박테리오파지는 세균에 특이적으로 감염하는 바이러스로 용해 능력이 있는 박테리오파지는 동물질병을 치료하는 항생제 대체제로 사용할 수 있다. 본 연구는 닭에서 가금티푸스를 유발하는 Salmonella enterica serovar Gallinarum(Salmonella Gallinarum)에 대한 박테리오파지를 분리하고, 그 특성을 구명하고자 하였다. 7개의 닭 도축장 하수 처리장 물로부터 10주의 박테리오파지를 분리하였다. 이중 $SG{\Phi}-YS$ SP로 명명된 파지는 전자현미경 관찰 결과, Myoviridae family로 분류되었다. 분리한 박테리오파지의 숙주 범위를 확인하기 위하여 Salmonella Gallinarum 7주와 Salmonella Enteritidis 5주에 대한 용해 유발능력을 조사한 결과, $SG{\Phi}-YS$ SP는 Salmonella Gallinarum만 용해하는 특징을 보였다. $SG{\Phi}-YS$ SP는 Salmonella Gallinarum에 접종하였을 경우 6시간과 9시간 뒤 각각 2.21 log cfu/mL 및 2.13 log cfu/mL를 감소시키는 것으로 확인되어 닭에서 Salmonella Gallinarum 감염을 예방하거나 치료하는 파지 제제 개발에 이용될 수 있을 것으로 판단되었다.
Lee, Sunhee;Kim, Min Gon;Lee, Hee Soo;Heo, Sunhak;Kwon, Mirae;Kim, GeunBae
한국축산식품학회지
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제37권2호
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pp.320-328
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2017
In this study, two Listeria bacteriophages, LMP1 and LMP7, were isolated from chicken feces as a means of biocontrol of L. monocytogenes. Both bacteriophages had a lytic effect on L. monocytogenes ATCC 7644, 15313, 19114, and 19115. Phages LMP1 and LMP7 were able to inhibit the growth of L. monocytogenes ATCC 7644 and 19114 in tryptic soy broth at $10^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$. Nevertheless, LMP1 was more effective than LMP7 at inhibiting L. monocytogenes ATCC 19114. On the contrary, LMP7 was more effective than LMP1 at inhibiting L. monocytogenes ATCC 7644. The morphology of LMP1 and LMP7 resembled that of members of the Siphoviridae family. The growth of L. monocytogenes ATCC 7644 was inhibited by both LMP1 and LMP7 in milk; however, the growth of L. monocytogenes ATCC 19114 was only inhibited by LMP1 at $30^{\circ}C$. The lytic activity of bacteriophages was also evaluated at $4^{\circ}C$ in milk in order to investigate the potential use of these phages in refrigerated products. In conclusion, these two bacteriophages exhibit different host specificities and characteristics, suggesting that they can be used as a component of a phage cocktail to control L. monocytogenes in the food industry.
세포벽 분해 효소와 단백질 분해 효소를 이용하여 스피루리나 추출물을 효율적으로 생산할 수 있는 방법을 조사하였다. 세포벽 분해 효소인 Tunicase의 사용 농도는 2%가 적당하였다. 고형분 회수율과 핵산 관련 성분의 함량을 나타내는 spiruina extraction(SE) index를 기준으로 상업용 단백질 분해 효소를 선별하였다. 일곱 종류의 효소를 조사한 결과, Esperase가 가장 우수하였으며, 최적 사용량은 2%이었다. Tunicase와 Esperase를 순차전으로 반응시키거나 동시에 반응시켜도 고형분 회수율과 SE index는 매우 유사하였으며 동시에 사용하는 것이 반응 시간을 단축시킬 수 있었다. 두 효소를 동시에 반응시키면 단순 열수 추출보다 고형분 회수율은 약 45%$(45.2%{\rightarrow}65.3%)$, SE index는 약 75%$(11.4{\rightarrow}20.0)$ 증가하였다.
In order to investigate a relationship of the structure-antifungal and hemolytic activities between cecropin A(1-8)-magainin 2(1-12) and cecropin A(1-8)-melittin(1-12) hybrid peptides, several analogues with amino acid substitution at positions 10 (Ile) and 16 (Ser) were designed and synthesized. The increase of the hydrophobicity by substituting with Leu, Phe, and Trp at position 16 in cecropin A(1-8)-magainin 2(1-12) did not have a significant effect on antifungal activity but caused a remarkable increase in hemolytic activity. These results indicate that the hydrophobic property at position 16 of cecropin A(1-8)-magainin 2(1-12) is more correlated to hemolytic activity than to antifungal activity. Replacement with Pro at position 10 of cecropin A(1-8)- magainin 2(1-12) and cecropin A(1-8)-melittin (1-12) caused a remarkable decrease in a-helical contents in the 50% TFE solution and induced a reduction in lytic activity against Aspergillus flavus, and Aspergillus fumigatus. These results demonstrate that flexibility at the central hinge region is essential for lytic activity against fungal cells and $\alpha$-helicity of the peptides.
작물의 생육촉진 및 식물 진균병의 생물방제능을 동시에 나타내는 다기능성 미생물제제를 개발하고자 토양으로부터 분리하여 보관중인 세균 120종의 활성을 검토하였다. 그 중 siderophore를 생성하고 항진균 활성을 보이는 BS11-1, BS11-2, BS11-3를 선발하였다. 이들 균주는 cellulase, protease 같은 lytic enzyme을 생산하였으며 식물성장 촉진 호르몬중의 하나인 IAA를 생성하였다. 이들 선발균들에 의한 식물 생장 촉진을 조사한 결과, BS11-1, BS11-2, BS11-3 균 배양액 관주 시 고추 유묘의 생육을 132%, 122%, 120% 증가 시켰으며, BS11-1, BS11-2 균주의 경우 뿌리의 신장 및 생육이 촉진되었음을 확인 할 수 있었다.
몇 년동안 게껍질이 풍부하게 있었던 밭토양에서 강한 키틴분해능력을 가진 Trichoderma 곰팡이를 분리하였다. 분리된 곰팡이의 5.8S rRNA, partial 18S, 28S rRNA genes, ITS1, ITS2 sequence 분석과 형태학적 특징을 살펴본 결과 Trichoderma asperellum으로 동정되었고, 이를 Trichoderma asperellum T-5 (TaT-5)로 명명하였다. 이 곰팡이는 chitianse와 ${\beta}$-1,3-glucanase같은 lytic enzyme을 분비하며, 키틴배지 상에서 6가지의 항 곰팡이성 물질을 생산했다. R. solani가 원인인 오이의 모잘록병에 대해 TaT 5의 방제효과를 보기 위해서 TaT-5 배양액(TA), chitin medium(CM), 증류수(DW)를 씨를 심은 후 10일 째에 각 pot에 관주했다. 그리고 관주 1주일 후에 R. solani의 균사를 갈아서 각 pot에 주었다. 실험기간 동안에 오이의 지상부와 지하부 생체중은 다른 처리구에 비하여 TA 처리구가 더 많이 증가하였다. 오이 잎에서 PR-protein (chitianse, ${\beta}$-1,3-glucanase) 활성은 R. solani 감염 후 CM과 DW에서 증가를 보였고, TA 처리구에서는 증가하다가 감소하는 경향을 보였다. 뿌리에서는 모든 처리구가 감소하는 경향을 보였지만 TA 처리구가 CM과 DW 처리구보다 감소하는 정도가 적었다. 오이의 잎과 뿌리에서 lignification related enzyme(POD, PPO, PAL)활성은 R. solani 감염 초기에는 증가하다가 점점 감소하는 경향을 보였다. 이러한 결과들은 TaT-5에 의하여 생산된 lytic enzymes와 항 곰팡이성 물질들이 오이에 R. solani의 공격을 줄여준다고 생각된다.
Phenylacetic acid (PAA) was evaluated for in vitro anti-oomycete activity and in vivo control efficacy against Phytophthora capsici. Microscopic observation revealed that the high level of anti-oomycete activity of PAA (10 $\mu\textrm{g}$/ml) against P. capsici is mainly due to the lytic effect on zoospores. Zoospore lysis began in the presence of 5 u$\mu\textrm{g}$/ml of PAA and most of the zoospores were collapsed at 10 $\mu\textrm{g}$/ml. PAA showed inhibitory activity against the zoospore germination and hyphal growth of P. capsici at the concentration of 50 $\mu\textrm{g}$/ml. In the glasshouse, the protective effect of PAA against Phytophthora blight was high on pepper plants when treated just before inoculation with P. capsici. In the artificially infested field, protection of pepper plants against the Phyto-phthora epidemic was achieved at a considerable level by PAA treatment.
라이소자임-덱스트란 hybrids는 상대 습도 80%와 $60^{\circ}C$에서 16일간 유지시켜 만들었다. 라이소자임-덱스트란 hybrids의 유화성은 라이소자임보다 약 14배 정도, 시판유화제보다는 약3배 정도 높았다. 그 hybrids의 효소 활성도는 기질로 Micrococcus lysodeiticus 세포벽을 사용한 결과 라이소자임의 약 83% 정도였다. 그 hybrids의 뛰어난 유화성은 pH 3에서도 유지되었고 pH 10에서는 더욱 개선되었다. $100^{\circ}C$로 가열 처리함으로써 유화성은 크게 향상되었다. 또한 라이소자임-덱스트란 hybrids 이 그람음성세균에 대하여 항균효과를 나타냈다. 이 결과들은 라이소자임-덱스트란 hybrids가 식품에서 보존료와 유화제로 사용될 수 있다고 사료된다.
Lysobacter capsici YS215의 특성 및 뿌리혹선충 방제에 미치는 영향을 조사하였다. YS1215의 생육은 배양 6일째 최고였으며, 생육에 따른 chitinase와 gelatinase의 활성은 각각 3일째와 5일째에 가장 높은 활성을 보였다. YS1215 배양액이 선충 피해 방제와 식물 생장에 미치는 영향을 조사해 본 결과, 5주째 식물 지상부 생체중 및 건조중에서 배양액 반량구에서 가장 높게 나타났지만, 9주째에는 미생물 배양액, 미생물 배양액 반량구 및 배지액 처리구에서 차이를 보이지 않았다. 하지만 9주째 미생물 배양액, 미생물 배양액 반량구 및 배지액 처리구가 물처리구 보다 높게 나타났다. 지상부 길이에서는 미생물 배양액 반량구 처리구가 가장 높았다. 선충 피해 방제에 있어서 난낭수, 뿌리혹수 및 토양내 유충수에서 각각 농약 처리구에서 가장 낮게 나타났으나, 미생물 배양액 처리구와의 유의적 차이는 보이지 않았다. 미생물 배양액 처리구는 미생물 배양액 반량구 및 물 처리구와는 유의적 차이가 있는 것으로 조사되었다. 그러므로 다양한 분해효소를 생성하는 L. capsici YS1215의 뿌리혹선충방제에 대한 충분한 가능성과 가치가 있다고 사료된다.
아가리쿠스(Agaricus blazei)버섯의 균사체 배양조건을 최적화하여 유효성분인 $\beta$-glucan의 생성을 극대화시키고자 하였다. 아가리쿠스 균사체 배양시 탄소원과 질소원의 농도 및 종류별 배지를 검토한 결과 배지조성은 glucose 5% (w/v), yeast extract 0.5% (w/v), malt extract 0.5% (w/v), $KH_2PO_4$ 0.1% (w/v), $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.05% (w/v)가 최적이었다. 30L 발효조에서의 배양 조건은 pH 5.0, $28^{\circ}C$, 1 vvm, 300 rpm에서 균사체의 생육과 $\beta$-glucan의 생성이 가장 효과적이었다. 위 조건 중에서 세포 외 $\beta$-glucan의 생성을 증가시 키기 위해 초기 glucose의 첨가량을 4%로 낮추어 glucose에 의한 균사체 성장 저해작용을 최소화하는 한편, 배양 70시간 시점에 glucose 3%, yeast extract 0.1%, malt extract 0.1%의 추가 배지를 첨가하여 배양함으로써 batch 배양에 의한 2.8 g/L에 비해 2배 정도 증가한 5.2 g/L의 세포 외 $\beta$-glucan을 얻을 수 있었다. 또한 균사체 내의 세포벽 $\beta$-glucan을 효과적으로 추출하기 위해 세포벽분해효소인 lytic enzyme과 단백분해효소인 bromelain의 연속적인 효소반응으로 추출량이 3.5 g/L로 증가하여 균사체의 단순 열수추출에 비해 약 4배의 추출 수율이 향상되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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