Kim, Won-Jung;Jung, Hee-Young;Min, Ji-Yun;Chung, Young-Gwan;Lee, Cheol-Ho;Choi, Myung-Suk
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.12
no.5
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pp.372-377
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2004
Scopolia parviflora Nakai, a rare and endangered species, is the sole plant producing tropane alkaloids (TA) among the Korean native species. In order to enhance TA productivity the SP72 root line was selected by screening 100 of root line, and the optimal culture media for root growth and TA production were investigated with the SP72 roots. Based on the several media, SH and 2B5 medium were determined as growth medium and White and NN medium as production medium. Among the four combinations of two-stage culture, 2BN (2B5 as growth medium plus NN as production medium) showed more enhanced root growth and TA production as compared with production media of White and NN medium and growth media of SH and 2B5 medium, respectively. However, bubble column bioreactor (BCB) cultures applying two-stage culture did not reveal the effective results despite of the each successful operation of two-stage culture in conical flasks and BCB cultures.
The optimal conditions for production of Monascus sp. KM100l cell mass on submerged culture and production of monacolin K on rice solid culture were investigated. An overproducing mutant of Monascus pigments, KM 1001 mutant, from Monascus purpureus KCCM60016 was selected by NTG treatment. The optimal medium for the production of KM100l mutant cell mass is instructed to be composed of 3% glucose, 2% yeast extract, 0.1 % KH$_2$PO$_4$, 0.05% The optimal conditions for production of Monascus sp. KM100l cell mass on submerged culture and production of monacolin K on rice solid culture were investigated. An overproducing mutant of Monascus pigments, KM 1001 mutant, from Monascus purpureus KCCM60016 was selected by NTG treatment. The optimal medium for the production of KM100l mutant cell mass is instructed to be composed of 3% glucose, 2% yeast extract, 0.1 % KH$_2$The optimal conditions for production of Monascus sp. KM100l cell mass on submerged culture and production of monacolin K on rice solid culture were investigated. An overproducing mutant of Monascus pigments, KM 1001 mutant, from Monascus purpureus KCCM60016 was selected by NTG treatment. The optimal medium for the production of KM100l mutant cell mass is instructed to be composed of 3% glucose, 2% yeast extract, 0.1 % $(KH_2PO_4$, 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.2% L-asparagine, pH 4.5, and the optimal inoculum size and shaking speed were $1.5{\times}10^6$ spores/50 m1 medium and 150 rpm, respectively. On optimal conditions, 4.1 g/l of the cell mass was obtained at 28$^{\circ}C$ for 3 days. The mycelium were inoculated on 500 g of steamed rice using vinyl bag ($30.6{\times}44$ cm) and incubated at $30^{\circ}C$, 85% humidity for 21 days. Lactone form monacolin K was rapidly increased for 2 days and reached highest concentration of monacolin K (2,930 mg/kg) for 15 days, and monacolin K was decreased after 15 days.
Agrocybe aegerita is Hymenomycetes fungus belonging to the order Agaricales and family of Bolbitiaceae. Much less is known about liquid culture of Agrocybe aegerita. Thus, the present study was to investigate the liquid cultural characteristics of Agrocybe aegerita my-celium. The optimal medium for the mycelial growth and density was ME medium, optimal tem-perature and initial pH were 25$\pm$1$^{\circ}C$ and 5.5, respectively. And optimal culture time for mycelial growth was 12 days. The modified optimal medium compositions were dextrin 3% (w/v), yeast extract 2% (w/w), MgSO$_4$0.05% (w/v), and KH$_2$PO$_4$0.15% (w/v). Under optimal culture conditions, the mycelial growth of modified optimal medium was higher than that of ME medium.
Kluyveromyces marxianus var. marxianus isolated as an inulin-assimilating microorganism produces inulin fructotransferase (inulaseII) which catalyses the conversion of inulin into di-D-fructofuranose 1, 2' : 2, 3' dianhydrde (DFAIII). The DFA produced by the organism was isolated by using active carbon column, and identified as DFAIII by high performance liguid chromatography. The culture medium giving maximum inulaseII production was found to consist of 1% sucrose and 0.75% yeast nitrogen base (YNB). The inulasell production was induced by inulin or sucrose as a carbon source and increased by addition of YNB as a nitrogen source. Optimal initial pH of the culture medium, culture temperature and medium volume for the enzyme production were pH 4.7, 30$\circ$C and 140 ml, respectively. Under the optimal conditions described above, the enzyme activity in the culture supematant reached 4.2 units/ml after cultivation for 36 h. The DFAIII was accumulated at 13.25 mg/ml after 48 h of culture in the Jerusalem artichoke tuber medium.
The present study has been carried out to investigate the optimal condition on lymphocyte blastogenesis of rabbit lymphocytes, whole blood culture and microculture system in conjunction with a semiautomatic multiple sample harvester(SAMSH) was used to study the In vitro optimal condition of rabbit lymphocytes. Data were presented to show many variables that are involved in studying the phytohemagglutinin(PHA) and lipopolysaccharide(LPS) response of rabbit lymphocyte in a microculture system. Analysis indicated that the conditions for optimal PHA as measured by incorporation of $^3H$-TdR include: (1) use of RPMI-1640 as culture medium. (2) use of $6{\mu}g$ of PHA, per culture. (3) 48-hours culture period. Conditions for optimal stimulation with LPS mitogen were similar to those used for PHA.
A Bacillus sp. A-6 strain that produced xylanase was isolated from rice bran. The optimal temperature and pH for xylanase activity of the culture supernatant of Bacillus sp. A-6 were 40$^{\circ}C$ and pH 7, respectively. The optimal temperature and pH for xylanase production in the xylan medium were 30$^{\circ}C$ and pH 9, respectively. The optimal concentrations of oat spelt xylan and peptone for xylanase production were 0.5% and 1.5%, respectively. The best nitrogen sources for xylanase production was beef extract, but xylanase production was also supported comparably by tryptone and peptone. The bacterial growth in the optimal xylan medium reached stationary growth phase after 12 h of incubation. The xylanase production in the culture supernatant increased dramatically during the initial 12 h exponential growth phase and then remained constant at 23.8-24.5 unit/ml during the stationary growth phase. The pH of the culture medium decreased from 8.8 to 6.7 during the exponential growth phase and subsequently increased to 8.1 during the stationary growth phase. Rice bran, sorghum bran, and wheat bran as well as oat spelt xylan induced xylanase production. The xylanase production was repressed when glucose was added to the xylan-containing medium.
The principal objective of this study was to determine the optimal liquid culture conditions in shake flasks for maximal sporulation of Beauveria bassiana. The optimal initial pH for the spore production of B. bassiana using Potato Dextrose Broth was 5.2. The screening in shake flasks of carbon and nitrogen sources resulted in the identification of an optimal medium based on 3% sucrose and 1% casamino acid, with a C : N ratio of 22 : 4. Using this medium, a production level of $5.65{\times}10^7$ spores per ml was obtained after 5 days of culture. Using 3% corn meal, 2% corn steep powder, and 2% rice bran, the maximum spore concentration of $8.54{\times}10^8$/ml was achieved 8 days after inoculation at $25^{\circ}C$ in a rotary shaking incubator operated at 200 rpm. This represents a yield gain of approximately 2.89 times that of pre-optimization.
In order to investigate the factors affecting the culture of mouse preantral follicles in vitro, we examined the effect of culture media, protein supplements, and culture period on their growth. The oocyte diameter (initial size: $55.6{\pm}2.5{\mu}m$) was progressively increased during culture, and the maximum size ($72.0{\pm}2.4{\mu}m$) was reached on day 10 of the in vitro culture. The chromatin configuration in the germinal vesicle (GV) oocyte progressively shifted from a non-surrounded nucleolus (NSN) to a surrounded nucleolus (SN). On day 10 of the culture, most of the oocytes progressed to the SN pattern. The survival and metaphase II rates of the oocytes in alpha-minimal essential medium (alpha-MEM) were significantly higher (p<0.05) than those in Waymouth and tissue culture medium (TCM)-199. As a protein source, fetal bovine serum (FBS) was more suitable for the culture of mouse preantral follicles as compared to human follicular fluid (hFF) and bovine serum albumin (BSA); the optimal concentration of FBS was 5%. These results suggest that in a culture of mouse preantral follicles, alpha-MEM and 5% FBS are an optimal medium and a protein source, respectively; further, the 10 days of culture is required for the complete growth of oocytes in this culture system.
Kim, Kyung-Ah;Noh, Bohg-Soo;Lee, Jung-Kul;Kim, Sang-Yong;Park, Yong-Cheol;Oh, Deok-Kun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.10
no.1
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pp.69-74
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2000
The medium for erythritol production by Torula sp. in a 500-ml baffled flask was optimized to be 300 g/I sucrose, 10 g/I yeast extract, 3 g/I $KH_2PO_4$, and 10 mg/I $CuSO_4{\cdot}5H_2O{\;}at{\;}34^{\circ}C$ with initial pH of 5.5. Using this optimal medium, erythritol of 166 g/I was obtained after 140 h of cultivation, corresponding to 55.3% of the erythritol yield from sucrose with a productivity of 1.11 g/I/h. Optimal concentrations of carbbon and nitrogen sources in a fermentor were higher than that in a flask due to the higher oxygen supply of the fermentor. Employing the medium containing 300 g/I or 400 g/I sucrose for the determination of optimal C/N ratio, the C/N ratio was found to be more important than the nitrogen concentration for effective erythritol production, The optimal ratio of yeast extract to sucrose (g/g) was 20. The yield and productivity of erythritol were maximal in the medium containing 400 g/I sucrose and 20 g/I yeast extract. when dissolved oxygen in the culture was increased, the cell mass increased but the erythritol production was manimal in the range of 5 to 10% of dissolved oxygen. Under the optimal the rane of 5 to 10% of dissolved oxygen. Under the optimal culture condition of the fermentor, a final erythritol concentration of 200 gI was obtained after 120 h with a yield of 50% and the productivity was 1.67 g/I/h. The yield was the highest among erythritol-producting microorganisms
This study was conducted to establish the optimal culture conditions for in vitro production of bovine embryos derived from slaughter house ovaries. Cumulus-oocyte- complexes (COCs) collected by aspiration from follicles of 2~7 mm in diameter were matured in Ham's F-10 medium supplemented with 0.01 $\mu\textrm{g}$/m1 epidermal growth factor (EGF) at 39$^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_2$in air. After 24 hrs of culture, the oocytes were co-cultured with epididymal sperm selected off by Percoll-density gradient in TALP medium for 24 hrs. The presumptive zygotes were cultured in HECM-6 medium for 3 d post-insemination, and followed by cultured in TCM199 medium until 7 to 10d post-insemination. The cultures were compared of their cleavage and development into later stage in culture medium by additions of different protein sources (PVA, BSA and BCS) and by different embryo density. The rates of cleavage and development rates into blastocyst were not significantly (P<0.05) different among the culture media containing with BSA (75.0% and 40.5%), BCS (76.7% and 38.0%) and PVA (72.5% and 42.2%), respectively. Significantly (P<0.05) higher blastocysts rates were obtained in culturing of 30 and 40 embryos in each 50$\mu$l droplets of culture medium than in 5, 10 and 20 embryos. These results indicate that the optimal density of embryos is 30~40 embryos in a 50$\mu$l droplet of culture medium. Furthermore there is no effect of different protein sources on early embryonic development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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