The purpose of this study was to investigate the antimicrobial activity, antimutagenic and anticancer effects and dyeing properties of the fermented indigo extract. The methanol extract of fermented indigo showed a strong inhibition effect on Trich. mentagrophytes and antimutagenic activities against aflatoxin B$_1$(AFB$_1$) in the Ames test using Salmonella typhimurium TA 100. We also found in vitro anticancer effects of the methanol extract of fermented indigo and it was evaluated by using Clone M-3 mouse melanoma cells and A431 human epidermoid carcinoma cells and exerted little cytotoxity against 3T3-L1 embryo fibroblast cell. In the relationship between the K/S values of cotton and silk fabrics dyed with fermented indigo and dyeing repeating times, the K/S values became higher as the repeating times were increased. The K/S values were high when the fabrics were dyed at low temperture. The K/S values of cotton fabrics were higher than those of silk fabrics. Changes of surface color of silk fabrics were higher than those of cotton fabrics after water fastness test, laundering, irradiation and treatment of acidic and alkaline perspiration.
Early embryo development and implantation were arrested in ICR mice which were passively immunized with a mouse monoclonal progesterone amtibody given as a single intraperitoneal injection at 12 hrs or 60 hrs post coitum (p. c.). Unimplanted embryos were recovered from the reproductive tract of the antibody-treated mice and none of these progressed to the blastocyst stage. The most pronounced effect was an arrest of embryonic development at a stage prior to cavitation. The plasma progesterone concentration in the blood taken by carbiac puncture increased greatly after the treatment by virtue of high affinity binding by the antibody in circulation. The result showed that passive immunization against progesterone shortly after mating interfered with early hormone dependent steps which were essential for normal embryonic development.
DNA methylation at cytosines (5mC) is a major epigenetic modification involved in the regulation of multiple biological processes in mammals. How methylation is reversed was until recently poorly understood. The family of dioxygenases commonly known as Ten-eleven translocation (Tet) proteins are responsible for the oxidation of 5mC into three new forms, 5-hydroxymethylcytosine (5hmC), 5-formylcytosine (5fC) and 5-carboxylcytosine (5caC). Current models link Tet-mediated 5mC oxidation with active DNA demethylation. The higher oxidation products (5fC and 5caC) are recognized and excised by the DNA glycosylase TDG via the base excision repair pathway. Like DNA methyltransferases, Tet enzymes are important for embryonic development. We will examine the mechanism and biological significance of Tet-mediated 5mC oxidation in the context of pronuclear DNA demethylation in mouse early embryos. In contrast to its role in active demethylation in the germ cells and early embryo, a number of lines of evidence suggest that the intragenic 5hmC present in brain may act as a stable mark instead. This short review explores mechanistic aspects of TET oxidation activity, the impact Tet enzymes have on epigenome organization and their contribution to the regulation of early embryonic and neuronal development.
Japanese encephalitis has been prevalent for long time in the Far East and many patients have been reported in both South East and Mid-West Asia recently. Recently, vaccine was used in prevention of this viral disease of man which was derived from formalin inactivated virus inoculated into mouse brain, but live attenuated active vaccine for human is not developed yet. Author inoculated Japanese encephalitis virus into several cell culture strains for development of live attenuated encephalitis virus strain and the results were as follows: 1. Japanese encephalitis virus was inactivated rapidly in cell free medium at $36^{\circ}C$ and totally inactivated by 72 hours. 2. In growth curve of Japanese encephalitis virus in HeLa cell cultures, maximal multiplication of the virus was occured at 4th day and virus multiplication was continued for at least 12 days. 3. After succeeding passage of the virus in HeLa cell cultures and human esophagus epithelial cell cultures, infectivity of virus for mice was disappeared from 2nd passage in HeLa cell cultures and 3rd passage in esophagus epithelial cell cultures. 4. In inoculation to monkey kidney epithelial cells and chick embryo cell cultures, infectivity of the virus for mice was continued after 10th passages.
Kim, Jongsoo;Yun, Hyo Jung;Lee, Ji-Yeon;Kim, Myoung Hee
대한의생명과학회지
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제21권1호
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pp.15-22
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2015
Dexamethasone, a synthetic glucocorticoid (GC), is clinically administered to woman at risk for premature labor to induce fetal lung maturation. However, exposure to repeated or excess GCs leads to intrauterine growth restriction (IUGR) and subsequently increases risk of psychiatric and cardio-metabolic diseases in later life through fetal programming mechanisms. GCs are key mediators of stress responses, therefore, maternal nutrient restriction or psychological stress during pregnancy also causes negative impacts on birth and neurodevelopment outcome of fetuses, and other congenital defects, such as craniofacial and skeletal abnormalities. In this study, to examine the effect of prenatal stress on fetal skeletal development, dexamethasone (1 mg/kg [DEX1] or 10 mg/kg [DEX10] maternal body weight per day) was administered intraperitoneally at gestational day 7.5~9.5 and the skeletons were prepared from embryos at day 18.5. Seven out of eighteen (39%) embryos treated with DEX10 showed axial skeletal abnormalities in either the T13 or L1 vertebrae. In addition, examination of the sternum revealed that xiphoid process, the protrusive triangular part of the lower end of the sternum, was bent more outward or inward in DEX group embryos. In conclusion, our findings suggest a possible link to the understanding of the effect of uterine environment to the fetal skeletal features.
LEE JAE HYUNG;SEO YONG BAE;YOON MOON YOUNG;CHOI JUNG DO;KIM YOUNG TAE
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권2호
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pp.321-329
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2005
Ornithine decarboxylase (ODC) antizyme is a key regulatory protein in the control of cellular polyamines. We have isolated two distinct ODC antizyme cDNA clones (AZS and AZL) from a flounder (Paralichthys olivaceus) brain cDNA library. Their sequences revealed that both clones required translational frameshifting for expression. Taking + 1 frameshifting into account, AZS and AZL products were 221 and 218 amino acid residues long, respectively, and shared $83.3\%$ amino acid sequence identity. Comparison of the structure and nucleotide sequence of the antizyme genes showed that the genes were highly conserved in flounder, zebrafish, mouse, and human. A phylogenetic tree was constructed, based on the antizyme amino acid sequences from various species. The presence of the two types of antizyme mRNA species in brain, kidney, liver, and embryo was confirmed by using the reverse transcriptionpolymerase chain reaction (RT-PCR) and Northern blot analysis. Recombinant proteins of flounder ODC antizymes, containing His-Nus-S tag at the amino-terminus, were overexpressed as His-AZL and His-AZS fusion proteins in Escherichia coli BL21 (DE3) pLys by using the pET44a(+) expression vector.
Lee, Kiwon;Shim, Jae Hwan;Kang, Mi Jin;Kim, Ji Hye;Ahn, Jong-Seong;Yoo, Soon Ji;Kim Kwon, Yunhee;Kwon, Hyockman
Molecules and Cells
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제24권2호
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pp.288-293
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2007
The conversion of mitotic chromosome into interphase chromatin consists of at least two separate processes, the decondensation of the mitotic chromosome and the formation of the higher-order structure of interphase chromatin. Previously, we showed that depletion of BAF53 led to the expansion of chromosome territories and decompaction of the chromatin, suggesting that BAF53 plays an essential role in the formation of higher-order chromatin structure. We report here that BAF53 is associated with mitotic chromosomes during mitosis. Immunostaining with two different anti-BAF53 antibodies gave strong signals around the DNA of mitotic preparations of NIH3T3 cells and mouse embryo fibroblasts (MEFs). The immunofluorescent signals were located on the surface of mitotic chromosomes prepared by metaphase spread. BAF53 was also found in the mitotic chromosome fraction of sucrose gradients. Association of BAF53 with mitotic chromosomes would allow its rapid activation on the chromatin upon exit from mitosis.
생쥐의 배우자간 인식과 수란관과 난자의 상호작용을 연구하기 위하여 수정 전후의 난자와 배아에 형광으로 표지된 5가지 렉틴(UEA-1. LCA, PNA RCA-1, GSL-1)을 처리하여 투명대, 위낭강 원형질 막에서 렉틴의 결합양상을 관찰하였다. 미수정난자 및 수정란의 투명 대에는 UIA-1을 제외한 4가지 렉틴이 결합하였다. PNA RCA-1, GSL-1은 투명대의 의총보다 내층에 강하게 결합되었고 UEA-1과 LCA는 투명대의 전층에서 미약하지만 고르게 결합하였다 배란된 난자의 위난강은 LCA와 PNA에 의해 결합되었으며 UEA-1은 수정 이후부터 GSL-1은 2-세포기 이후부터 위난강에 결합하였다. 난구세포를 제거하고 체외성숙을 일으킨 난자의 위난강에는 5가지 렉틴 모두 결합하지 않았다. 난자와 배아의 원형질막은 PNA. RCA-1, GSL-1에 의해 결합되었고, LCA 및 UEA기은 수정 이후부터 원형질막에 결합하였다. 이상의 결과에서 glucosamine, N-acetylgalactoamine 관기를 함유한 물질이 난구세포에서 생성되어 위난강에 축적되며 배란 후부터 난자의 위난강내 탄수화물관기는 수란관내액의 영향을 받는 것으로 사료된다. 난자 투명대의 탄수화물관기는 내층에 밀집되어 분포하는데 이는 정자의 투명대 관입 조절과 관련된 것으로 사료된다. 수정 후 난자의 원형질막 표면에 fucose와 mannose 등의 탄수화물 잔기가 새로이 노출되며 초기배아 발생동안 위난강에 존재하는 구조물의 렉틴 결합 특성이 유지되었다.
The tremendous changes of uterine endometrium are observed during early pregnancy and protease and their inhibitors are involved in regulation of cell proliferation and remodeling of the tissues through remodeling the extracellular matrix (ECM). Some of the proteases and protease inhibitors have been suspected to a factor in endometrial changes but many parts of their expression profiles and the physiological roles are not uncovered. To evaluate the functional roles of them, in this study the expression profiles of proteases and protease inhibitors were analyzed using real-time quantitative PCR analysis. Mmp9 (matrix metalloproteinase 9) mRNA levels peaked on day 4 at the time of implantation. On the other hand, Ela2 (neutrophil elastase, NE) mRNA levels were peaked on day 2 of pregnancy. Its expression were decreased until day 4 of pregnancy but increased rapidly until day 7 of pregnancy and decreased again. NE inhibitor Slpi (secretory leukocyte protease inhibitor, SLPI) mRNA levels were related with the implantation stage and with the levels of Ela2. At the time of implantation the expression levels of Slpi mRNA were about 5 times higher than the Ela2 mRNA in the uterus. In the implantation stage embryos, Mmp9 specific mRNA was only detected at the blastocyst. On the other hand, the expression level of SLPI was higher than that of the Ela2 mRNA at blastocyst and 4.5 day p.c. embryos. Based on these results it is suggested that MMP9, SLPI, and NE have important physiological role in embryo implantation both in uterus and embryos.
Kim, Bo-Hyun;Kim, Chang-Hong;Jung, Kyu-Young;Jeon, Byung-Hun;Ju, Eun-Jin;Choo, Young-Kug
Archives of Pharmacal Research
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제27권1호
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pp.86-93
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2004
Nitric oxide (NO) has emerged as an important intracellular and intercellular messenger, controlling many physiological processes and participating in the fertilization process via the autocrine and paracrine mechanisms. This study investigated whether nitric oxide synthase (NOS) inhibitior (L-NAME) and L-arginine could regulate in vitro fertilization and early embryonic development in mice. Mouse epididymal spermatozoa, oocytes, and embryos were incubated in mediums of variable conditions with and without L-NAME or L-arginine (0.5, 1, 5 and 10mM). Fertilization rate and early embryonic development were significantly inhibited by treating sperms or oocytes with L-NAME (93.8% vs 66.3%,92.1% vs 60.3%), but not with L-arginine. In contrast, fertilization rate and early embryonic development were conspicuously reduced when L-NAME or L-arginine was added to the culture media for embryos. Early embryonic development was inhibited by microinjection of L-NAME into the fertilized embryosin a dose-dependent manner, but only by high concentrations of L-arginine. These results suggest that a moderate amount of NO production is essential for fertilization and early embryo development in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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