도토리 화분은 국내에서 가장 많이 생산되는 단일 화분으로, 민간에서는 지혈, 빈혈방지, 전립선염 치료 등에 이용되어 왔다. 본 연구에서는 식물 화분을 이용한 기능성 식의약품 소재 개발 가능성을 검토하고자, 도토리 화분의 에탄올 추출물의 극성별 유기용매 분획물을 제조하고 이의 성분 분석, 항산화, 항응고, 혈소판 응집 저해활성 및 활성 분획물의 적혈구 용혈 활성을 평가하였다. 총 폴리페놀 함량은 도토리 화분 에탄올 추출물 중 에틸아세테이트 분획물에서 가장 높은 225.0 mg/g을 나타내었다. 상기 에틸아세테이트 분획은 DPPH, ABTS 및 nitrite에 대한 RC50값이 각각 72.2, 27.7 및 62.6 ㎍/ml를 나타내어 강력한 항산화 활성을 보였다. 한편 도토리 화분의 항혈전 활성 평가를 위해 혈액응고저해 활성 평가 결과, 모든 분획물에서 5 mg/ml 농도까지 특이한 항응고 활성은 나타나지 않았다. 반면 혈소판 응집저해활성 평가 결과, 도토리 화분 추출물의 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 잔류물에서 우수한 응집저해가 나타났으나, 헥산 분획물에서는 오히려 응집촉진 효과를 나타내었다. 항산화 활성 및 혈소판 응집 저해활성이 우수한 도토리 화분 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 1 mg/ml 농도까지 인간 적혈구 용혈활성이 없었으며, UPLC/MS/MS 분석결과 rutin, isoquercitrin 및 astragalin이 주요 활성물질임을 확인하였다. 본 연구는 도토리 화분 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 이용한 새로운 항산화 및 항혈전제로 개발이 가능함을 제시하고 있다.
본 연구는 수박 과실썩음병의 원인균인 A. avenae subsp. citrulli에 대해 항균활성을 갖는 친환경 유기농자재를 개발할 목적으로 오배자(S. chinensis)를 대상으로 수행되었다. 오배자를 MeOH로 추출하여 용매분획을 하였고, 용매분획 중에서 가장 강한 활성을 나타낸 hexane fraction을 column chromatography로 분리하여 활성이 강한 분획들을 GC-MS로 분석하였다. GC chromatogram 상의 주요 peak에 해당하는 mass spectrum과 Wiley library를 비교하여 profiling한 결과, 지방산인 myristic acid, palmitic acid와 3-n-pentadecylphenol이 주요 물질로 검출되었다. 이들 검출 화합물의 항균활성을 검정하기 위하여 표준품을 사용하여 bioassay한 결과, myristic acid와 3-n-pentadecylphenol 화합물이 강한 활성을 보였다. 따라서 오배자로부터 분리한 myristic acid와 3-n-pentadecylphenol 화합물이 항균 활성물질인 것을 구명하였다.
복합 유기혼합체로부터 휘발성이 다른 세 그룹을 분리 농축할 수 있는 간단한 소형장치가 고안되었다. 이 장치를 사용하여 휘발성이 높은 유기성분들은 테넥스지씨에 헤드스페이스 트랩핑하고 남은 시료를 유기용매로 용출하여 얻어진 용출들을 휘발성 및 비휘발성 그룹으로 분리 농축할 수 있었다. 얻어진 휘발성 성분그룹은 고성능 캐리러리 가스크로마토그래피로 분석하였고, 비휘발성 성분그룹은 고성능 액체크로마토그래피에 의해서 분석하였다. 상세한 실험방법 및 유기 혼합물질인 잎담배를 시료로 사용하여 얻어진 분석 결과가 언급되어 있다.
수수 줄기에 함유된 타감물질의 특성을 구명하기 위해서 극성, 비극성 용매로 분획한 결과 사용한 용매에 따라 억제 효과가 달리 나타났는데 ethyl ehter 분획에서 억제작용이 가장 크게 나타났으며 또 methylene chloride와 ethyl acetate 분획에서도 8mg/ml과 16mg/ml 농도에서 상당한 억제 효과가 나타났으나 hexane과 남은 수용층 분획에서는 거의 억제 효과가 나타나지 않았다. Ethyl ether 분획을 pH에 따라 알칼리성, 중성 및 산성으로 다시 분획한 결과 산성 분획에서 억제 효과가 가장 크게 나타났다. 이상의 결과에서 수수 줄기와 함유하고 있는 타감물질은 비극성이며 산성 특성을 가진 물질이라 추측된다.
본 연구는 포도 거봉종의 종자와 과피 추출물의 지질과산화 억제 효과와 암세포들에 대한 세포 독성을 살펴보았다. 추출 온도를 달리하여 추출한 종자와 과피의 에탄올 추출물과 추출물에 대한 분획물들을 이용하여 지질과산화물의 억제효과를 측정한 결과, 종자 및 과피 에탄올 추출물 모두 온도변화에 따른 영향은 없는 것으로 나타났으며, 추출물의 농도가 증가할수록 지질과산화물의 감소효과가 증가하였다. 종자 추출물의 경우, 3$0^{\circ}C$에서 추출한 에탄올추출물이 20 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서 60.1%, 분획물 중에서는 ethyl acetate 분획물이 71.2%의 지질과산화를 억제하였다. 과피 에탄올 추출물의 경우, 5$0^{\circ}C$에서 추출한 추출물이 20 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서 48.1%, 분획물 중에서는 hexane 분획물이 44.4%의 지질과산화를 각각 억제하였다. 암세포 생육 억제 효과에서는 모든 암세포(MCF-7, Hep3B 및 A549)에서 포도 종자 및 과피 에탄올 추출물 및 분획물들이 1.00 $\mu\textrm{g}$/ML 농도에서 대부분 50% 이상의 생육 억제율을 보였으며, 암세포에 대한 생육 억제와 정상 세포에 대한 selectivity에서는 종자 에탄올 추출물과 과피 에탄을 추출물간의 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 본 연구 결과, 거봉포도종자 및 과피의 에탄올 추출물들과 각 분획물은 지질과산화 억제 효과와 암세포들에 세포 독성이 캠벨종의 포도종자 및 과피에 비하여 낮은 활성을 나타내었다.
본 연구에서는 5종의 주박과 누룩의 추출물 및 유기용매 분획물을 제조하고, 이들에 의한 지방세포형성억제, 항염증 및 항성장 활성을 연구하였다. 지방세포형성억제 활성 연구를 위하여 마우스 전지방 세포인 3T3-L1 세포주에 지방세포형성을 유도한 후 추출물 및 분획물 5종을 처리하였다. 처리한 시료 중 W-Ju의 에틸아세테이트 분획물(WPAc)이 가장 뚜렷한 지방세포형성 억제 활성을 보여 주었다. 이것은 oil red O 염색과 pro-adipogenic 유전자의 발현 감소에 의해 증명되었다. 또한, WPAc의 처리는 시간 의존적으로 PPAR-gamma 유전자의 발현을 감소시켰다. 항염증 연구를 위하여 RAW 264.7 세포주에서 5종의 시료에 의한 nitric oxide (NO) 생산에 미치는 영향을 연구하였다. 5종의 시료 중 B-Ju의 에틸아세테이트 분획물(PAc)의 처리에 의해 LPS로 활성화된 RAW 264.7 세포에서 NO 생산이 가장 높게 저해되었고, 또한 농도 의존적인 저해 양상을 보여 주었다. 게다가, PAc는 인간 대장암 세포주인 HCT116의 세포 생존율을 현저하게 감소시켰으며, 또한 농도의존적인 생존율 저해 양상을 보여 주었다. 또한, PAc는 NAG-1과 ATF3 유전자의 발현도 농도 의존적으로 감소 시켰다. 종합적으로, 이러한 연구결과는 주박과 누룩이 지방세포형성억제 활성, 항염증 활성 그리고 항성장 활성 등 다양한 생리활성을 가지고 있음을 시사한다.
Rahman, M. Saifur;Uddin, M. Gias;Alam, M. Badrul;Yoo, Jin Cheol
통합자연과학논문집
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제7권3호
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pp.173-182
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2014
To simplify the different biological investigation of the methanolic extract and solvent-solvent partitioning of Lablab purpures (L. purpures) bark. In-vitro anti-oxidant study was determined using total DPPH radical scavenging assay. In vitro antimicrobial study was measured by observing zone of inhibition. The cytotoxic activity was studied using brine shrimp lethality bioassay and thrombolytic activity by clot disruption method. The antioxidant potential was evaluated by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and Folin-Ciocalteau reagents using butylated hydroxytolune (BHT) and ascorbic acid as standards. The Aqueous soluble fraction revealed the highest free radical scavenging activity ($IC_{50}=48.76{\mu}g/mL$). The antimicrobial screening of the bark of L. purpures exhibited mild to moderate activity in test microorganisms. The CSF showed the maximum relative percentage inhibition against Salmonella parathyphi (34.2%) for bacteria and C. albicans (28.8%) for fungi whereas, lowest relative percentage inhibition against Sarcina lutea (22.0%) for bacteria and Aspergillus niger (24.4%) for fungi. In the brine shrimp lethality bioassay, The $LC_{50}$ values of Carbon tetrachloride and N-Hexane soluble fraction were found $92.18{\mu}g/mL$, and $68.95{\mu}g/mL$ respectively while the $LC_{50}$ values of standard Vincristine sulphate was $1.37{\mu}g/mL$. The methanolic extract and its organic soluble fractions of Lablab purpureus at concentration 2.0 mg/mL, significantly protected the lysis of erythrocyte membrane induced by hypotonic solution and heat as compared to the standard, acetyl salicylic acid (0.10 mg/mL). The MSF and AQSF produced 61.48 % and 53.75% inhibition of hemolysis of RBC caused by hypotonic solution respectively, whereas acetyl salicylic acid (0.10 mg/mL) showed 76.42%. Ethanol extract of L. purpures and all of its different partitions exhibited moderate thrombolytic activity of 37.25%-2.40%. Very good preliminary screening and simplified experiments were able to show the different biological activity of methanolic extract and its soluble fractions of L. purpures at a time.
In this study, crude extracts of the marine eelgrass Zostera japonica and their solvent-partitioned fractions were evaluated for their inhibitory effect against AGS, HT-1080 and MCF-7 human cancer cells using MTT assay. Each of the crude extracts (acetone/methylene, chloride, and methanol) of Z. japonica showed a significant inhibitory effect on the growth of human cancer cells. The combined crude extracts were partitioned between $CH_2Cl_2$ and water. The organic layer was further partitioned between 85% aq. MeOH and n-hexane, and the aqueous layer was then fractionated into n-BuOH and $H_2O$, successively. Growth inhibition effects of solvent-partitioned fractions from Z. japonica on human cancer cells increased in a dose-dependent manner. Among these tested samples, the 85% aq. MeOH fraction revealed good inhibitory effects on the growth of AGS and HT-1080 human cancer cells, while the n-hexane fraction exhibited good inhibitory effects on the growth of AGS and MCF-7 human cancer cells. In addition, 85% aq. MeOH and n-hexane fractions enhanced mRNA expression of p53 gene. These results suggest that there is further scope for the isolation of active compounds from Z. japonica, which should show much stronger anticancer activity.
Recently, interest in plant-derived food additives has developed natural antioxidants, in order to alternate syn-thetic antioxidants with several disadvantages. In the present study, different organic fractions from solvent parti-tions of 80% methanol extract from Jeju benthic diatoms, Achnanthes longipes, Navicula sp. and Amphora coffeaeformis was assessed for their potential antioxidant effects. Among the solvent fractions tested, n-hexane (80.4%) and 80% methanol extract (76.6%) from A. longipes, chloroform (63.2%) from Navicula sp. and n-hexane (67.4%) from A. cof-feaeformis were effective in DPPH free radical scavenging. Fractions of chloroform (53.4%) and n-hexane (53.1%) from A. longipes exhibited higher activities on $H_2O_2$ scavengin. Fraction of n-Hexane from A. longipes exhibited the highest hydroxyl radical scavenging activity and NO. scavenging activity (56.5% and 75.6%, respectively). Aqueous residue from A. coffeaeformis (75.6%) showed the highest metal chelating effect. chloroform and ethyl acetate frac-tion of all the diatoms exhibited significant antioxidant activities in lipid peroxidation inhibitory activity. In particu-lar, both chloroform and the ethyl ecetate fraction from A. longipes and A. coffeaeformis exhibited lipid peroxidation inhibitory activity significantly higher than that of $\alpha$- tocopherol. These data suggest that the Jeju benthic diatoms tested are rich in hydrophilic and hydrophobic antioxidative compounds with different antioxidative properties that can be applied in food industry.
복분자는 당도가 낮고 신맛이 강해 과실주로 주로 제조되고 있으며, 복분자주 제조 후 부생되는 주박은 대부분 폐기되고 있다. 본 연구에서는 현재까지 생리활성이 보고된 바 없는 복분자주 주박을 대상으로 열수 추출물, ethanol 추출물 및 이들의 다양한 분획물을 조제하여 항균, 항산화 및 항혈전 활성을 평가하였다. 그 결과, 복분자주 주박의 ethylacetate (EA) 분획은 413~459 mg/g의 높은 polyphenol을 함유하고 있으며, 그람양성세균에 대한 강력한 성장억제 활성과, DPPH 음이온, ABTS 양이온에 대한 우수한 radical 소거능, nitrite 소거능 및 환원력을 나타내었다. 또한 혈액내의 thrombin, prothrombin, coagulation factor 에 대한 저해를 통한 혈액응고저해 활성이 우수하였다. 복분자주 주박의 butanol 분획은 우수한 항산화력과 함께 내인성 혈전 생성에 관련된 aPTT 연장활성을 나타내었으며, aspirin에 필적하는 강력한 혈소판 응집저해 활성을 나타내었다. 한편 복분자주 주박의 열수 추출물의 순차적 유기용매 분획 후의 물 잔류물은 aspirin보다 강력한 혈소판 응집저해를 나타내어 새로운 항혈소판제 개발 소재로 이용 가능함을 확인하였다. 본 연구결과는 폐기되고 있는 복분자주 주박을 이용한 고부가가치 식품 및 향장소재 개발이 가능함을 제시하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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