The malolactic fermentation (MLF), which is widely used in winemaking, is the conversion of malic acid to lactic acid conducted by the malolactic enzyme (Mle) of lactic acid bacteria. In order to select the strains with MLF among 54 lactic acid bacteria isolated from the traditionally fermented foods, we designed a primer set that specifically targets the conserved regions of the mle gene and then selected four strains that harbor the mle gene of Lactobacillus plantarum. All strains were identified as L. plantarum by analyzing the 16S rRNA sequences, biochemical properties, and the PCR products of the recA gene. From comparison of the mle gene sequences consisting of 1,644 bp, the nucleotide and amino acid sequence of strain JBE60 correspond to 96.7% and 99.5% with those of other three strains, respectively. The strain JBE60 showed the highest resistant against 10% (v/v) ethanol among the strains. The strains lowered the concentration of malic acid to average 43%. Considering the ethanol resistance and conversion of malic acid, the strain JBE60 is considered as a potential starter for the malolactic fermentation.
To examine the difference in each ingredient between the yeast strain and two raspberry kinds (Rubus crataegifolius Bunge(RCB), Rubus coreanus Miquel(RCM)) in the making of raspberry wine, five active dry yeasts were selected. Regarding the RCM ethanol content, the raspberry wine fermented by Lalvin Wl5 was the highest, while those fermented by Prise de Mousse were the lowest. The pH of the RCM was $3.58\~3.63$, and Montrachet was the highest one of total acidity. In the case of nonflavonoid phenols, the RCM fermented by Montrachet was the highest one, and in the case of flavonoid phenol and total phenol, the RCM fermented by Epernay II was the highest. The content of organic acid in RCM were highest in the following order: citric acid > oxalic acid > malic acid, and tartaric acid was not detected at all. The average content of malic acid in RCM after malolactic fermentation was reduced by almost $65.5\%$, and the RCM fermented by Prise de Mousse, after malolactic fermentation, was $73.3\%$. This latter was the highest, while the RCM fermented by Epernay II was the lowest, at $59.1\%$.
Cho, Gyu-Sung;KrauB, Sabrina;Huch, Melanie;Toit, Maret Du;Franz, Charles M.A.P.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.12
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pp.1280-1286
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2011
A quantitative, real-time PCR method was developed to enumerate Lactobacillus plantarum IWBT B 188 during the malolactic fermentation (MLF) in Grauburgunder wine. The qRT-PCR was strain-specific, as it was based on primers targeting a plasmid DNA sequence, or it was L. plantarum-specific, as it targeted a chromosomally located plantaricin gene sequence. Two 50 l wine fermentations were prepared. One was inoculated with 15 g/hl Saccharomyces cerevisiae, followed by L. plantarum IWBT B 188 at $3.6{\times}10^6$ CFU/ml, whereas the other was not inoculated (control). Viable cell counts were performed for up to 25 days on MRS agar, and the same cells were enumerated by qRT-PCR with both the plasmid or chromosomally encoded gene primers. The L. plantarum strain survived under the harsh conditions in the wine fermentation at levels above $10^5$/ml for approx. 10 days, after which cell numbers decreased to levels of $10^3$ CFU/ml at day 25, and to below the detection limit after day 25. In the control, no lactic acid bacteria could be detected throughout the fermentation, with the exception of two sampling points where ca. $1{\times}10^2$ CFU/ml was detected. The minimum detection level for quantitative PCR in this study was $1{\times}10^2$ to $1{\times}10^3$ CFU/ml. The qRT-PCR results determined generally overestimated the plate count results by about 1 log unit, probably as a result of the presence of DNA from dead cells. Overall, qRT-PCR appeared to be well suited for specifically enumerating Lactobacillus plantarum starter cultures in the MLF in wine.
Lactobacillus plantarum is widely found in fermented foods and has various phenotypic and genetic characteristics to adapt to the environment. Here we report the complete annotated genome sequence of the L. plantarum strain JBE245 (= KCCM43243) isolated for malolactic fermentation of apple juice. The genome comprises a single circular 3,262,611 bp chromosome with 2907 coding regions, 45 pseudogenes, and 91 RNA genes. The genome contains 4 malate dehydrogenase genes, 3 malate permease genes and various types of plantaricin-synthesizing genes. These genetic traits meet the selection criteria of the strains that should prevent the spoilage of apple juice during fermentation and efficiently convert malate to lactic acid.
This study investigated the effect of co-inoculation with Oenococcus oeni on the final quality of domestic MBA(Muscat Baily A) wine. For experiment five types of wine samples were classified for the experiment and the results are as follows; co-inoculation with Oenococcus oeni concurrently (i.e., the S+O.Co sample) reduced wine production time and facilitated the production offor high quality wine. Compared to the other samples, S+O.Co wine had a higher number of viable Oenococcus oeni cells and a rapid reduction in malic acid content although its lactic acid content increased more rapidly. Concurrent inoculation with yeast and Oenococcus oeni allowed malolactic fermentation and alcohol fermentation to be completed at the same time within 14 to 16 days. Therefore, this study showed that co-inoculation of S+O.Co wine with Oenococcus oeni had an effect through quality improvement, reduced wine making time, and increased productivity.
Lopez, Isabel;Santamaria, Pilar;Tenorio, Carmen;Garijo, Patrocinio;Gutierrez, Ana Rosa;Lopez, Rosa
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.9
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pp.1005-1012
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2009
Lysozyme and the reduction of metabisulfite addition to red wine were evaluated during a winemaking process and after malolactic fermentation (MLF). Treatment, with lysozyme, of the must from Tempranillo grapes and at the end of alcoholic fermentation (AF) caused the 100% implantation of the inoculated bacterial strain and shortened the duration of MLF by 7 days. At the end of the MLF, wines treated with lysozyme showed lower volatile acidity, color intensity, and biogenic amine content. The differences in color intensity disappeared during wine stabilization. The lysozyme addition after MLF led to lower histamine concentrations in wines. These phenomena occurred irrespective of the lactic acid bacteria (LAB) proliferation control and of the Oenococcus oeni dominant strain identified at this period. The results of this study show the significance of preventive use of lysozyme in vinification of red wine to maintain low histamine levels and ensure a successful implantation of inoculated O. oeni starters.
This study was performed to investigate the effects of adding a dual starter on the chemical and sensory characteristics of red wine made of Campbell Early grape. The yeast starter, Saccharomyces cerevisiae, and lactic acid bacteria (LAB) starter, Oenococcus oeni, were used for inoculation in the winemaking process for alcoholic fermentation and malolactic fermentation (MLF), respectively. After 200 days of incubation, the chemical compositions of yeast/LAB-added wine (YL-wine) were compared with those of no-starter-added wine (control) and yeast-added wine (Y-wine). The results show that no significant differences were observed in pH, total sugar, and alcohol content among the wine samples, but the malic acid content in YL-wine was significantly reduced, and various esters and higher alcohols were synthesized. The sensory test revealed that the addition of dual starters resulted in improved overall acceptability in wine. This study emphasizes the importance of O. oeni in addition to yeast in making Campbell Early wine.
The grape cultivar Campbell Early has high levels of malic acid as well as tartaric acid. The high concentration of total acid in the Campbell Early wine is a critical aspect of the wine's sensory characteristics. To prevent the deterioration of the wine's quality, which is caused by the strong sour taste derived from the raw material in wine making, the deacidification factor was investigated via carbonic maceration under different temperature conditions, especially in the presence or absence of malolactic bacteria. Based on the results of the presence test of the malolactic bacteria during carbonic-maceration treatment, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum, and Streptococcus thermophilus were characterized morphologically and were identified via biochemical tests and 16S-rRNA-gene-sequencing analysis. The isolated strains were found not to consume malic acid and to produce lactic acid. Moreover, these strains were consumed as soluble solids. The isolated strains are popularly known as lactic-acid bacteria and should have produced lactic acid from glucose. The Oenococcus oeni of the malolactic bacteria was not isolated. These results showed that the isolated strains are not deacidified during carbonic-maceration treatment.
Maloactic fermentation (MLF) occurs after completion of alcoholic fermentation and is mediated by lactic acid bacteria (LAB), mainly Oenococcus oeni. Kiwi wine more than commercial grape wine has the problem of high acidity. Therefore, we investigated the optimal MLF conditions for regulating strong acidity and improving the quality properties of wine fermented with Kiwi fruit cultivated in Korea. For alcohol fermentation, industrial wine yeast Saccharomyces cerevisiae KCCM 12650 strains and LAB, known as MLF strains, were used to alleviate wine acidity. First, the various experimental conditions of Kiwi fruit, initial pH (2.5, 3.5, 4.5), fermenting temperature (20, 25, $30^{\circ}C$), and sugar contents (24 $^{\circ}Brix$), were adjusted, and after the fermentation period, we measured the acidity, pH, and the change in organic acid content by the AOAC method and HPLC analysis. The alcohol content of fermented Kiwi wine was 12.75%. Further, total acidity and pH of Kiwi wine were 0.78% and 3.5, respectively. Total sugar and total polyphenol contents of Kiwi wine were 38.72 mg/ml and 60.18 mg/ml, respectively. With regard to organic acid content, the control contained 0.63 mg/ml of oxalic acid, 2.99 mg/ml of malic acid, and 0.71 mg/ml of lactic acid, whereas MLF wine contained 0.69 mg/ml of oxalic acid, 0.06 mg/ml of malic acid, and 3.12 mg/ml of lactic acid. Kiwi wine had lower malic acid values and total acidity than control after MLF processing. In MLF, the optimum initial pH value and fermentation temperature were 3.5 and $25^{\circ}C$, respectively. Therefore, these studies suggest that establishment of optimal MLF conditions could improve the properties of Kiwi wine manufactured in Korea.
It has been suggested that medium chain fatty acid(MCFA) may be toxic to yeast and bacteria and thus play a role in the inhibition of alcoholic and malolactic fermentations and also important contributors to wine flavour We measured, by the use of GLC, the concentrations of octanoic, decanoic and dodecanoic acids produced by 12 wine yeast strains during the alcoholic fermentation of a grape juice-like medium. In general, there was a high production of MCFA at first, dropping dramatically later. The formation of MCFA is largely dependent on yeast strain but it also depends upon temperature, sugar concentration, stirring and carbon dioxide sparging.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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