This study was carried out to evaluate the suitability of microsatellite markers for varietal identification and genetic relationship of 170 commercial pepper cultivars. The relationship between marker genotypes and 11 pepper cultivars with different morphological traits was also analyzed. Of the 302 pairs of microsatellite primers screened against 11 pepper cultivars, 24 pairs were highly polymorphic in terms of number of alleles. These markers were applied for the construction of DNA profile data base for 170 commercial pepper cultivars. A total of 164 polymorphic amplified fragments were obtained from 24 microsatellite primers. The average polymorphism information content was 0.673 ranging from 0.324 to 0.824. One hundred and sixty four microsatellite alleles were used to calculate Jaccard's distance coefficients using unweighted pair group method. A clustering group of varieties, based on the results of microsatellite analysis, were categorized into 3 major groups corresponding to morphological traits. The phenogram discriminated all varieties by markers genotypes. These microsatellite markers will be useful as a tool for protection of plant breeders' intellectual property rights through variety identification in distinctness, uniformity and stability test.
This study was carried out to construct a DNA profile database for 102 watermelon cultivars through the comparison of polymorphism level and genetic relatedness using genomic microsatellite (gMS) and expressed sequence tag (EST)-microsatellite (eMS) markers. Sixteen gMS and 10 eMS primers showed hyper-variability and were able to represent the genetic variation within 102 watermelon cultivars. With gMS markers, an average of 3.63 alleles per marker were detected with a polymorphism information content (PIC) value of 0.479, whereas with eMS markers, the average number of alleles per marker was 2.50 and the PIC value was 0.425, indicating that eMS detects a lower polymorphism level compared to gMS. Cluster analysis and Jaccard's genetic distance coefficients using the unweighted pair group method with arithmetic average (UPGMA) based on the gMS, eMS, and combined data sets showed that 102 commercial watermelon cultivars could be categorized into 6 to 8 major groups corresponding to phenotypic traits. Moreover, this method was sufficient to identify 78 out of 102 cultivars. Correlation analysis with Mantel tests for those clusters using 3 data sets showed high correlation ($r{\geq}0.80$). Therefore, the microsatellite markers used in this study may serve as a useful tool for germplasm evaluation, genetic purity assessment, and fingerprinting of watermelon cultivars.
Rock bream (Oplegnathus fasciatus) is a highly valued aquaculture species in Korea. However, the aquaculture industry suffers huge economic losses due to rock bream iridovirus (RBIV) infection in summer. The objective of this study was to determine genetic diversity and relationships of DNAs isolated from two groups of rock bream after RBIV infection using five microsatellite (MS) markers. The first group of fish died early and the second group of fish died later after RBIV infection. In this experiment, 90 fish (5.1±1.0 cm and 4.1±1.3 g) were injected with 50 μl of RBIV (104 TCID50/ml) and maintained at 26℃ for 15 days. Genomic DNAs were extracted from fins of 20 fish that died earlier or later after RBIV infection. These DNAs were subjected to genotyping using five MS markers (CA-03, CA3-05, CA3-06, CA-10, and CA3-36). Of these markers, CA3-05 (early death group), CA3-06 (late death group), and CA3-36 (both early and late death groups) showed different alleles distribution rates. In-depth studies are needed to provide valuable information for selecting RBIV-resistant fish. In conclusion, microsatellite marker distribution pattern differences between early- and late- death groups of rock bream after RBIV infection showing different RBIV susceptibilities were determined using MS markers and genotyping. Results of this study suggest that MS markers could be used to facilitate the selection of RBIV resistant rock bream.
The Korean native black goat (Capra hircus coreanae) is the goat species to be officially registered in Korea under the Food and Agriculture Organization. The object of this study is to establish a set of microsatellite (MS) markers for the individual identification and parentage verification of goats. In this study, we analyzed alleles of MS markers in crosses between Korean native black goats and crossbred goats (n=304 animals), and, based on the diversity of alleles for each marker, we selected 11 MS markers for individual identification and parentage verification. Using these 11 MS markers, the probabilities of different individuals with the same genotype being found within random and half-sib mating populations were 5.58×10-10 and 1.15×10-7, respectively. The parentage verification accuracy was 0.999996 when information about the parents was available and 0.999833 with no information. Thus, even given the total rearing population of 576,150 animals in South Korea, we concluded that these markers could be used for the individual identification and parentage verification of goats. Moreover, by analyzing the genetic relationships between the four lines of Korean native black goats and the crossbred goats, we verified the genetic characteristics of Korean native black goats, confirming their conservation value as a unique genetic resource.
Kim, Joonki;Jo, Beom Ho;Lee, Kyoung Lyong;Yoon, Eui-Soo;Ryu, Gi Hyung;Chung, Ki Wha
Molecules and Cells
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v.24
no.1
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pp.60-68
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2007
Microsatellites, also called simple sequence repeats (SSR), are very useful molecular genetic markers commonly used in crop breeding, species identification and linkage analysis. In the present study, we constructed a microsatellite-enriched genomic library of Panax ginseng, and identified 251 novel microsatellite sequences. Tri-nt repeat units were the most abundant (46.6%), followed by di-nt repeats (35.5%). The $(AG)_n$ motif was most common (23.1%), followed by the $(AAC)_n$ motif (22.3%). From the genotyping of 94 microsatellites using marker-specific primer sets, we identified 11 intraspecific polymorphic markers as well as 14 possible interspecific polymorphic markers differing between P. ginseng and P. quinquefolius. The exact allele structures of the polymorphic markers were determined and the alleles were named. This study represents the first report of the bulk isolation of microsatellites by screening a microsatellite-enriched genomic library in P. ginseng. The microsatellite markers could be useful for linkage analysis, genetic breeding and authentication of Panax species.
Journal of the Korean Data and Information Science Society
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v.18
no.1
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pp.175-184
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2007
LOD scores and a permutation test for detecting and locating quantitative trait loci (QTL) from the Hanwoo economic trait have been described and we selected a considerable major BMS1167 locus for further analysis. K-means clustering analysis, for the major DNA marker mining of BMS1167 microsatellite loci in Hanwoo chromosome17, has been tried and three cluster groups divide four traits. The three cluster groups are classified according to eight DNA marker bps. Finally, we employed the bootstrap test method to calculate confidence intervals using the resampling method to find major DNA markers. We conclude that the major marker of BMS1167 locus in Hanwoo chromosome17 is only DNA marker 100bp.
The choice of molecular markers is the first step when selecting experimental plans in the field of population genetics. The popular molecular markers in population genetic studies are mainly allozyme, RAPD, RFLP, AFLP, microsatellite, SNP and ISSR. Among these, microsatellites are frequently found in nuclear, chloroplast and mitochondrial genome, showing a high level of polymorphism and nuclear microsatellites are codominant. Thus, it is a favorable molecular marker for population structure analyses and genetic diversity studies. Microsatellites are composed of tandem repeated 1~6 base pair nucleotide motifs and can be easily amplified by PCR reactions using locus specific primers. Because microsatellites have low cross-species transferability, however, they are only applicable between phylogenetically close species. In wild plants, the lack of genomic information and the high development cost of the microsatellite obstruct the wider use of microsatellites in plant population genetics research. In this review, we introduce the basis for microsatellite markers, the development process, and analytical methods as well as evolutionary models and their applications. In addition, possible genotyping errors which lead to erroneous conclusions are discussed.
The chicken major histocompatibility complex (MHC) is known to be associated with disease resistance and susceptibility to several pathogens. The microsatellite marker LEI0258 is physically located between the BG and BF of MHC region and variations near this marker have been well documented. In this report, the LEI0258 marker was used to find specific alleles for the Korean native chicken. The MHC haplotype was analyzed by PCR screening and sequencing of LEI0258 region in four different breeds including black Korean native chicken, brown Korean native chicken, Cornish and Rhode island red. The serologically same MHC haplotypes showed the differences in repeat numbers, a few indels or single nucleotide polymorphisms by sequencing analysis. Even though we could not identify specific alleles for Korean native chickens, the genotypes analyzed in these breeds can give valuable information for the relationships with disease resistance and establishment of breeding strategies for the Korean native chicken.
Microsatellites, which are sequences of repetitive short nucleotides, are abundant in the genome and have relatively many alleles at a locus. Hence, microsatellite markers are used in various research areas such as medicine, agriculture, and biology. Thanks to recent advanced techniques and databases associated with microsatellite marker development, foreign research relying on microsatellite markers is increasing in various study areas. In this study, by analyzing microsatellites-related articles published during 2000-2014 from eight Korean national journals representing zoology, botany, genetics, ecology and environmental science, breeding science, and forest science ('Animal Cells and Systems', 'Journal of Plant Biology', 'Genes and Genomics', 'Korean Society of Environment and Ecology', 'Korean Journal of Breeding Science', 'Journal of Agricultural Science, Chungnam National University', 'Journal of Korean Forest Society' and 'Forest Science and Technology'), we found that the number of articles and diversity of study subjects and objects have increased considerably. However, there are fewer applications of microsatellites in the national forest science area. During 2000-2014 in 'Journal of Korean Forest Society', the percentage of articles dealing with microsatellite markers was found to be the lowest with 4.2% among articles focusing on PCR-based markers including RAPD, AFLP, and ISSR. However, in 'Canadian Journal of Forest Research' and 'Forest Ecology and Management', microsatellite marker articles were represented at their highest with 69.2% and 76.2%, respectively. Given the advantages of microsatellite markers, the publication of research papers using microsatellites should be increased in Korean forest science journals to the level of studies published in prominent international journals.
To estimate the genetic characteristics and cumulative power of discrimination (CPD) existing among Hanwoo (Korean cattle) and exotic foreign population (Angus, Herford, Charolais, Holstein) we used a total of 414 genomic DNAs from five breeds population (Hanwoo, Angus, Hereford, Charolais, Holstein). Genetic characteristics indices including mean allele number among loci, unbiased heterozygosity ($h_i$) within locus and polymorphic information content (PIC) and unbiased average heterozygosity (H) among loci in four breeds were calculated using the generated allele frequencies by each marker. The mean allele numbers for all loci ranged between 5 and 7 while heterozygosity (H) ranged from 0.75 (HW) to 0.64 (HF) among loci and across breeds heterozygosity (H) was 0.69. The generated unbiased average heterozygosity among loci in each breed was integrated to the global formula of CPD resulting in 99.71 % within the populations. The genetic variation of HW (Hanwoo) showed highest estimates among the analyzed breeds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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