was found to be from 6.3 to 7.3 PNP was sensitive to 10mM of $Hg^{2+}$ , $Cu^{2+}$ , and was inactivated completely by 2 mM of p-chloromercuribenzoate and 5,5'-dithiobis (2-nitrobenzoate). The enzyme was capable of catalyzing the phosphorolysis of inosine, deoxyinosine, guanosine, deoxyguanosine and adenosine.

• 미생물학회지
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• 제30권2호
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• pp.101-107
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• 1992

화학 영양성으로 배양한 Rps. gelatinosa 에서 2회의 시토크롬 c 친화성 크로마토그래피와 DEAE-Sephacel 이온 교환 크로마토그래피 등 3 단계의 크로마토그래피를 수행하여 시토로콤 c 산화효소를 정제하였다. 정제된 시토크롬 c 산화효소는 Sephacryl S-300 에 의한 분자걍이 약 110,000 Da 이고 SDS-gel 전기영동에 의한 분자량이 약 52.000 Da 으로써 이량체일 것으로 보인다. 전제된 시토크롬 c 산화효소는 온도데 매우 불안정하고 말 심장 시토크롬 c 를 기질로 사용했을때 Km 값은 $20\mu$M, Vmax 값은 44unit/mg prot. 이며 pH 6.4 의 효소방응 최적 pH 와 25.deg.C 의 최적 온도를 보였다. 환원된 시토크롬 c 산화효소는 554, 523, 421 nm 에서 .alpha., .betha. soret 흡수대를 보였고 chromatophore 에서와 마찬가지로 KCN 과 $NaN_{3}$ 에 의해서는 효소 활성도가 저해를 받았지만 CO 와 antimycin A, myxothiazol 에 의해서는 효소 활성도가 저해를 받지 않았다. 빛을 에너지원으로 배양하거나 또는 화학영양성으로 배양하든지 모두 시토크롬 c-551 이 생성되었고 환원된 시토크롬 c-551 은 시토크롬 c 산화효소에 의해 산화되었다. 시토크롬 c-551 을 기질고 이용하였을 때 시토크롬 c 산화효소의 Km 값은 $26\mu$M 이었고 Vmax 값은 31.unit./mg prot. 로써 말심장의 시토크롬 c 를 기질로 이용할때 보다 오히려 낮았다. 이와 같은 결과로 보아 화학 영양성은 배양한 Rhodopseudomonas gelatinosa 에서 호흡에 의한 전자전달은 시토크롬 c-551 이 시토크롬 $bc_{1}$ 복합체로 부터 전자를 받아 b-형 시토크롬 c 산화효소에 전자를 전달해 주고 최정적으로 산소를 환원시킬 것으로 생각된다.

• 미생물학회지
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• 제32권3호
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• pp.208-214
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• 1994

토양으로부터 분리한 방선균주로부터 새로운 type II 제한효소를 분리하여 그 특성을 연구하였다. 이 균주는 수리분석 결과, Streptoverticillium olivoverticillatum으로 동정되었으며, 정제한 제한효소는 SolI이라 명명하였다. SoII은 BamHI의 isoschizomer로서 여섯 개의 염기서열 5'-G $\downarrow$ GATCC- 3'을 인지하며 두 개의 G 염기 사이에서 절단하여 4 base가 돌출된 5'말단을 생성한다. 그러나 BamHI과는 달리, dam methylation 되어 있는 인식 염기서열에는 작용하지 못하였다. Ammonium sulfate 분획(30-65%)과 heparin-agarose, Affi-gel Blue column chromatography를 거쳐 SolI을 부분 정제하였다. SolI은 활성을 보이기 위하여 0.2mM 이상의 $MgCl_2$를 반드시 필요로 하였으며, 다른 cofactor는 요구하지 않았다. NaCl이 없을 때 가장 높은 활성을 가지며 120 mM 이상의 NaCl이 있으면 활성이 완전히 억제되었다. 이 효소의 반응 최적 온도는 $40^{\circ}C$, 최적 pH는 8.6으로 나타났다. Gel filtration chromatography에서의 용출부피 비교로부터 이 효소의 분자량은 약 43,000Da인 것으로 추정된다.