Effects of dammarane glycosides of Panax ginseng on primary cultured chicken embryonic skeletal muscle cells were studied by microscopic observation and determination of the activity of acetylcholinesterase. Muscle cells were prepared from the breast of 12-day-old chicken embryo and cultured with either a medium consisted of 87.5% Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), 10% horse serum and 2.5% chicken embryonic extract or a medium consisted of 90% DMEM and 10% horse serum. It was observed that dammarane glycosides of Panax ginseng seemed to show the tendency to stimulate the growth and the differentiation of the muscle cells cultured with a medium consisted of 90% DMEM and 10% horse serum under microscopic observation. The activity of acetylcholinesterase in the muscle cells cultured with a medium consisted of 90% DMEM and 10% horse serum was increased by dammarane glycosides of Panax ginseng.
Objectives : In this study, it was investigated the effects of solid-phase fermentation extraction with Phellinus linteus of discarded Schisandra chinensis extract (PS) and its action mechanism on dexamethasone-induced muscle atrophy in mice. Methods : In mice, muscle atrophy model was induced by dexamethasone (5 mg/kg, I.p) once daily for 2 weeks and with PS extract administration (100 and 300 mg/kg, p.o.) as treatment groups. The changes in body weights, grip strength, Treadmill test, muscle weights, and the expression of atrophy-related genes were measured in muscle atrophy mice. The histological changes of gastrocnemius tissues were also observed by H&E staining with measurement of myofiber size. Results : The administration of PS extract increased significantly body weights, grip strength, treadmill test and muscle weights in muscle atrophy mice. PS extract administration increased significantly the area of myofibers and inhibited structural damages of muscle and increased significantly the expression of myogenin and decreased significantly the expression of MuRF1, Atrogin1 and phosphorylation of AMPK and PGC1α in muscle tissues of muscle atrophy mice. Conclusions : These results indicate that PS extract has a improvement effects on muscle atrophy with stimulation of myogenic differentiation and inhibition of mRNA degradation that could be related with the activation of AMPK and PGC1α signaling pathways in muscle. This suggests that PS extract can apply to treat muscle atrophy in clinics.
Present study was performed to investigate the effect of single and co-culture of adipocyte and muscle cell lines on cell differentiation. 3T3-L1 (adipocyte) and L6 (muscle) cell lines were single-cultured on the condition of 10% fetal bovine serum (FBS)/Dulbeco's modified eagle's medium (DMEM) for 48 h followed by culture within 5% FBS/DMEM as a growth media. Then, the growth media was replaced by differentiation media composed of 2% FBS/DMEM without additives in single- or co-culture of the 3T3-L1 and the L6 cells to induce differentiation of both cell types. In co-culture system, the 3T3-L1 and the L6 cells were grown in separated places by being seeded on a $0.4{\mu}m$ insert membrane and on the bottom of 6 well plate, respectively. Cell differentiation was measured using morphological investigation and cytosolic analysis of glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH; for 3T3-L1) and creatine kinase (CK; for L6). Based on the GPDH results, the presence of L6 cells did not stimulate 3T3-L1 differentiation showing more differentiation of 3T3-L1 cells in the single-culture compared to the co-culture condition. In contrast, 3T3-L1 cells in the co-culture promoted differentiation of L6 cells. Enzymatic analysis supported this result showing that 3T3-L1 cells showed statistically (P<0.05) higher GPDH activity in the single-culture than the co-culture, whereas CK results of L6 cells were vice versa (P<0.05). Overall, present results may indicate that co-culture system is more reliable and precise technique compared to single-culture. Further studies on several co-culture trials including different media conditions, supplementation of differentiating substances, molecular biological analysis, etc. should be required to obtain practical and fundamental mass data.
Background: The ginsenoside Rg1 has been shown to exert various pharmacological activities with health benefits. Previously, we have reported that Rg1 promoted myogenic differentiation and myotube growth in C2C12 myoblasts. In this study, the in vivo effect of Rg1 on fiber-type composition and oxidative metabolism in skeletal muscle was examined. Methods: To examine the effect of Rg1 on skeletal muscle, 3-month-old mice were treated with Rg1 for 5 weeks. To assess muscle strength, grip strength tests were performed, and the lower hind limb muscles were harvested, followed by various detailed analysis, such as histological staining, immunoblotting, immunostaining, and real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction. In addition, to verify the in vivo data, primary myoblasts isolated from mice were treated with Rg1, and the Rg1 effect on myotube growth was examined by immunoblotting and immunostaining analysis. Results: Rg1 treatment increased the expression of myosin heavy chain isoforms characteristic for both oxidative and glycolytic muscle fibers; increased myofiber sizes were accompanied by enhanced muscle strength. Rg1 treatment also enhanced oxidative muscle metabolism with elevated oxidative phosphorylation proteins. Furthermore, Rg1-treated muscles exhibited increased levels of anabolic S6 kinase signaling. Conclusion: Rg1 improves muscle functionality via enhancing muscle gene expression and oxidative muscle metabolism in mice.
The current study was undertaken to determine the effect of conjugated linoleic acid(CLA) isomers, cis-9, cis-11(c9c11), cis-9, trans-11(c9t11), trans-9, trans-11(t9t11), trans-10, cis-12(t10c12) on differentiation of pig preadipocytes and myogenic satellite cells during culture. Cells were isolated from new born pigs. The t10c12 isomer decreased differentiation of pig preadipocytes(92%), but not that of myogenic cells. The t9t11 isomer decreased differentiation of preadipocytes(14%) and increased that of myogenic cells (26%). No other CLA isomers affected differentiation of preadipocytes or myogenic cells. The effects of CLA on proliferation of preadipocytes and myogenic cells were small, compared to the effects on differentiation. These results suggest that CLA isomers have different effects on differentiaton of pig preadipocytes and myogenic cells.
Cell growth and DNA synthesis were studied from a cultured early- and late- pas- sage mouse aorta smooth muscle cell (MASMC) because the proliferation of vascular smooth muscle cell (VSMC) is a key factor in development of atherosclerosis. In this study, the cells were cultured in fetal bovine serum (FBS) and stimulated by growth factors such as thrombin and platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB). Compared to the number of early-passage MASMC (passage 3 to 9) the number of late-passage MASMC (passage 30 to 40) in a normal serum state was increased 2 fold at Day 1, 3 and 6 in culture, respectively. Incorporation of $[^3H]$ thymidine into DNA induced by serum, PDGF and thrombin in late-passage MASMC was greater than those in early-passage MASMC. We also examined whether intracellular zinc levels would be an aging factor or not. The intracellular zinc level in early- and late-passage MASMC was monitored by using the zinc probe dye N-(6-methoxy-8-quinolyl)-p-toluenesulfonamide. It is interested that late-passage MASMC increased the intracellular fluorescence level of zinc, more than the early passage MASMC did. The alterations of intracellular zinc level occur concurrently with changes in MASMC proliferation rate during aging. This data suggest that the age-associated changes in zinc concentrations may provide a new in vitro model for the study of smooth muscle cell differentiation.
Kim, Jin-Nam;Moon, Je-Sung;Lee, Eun-Young;Hwang, Kyu-Choon;Tae Hun;Kim, Ki-Dong;Han, Jae-Yong
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2000.11a
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pp.78-80
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2000
A new murine TGF-$\beta$ family member, myostatin(growth/differentiation factor-8) is expressed specifically in developing and adult skeletal muscle and may be a negative regulator of skeletal muscle development. This study aims at characterization and identification of genomic organization of chicken myostatin gene. In thi study, we identified the genomic organization and sequence of chicken myostatin gene. Results of RT-PCR and Northern blots from various tissues showed different mRNA expression levels in developmental stages of chick embryos and demonstrated strong expression of myostatin mRNA in skeletal muscle. These facts suggest that chicken myostatin gene would play an important role not only in skeletal muscle cell but also in other tissues.
Kim, Yong Jin;Tamadon, Amin;Park, Hyun Tae;Kim, Hoon;Ku, Seung-Yup
Osteoporosis and Sarcopenia
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v.2
no.3
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pp.140-155
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2016
Sex steroids influence the maintenance and growth of muscles. Decline in androgens, estrogens and progesterone by aging leads to the loss of muscular function and mass, sarcopenia. These steroid hormones can interact with different signaling pathways through their receptors. To date, sex steroid hormone receptors and their exact roles are not completely defined in skeletal and smooth muscles. Although numerous studies focused on the effects of sex steroid hormones on different types of cells, still many unexplained molecular mechanisms in both skeletal and smooth muscle cells remain to be investigated. In this paper, many different molecular mechanisms that are activated or inhibited by sex steroids and those that influence the growth, proliferation, and differentiation of skeletal and smooth muscle cells are reviewed. Also, the similarities of cellular and molecular pathways of androgens, estrogens and progesterone in both skeletal and smooth muscle cells are highlighted. The reviewed signaling pathways and participating molecules can be targeted in the future development of novel therapeutics.
Objectives : This study is to effect of improving muscle atrophy through water extract on the solid-phase fermentation extraction with Phellinus linteus of discarded Schisandra chinensis in an atorvastatin-induced atrophy C2C12 cell. Methods : C2C12 myoblast were differentiated into myotube by 2% horse serum medium for 6 days, and then treated solid-phase fermentation(S-P) extract at different concentrations for 24h. To investigate the effect of S-P extract on the induction of muscle atrophy and expression of atrophy-related genes and apoptosis in differentiated C2C12 myotubes using a GSH, ROS, real-time PCR, western blots analysis. Results : As a result of treatment with atorvastatin at concentrations of 5, 10, and 20 uM on the 6th day of differentiation in C2C12 myotube cells, it was confirmed that the cell morphology was damaged in a concentration-dependent manner, and the length and thickness of the myotube also decreased in a concentration-dependent manner. Treatment with S-P extract (50, 100 and 200 ㎍/㎖) increased of GSH and inhibited ROS in the atorvastatin-induced muscle atrophy cell model at a concentration that did not induce toxicity. In addition, it was confirmed that it has an effect on muscle reduction by inhibiting apoptosis of muscle cells as well as being involved in protein production and degradation of muscle cells. Conclusions : Atorvastatin-induced atrophy C2C12 cell, S-P extract activates related to differentiation/generation and proteolysis, and inhibits cell death of atrophy in C2C12 cell. Based on this, it is necessary to prove its effectiveness through animal models and human application test, but it is considered to be discarded Schisandra chinensis can present the potential for development as a recycling industrial material.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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