The s-type pyocin was purified from the lysate of the mitomycin C-induced Pseudomonas aeruginosa 90-2-2205 cells by the other of ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sephadex A-50 chromatography and Sephadex G-200 gel filtration. The purity was confirmed by the polyacry-lamide gel electrophoresis. The molecular weight of the purified pyocin was estimated 180, 000 by gel filtration. The pyocin was analyzed to be a complex of some polypeptides by the SDS-PAGE. The pyocin was stable by heat treatment and at pH 6-7.5 by adding 10-3% gelatin and 0.2M NaCl to the 10mM Tris-HCl buffer (pH7.5). Its killing action against the sensitive cells was assumably a single hit process.
Alumina tubes suitable for the support of gas separation membranes have been prepared by the slipcasting technique. These supports have the average pore size of 0.1 ${\mu}{\textrm}{m}$ within the narrow distribution. The sol-gel dipcoating process of nanoparticulate sols is very sensitive to microstructure of the support, and the coating on the inside surface of the tube is found to be more successful than on the outside surface. Nanoparticulate silica sols (0.82 mol/ι) have been synthesized by an interfacial hydrolysis reaction between TEOS and high alkaline water. When coating an alumina tube with these sols, the minimum limits of the particle size and the aging time required for forming the coated gel layer at the given pH are provided. It is optimum to coat the support with less concentrated sols stabilized through aging for the appropriate time (more than 22 days) at the lower pH (pH 2.0) for producing a reproducible crack free thin film coating in composite membranes.
A sol-gel fiber-optic biosensor with encapsulated pH-sensitive fluorophore and immobilized genetically modified toluene-o-xylene monooxygenase was developed to detect TCE and PCE, which are carcinogenic chlorinate organic compounds prevailing in ground water. The sensitivity was characterized for the composition of sol-gel, and manufacturing procedure. The intensity curve reveals a linear range of intensity for pollutant concentration range of 0.01ppm and 1ppm. The change in intensity was appeared to be larger at each of L for same condition, and, therefore, the wavelength of λ was chosen for the analytical measurement.
A sol-gel fiber-optic biosensor with encapsulated pH-sensitive fluorophore and immobilized genetically modified toluene-o-xylene monooxygenase was developed to detect TCE, which is carcinogenic chlorinate organic compounds prevailing in ground water. The sensitivity was characterized for the composition of sol-gel, and manufacturing procedure.
온도와 pH 민감성을 갖는 그래프트 공중합체[Pluronic-$g$-poly(NIPAAm-$co$-MMA), Polymer A]와 [Pluronic-$g$-poly(NIPAAm-$co$-MAA), Polymer C]는 $t$-butylperoxybenzoate를 이용하여 Pluronic 공중합체의 주사슬에 $N$-isopropylacrylamide (NIPAAm)/$N,N$-diethylaminoethylmethacrylate (DEAEMA)와 $N$-isopropylacrylamide(NIPAAm)/methacrylic acid (MAA)를 각각 합성하였다. 그래프트 공중합체는 $^1H$ NMR과 젤 투과 크로마토그래피를 통해 공중합체의 화학적 구조와 분자량을 측정하였다. 그래프트 공중합체의 수용액 상에서의 특성은 다른 온도와 pH 조건에서 자외 및 가시선 분광 분석법, 접촉각 측정과 동적 광산란으로 측정되었다. 그래프트 공중합체는 수용액상에서 온도와 pH에 따라 민감한 상 변화를 보인다. 이는 DEAEMA 단량체의 아민 그룹과 MAA 단량체의 카복실 그룹은 각각 Polymer A와 Polymer C에서 하한임계용액온도에 큰 영향을 미친다고 제시한다. 그래프트 공중합체는 온도와 pH 변화에 관련된 다양한 약물 전달과 분자 스위치 적용에 사용될 수 있다.
Kim, Yeong-Shik;Hahn, Bum-Soo;Cho, So-Yean;Chang, Il-Moo
Toxicological Research
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제17권
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pp.97-104
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2001
Three types of proteases (MEF-1, MEF-2 and MEF-3) were purified from the egg cases of Ten-odera sinensis using ammonium sulfate fractionation, gel filtration on Bio-Gel P-60 and affinity chromatography on DEAE Affi-Gel blue gel. The proteases were assessed homogeneous by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and have molecular weight of 31,500, 32,900 and 35,600 Da, respectively. The N-terminal regions of the primary structure were compared and they were found to be different each other. MEFs readily digested the $A\alpha$ - and B$\beta$-chains of fibrinogen and more slowly the ${\gamma}$-chain. The action of the enzymes resulted in extensive hydrolysis of fibrinogen and fibrin, releasing a variety of fibrinopeptides. MEF-1 was inactivated by Cu$^{2+}$ and Zn$^{2+}$ and inhibited by PMSF and chymostatin. MEF-2 was inhibited by PMSF, TLCK. soybean trypsin inhibitor. MEF-3 was only inhibited by PMSF and chymostatin. Antiplasmin was not sensitive to MEF-1 but antithrombin III inhibited the enzymatic activity qf MEF-1. MEF-2 specifically bound to anti plasmin Among the chromogenic protease substrates, the most sensitive one to the hydrolysis of MEFs was benzoyl-Phe-Val-Arg-p-nitroanilide with maximal activity at pH 7.0 and 3$0^{\circ}C$. MEF-1 preferentially cleaved the oxidized B-chain of insulin between Leu15 and Tyr16. In contrast, MEF-2 specifically cleaved the peptide bond between Arg23 and Gly24. D-dimer concentrations increased on incubation of cross-linked fibrin with MEF-1, indicating the enzyme has a strong fibrinolytic activity.ity.
A interpenetrating polymer network (IPN) hydrogel, composed of chitosan (CS) and poly(diallydimethylammonium chloride) (PDADMAC) was prepared, which exhibited electrical sensitive behavior. The swelling behavior of the CS/PDADMAC SIPN hydrogel was studied by immersion of the gel into various pH buffer solutions, and their stimuli response in electric fields also investigated. In order to clarify the relationship between the equilibrium swelling ratio and bending behavior of the SIPN hydrogels, the state of water in the SIPN hydrogel was also investigated using differential scanning calorimetry (DSC).
용존산소농도(DO)와 pH를 동시에 검출하기 위하여 이중층 광학 센서 막을 제조하였다. DO 민감성 염료인 Rudpp를 MTMS 졸-겔에 혼합하고 24-웰 마이크로타이터 플레이트에 코팅하였다. DO-검출층 위에 HPTS와 혼합된 GA 졸-겔용액을 코팅하고 pH 측정을 위해 사용하였다. 이중층 광학 센서 막은 온도와 이온 강도에 영향을 받았다. 또한 DO와 pH 이중층 광학 센서 막은 미생물발효공정에 온라인 모니터링 하는데 응용하였으며 좋은 성능을 보였다.
To determine effectively the chitinolytic activity of rCHT1 from the hard tick H. longicornis expressed in baculovirus-mediated Spodoptera frugtperda (Sf) 9 cells, a simple and sensitive assay system was established in solid phase using agarose gel containing ethylene glycol chitin as substrate. The various factors affecting the efficacy of the assay were also investigated. The effects of various temperature, dosages of proteins, pH of media and time courses of reaction were examined to verify the sensitivity of assay for chitinolytic activity of rCHT1 protein. It was found that the optimal reactive conditions were $37^{\circ}C$ of temperature, 12 to 15 hours of reactive times, $0.1{\mu}g$ of protein concentration and pH 5 to 7 of media. Using the assay system designed, the functional activities of H. longicornis rCHT1l protein could be evaluated simply and sensitively.
In the present study, chitosan-glycerophosphate sodium salt solution as a thermosensitive system (TSS) was used to formulate a temperature-sensitive drug delivery system (TSDDS) containing acetaminophen (AAP). The optimized TSS was prepared by measuring gelation temperature, gelation time and rheological properties of TSS. The optimized gelation temperature and time of TSS were $36^{\circ}C$ and 100 seconds, respectively. The viscosity of TSS was also suitable for maintaining gel structure at $37.2^{\circ}C$. The release profiles of TSDDS in PBS/pH 7.4 with various apparatuses and mass loss of TSDDS were investigated. The time required to release 50% of AAP from TSDDS ($t_{50%}$) was 120 min with the formation of pore on the surfaces, which was 2 times longer than that from AAP-chitosan gel. In addition, TSDDS was degraded approximately 80% within 4 hr and then degraded slowly for 20 hrs. In conclusion, AAP-TSS (TSDDS) formulated in this study might be suitable for some specific uses such as subcutaneous injection and rectal formulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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