The genome-wide program of gene expression during the cell division cycle response to serum free media in chinese hamster ovary(CHO) cells was characterized using cDNA microarrays. Many transcripts of genes showed variation during the cell cycle. Characterization is critical step toward understanding the basic cell cycle processes and serum-free media role in CHO cells
From the culture supernatant of the psychrotrophic strain of Bacillus amyloliquefaciens an extracellular serine protease was purified to apparent homogeneity by successive purification steps using QAE-Sephadex, SP-Sephadex and Sephacryl S-100 column chromatography. The pretense is monomeric, with a relative molecular mass of 23,000. It is inhibited by the serine protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride, but not by EDTA. The enzyme is most active at pH 9-10 and at $45^{\circ}C$, although it is unstable at $60^{\circ}C$.
The extent of biological diversity being revealed by molecular techniques accentuates the need to develop methods to isolate and culture the large numbers of microorganisms that remain to be studied. The discovery and characterization of novel microorganisms will provide information useful in understanding microbial ecosystems and have the potential to lead to new products for the biotechnology industry. In this review, the use of innovative techniques and exploration of unusual ecosystems, that have begun to address the challenge of isolating the "uncultured" members of the microbial population, are examined.
Choi, S.M.;Supeno, D.;A., Okka;Chung, S.W.;Kim, H.S.;Kim, J.S.;Park, J.M.;Kwon, S.H.;Kwon, S.K.;Choi, Won Sik
한국산업융합학회 논문집
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제17권3호
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pp.170-177
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2014
This study was conducted to know the behavior of pH behavior in the tomato juices to find out an effective medium for microbial cultivation. Bacterial culture media is a material consist a mixture of nutrients used to grow microorganisms on or in it. In addition, microbial culture media can also be used for isolation, propagation, testing the nature physiological, and calculation of the number of microorganisms. Fresh tomato juice is used for basic ingredient, therein added salt, sugar and EM (Effective Microbial). The fermented solution placed in a room with a temperature of 40oC. Data retrieval before the pH value reached a constant value is done every 12 hours, after constant rate data collection was done every 24 hours. The pH value has been steady after 372 hours of fermentation process (15.5 days). From the results obtained that the amount of additional ingredient which added into tomato juice does not affect final pH value of solution. Thereby the most effective treatment for microbial cultivation media is treatment number four.
L-asparaginase (ASNase) is a therapeutic enzyme used to treat acute lymphoblastic leukemia. Currently, the most widely used ASNases are originated from bacteria. However, owing to the adverse effects of bacterial ASNases, new resources for ASNase production should be explored. Fungal enzymes are considered efficient and compatible resources of natural products for diverse applications. In particular, fungal species belonging to the genus Trichoderma are well-known producers of several commercial enzymes including cellulase, chitinase, and xylanase. However, enzyme production by marine-derived Trichoderma spp. remains to be elucidated. While screening for extracellular ASNase-producing fungi from marine environments, we found four strains showing extracellular ASNase activity. Based on the morphological and phylogenetic analyses using sequences of translation elongation factor 1-alpha (tef1α), the Trichoderma isolates were identified as T. afroharzianum, T. asperellem, T. citrinoviride, and Trichoderma sp. 1. All four strains showed different ASNase activities depending on the carbon sources. T. asperellem MABIK FU00000795 showed the highest ASNase value with lactose as a carbon source. Based on our findings, we propose that marine-derived Trichoderma spp. are potential candidates for novel ASNase production.
Kim, Kyungmi;Lee, Heeyoung;Lee, Soomin;Kim, Sejeong;Lee, Jeeyeon;Ha, Jimyeong;Yoon, Yohan
한국축산식품학회지
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제37권4호
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pp.579-592
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2017
This study assessed the quantitative microbial risk of non-enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC). For hazard identification, hazards of non-EHEC E. coli in natural and processed cheeses were identified by research papers. Regarding exposure assessment, non-EHEC E. coli cell counts in cheese were enumerated, and the developed predictive models were used to describe the fates of non-EHEC E. coli strains in cheese during distribution and storage. In addition, data on the amounts and frequency of cheese consumption were collected from the research report of the Ministry of Food and Drug Safety. For hazard characterization, a doseresponse model for non-EHEC E. coli was used. Using the collected data, simulation models were constructed, using software @RISK to calculate the risk of illness per person per day. Non-EHEC E. coli cells in natural- (n=90) and processed-cheese samples (n=308) from factories and markets were not detected. Thus, we estimated the initial levels of contamination by Uniform distribution ${\times}$ Beta distribution, and the levels were -2.35 and -2.73 Log CFU/g for natural and processed cheese, respectively. The proposed predictive models described properly the fates of non-EHEC E. coli during distribution and storage of cheese. For hazard characterization, we used the Beta-Poisson model (${\alpha}=2.21{\times}10^{-1}$, $N_{50}=6.85{\times}10^7$). The results of risk characterization for non-EHEC E. coli in natural and processed cheese were $1.36{\times}10^{-7}$ and $2.12{\times}10^{-10}$ (the mean probability of illness per person per day), respectively. These results indicate that the risk of non-EHEC E. coli foodborne illness can be considered low in present conditions.
Rumen microbiology research has undergone several evolutionary steps: the isolation and nutritional characterization of readily cultivated microbes; followed by the cloning and sequence analysis of individual genes relevant to key digestive processes; through to the use of small subunit ribosomal RNA (SSU rRNA) sequences for a cultivation-independent examination of microbial diversity. Our knowledge of rumen microbiology has expanded as a result, but the translation of this information into productive alterations of ruminal function has been rather limited. For instance, the cloning and characterization of cellulase genes in Escherichia coli has yielded some valuable information about this complex enzyme system in ruminal bacteria. SSU rRNA analyses have also confirmed that a considerable amount of the microbial diversity in the rumen is not represented in existing culture collections. However, we still have little idea of whether the key, and potentially rate-limiting, gene products and (or) microbial interactions have been identified. Technologies allowing high throughput nucleotide and protein sequence analysis have led to the emergence of two new fields of investigation, genomics and proteomics. Both disciplines can be further subdivided into functional and comparative lines of investigation. The massive accumulation of microbial DNA and protein sequence data, including complete genome sequences, is revolutionizing the way we examine microbial physiology and diversity. We describe here some examples of our use of genomics- and proteomics-based methods, to analyze the cellulase system of Ruminococcus flavefaciens FD-1 and explore the genome of Ruminococcus albus 8. At Illinois, we are using bacterial artificial chromosome (BAC) vectors to create libraries containing large (>75 kbases), contiguous segments of DNA from R. flavefaciens FD-1. Considering that every bacterium is not a candidate for whole genome sequencing, BAC libraries offer an attractive, alternative method to perform physical and functional analyses of a bacterium's genome. Our first plan is to use these BAC clones to determine whether or not cellulases and accessory genes in R. flavefaciens exist in clusters of orthologous genes (COGs). Proteomics is also being used to complement the BAC library/DNA sequencing approach. Proteins differentially expressed in response to carbon source are being identified by 2-D SDS-PAGE, followed by in-gel-digests and peptide mass mapping by MALDI-TOF Mass Spectrometry, as well as peptide sequencing by Edman degradation. At Ohio State, we have used a combination of functional proteomics, mutational analysis and differential display RT-PCR to obtain evidence suggesting that in addition to a cellulosome-like mechanism, R. albus 8 possesses other mechanisms for adhesion to plant surfaces. Genome walking on either side of these differentially expressed transcripts has also resulted in two interesting observations: i) a relatively large number of genes with no matches in the current databases and; ii) the identification of genes with a high level of sequence identity to those identified, until now, in the archaebacteria. Genomics and proteomics will also accelerate our understanding of microbial interactions, and allow a greater degree of in situ analyses in the future. The challenge is to utilize genomics and proteomics to improve our fundamental understanding of microbial physiology, diversity and ecology, and overcome constraints to ruminal function.
The objective of this study was to evaluate the risk of illness from Campylobacter spp. on ham. To identify the hazards of Campylobacter spp. on ham, the general characteristics and microbial criteria for Campylobacter spp., and campylobacteriosis outbreaks were investigated. In the exposure assessment, the prevalence of Campylobacter spp. on ham was evaluated, and the probabilistic distributions for the temperature of ham surfaces in retail markets and home refrigerators were prepared. In addition, the raw data from the Korea National Health and Nutrition Examination Survey (KNHNES) 2012 were used to estimate the consumption amount and frequency of ham. In the hazard characterization, the Beta-Poisson model for Campylobacter spp. infection was used. For risk characterization, a simulation model was developed using the collected data, and the risk of Campylobacter spp. on ham was estimated with @RISK. The Campylobacter spp. cell counts on ham samples were below the detection limit (<0.70 Log CFU/g). The daily consumption of ham was 23.93 g per person, and the consumption frequency was 11.57%. The simulated mean value of the initial contamination level of Campylobacter spp. on ham was −3.95 Log CFU/g, and the mean value of ham for probable risk per person per day was 2.20×10−12. It is considered that the risk of foodborne illness for Campylobacter spp. was low. Furthermore, these results indicate that the microbial risk assessment of Campylobacter spp. in this study should be useful in providing scientific evidence to set up the criteria of Campylobacter spp..
2017년 1월 정읍의 한 농가 저장창고에서 검게 변한 귀리종자가 발견되었다. 조사된 100개의 종자 중 45개 종자에서 Pyrenophora속 균이 검출되었다. 종자에서 얻어진 모든 균주들은 internal transcribed spacer (ITS) 부위와 glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GPDH) 유전자 염기서열을 기초로 Pyrenophora avenae로 동정되었고, 형태적, 배양적 특성에 의해 확인되었다. ITS와 GPDH 염기서열 기반의 계통수를 통해 P. avenae 균주는 유전적으로 뚜렷한 4개의 그룹으로 구분할 수 있었다. 병원성 검정 결과, P. avenae는 귀리의 종자흑변과 잎마름병을 일으키는 병원균으로 확인되었다. 이것은 한국에서 P. avenae가 귀리잎마름병을 일으킨다는 최초 보고이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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