For the gonadal sex management of younger longtooth grouper (Epinephelus bruneus), this work investigated the timing and histological process of ovary differentiation and oocyte development of longtooth grouper larvae and juvenile. Specimens (from 1 to 365 DAH) were collected for gonadal histological study from June 2008 to August 2009. Rearing water temperature was ranged from 20 to $24^{\circ}C$. The primordial germ cells could be observed from 10 to 15 DAH, while undifferentiated gonad occurs from 20 to 50 DAH in longtooth grouper. The initial ovarian phase was 60 to 110 DAH with the formation of ovarian cavity and the increased in size of gonad. The ovarian phase started at 140 DAH with appearance of oogonia. The gonad at 365 DAH appeared to have full of oogonia and primary growth stage oocyte. Formation of ovarian cavity indicates that the ovarian differentiation beginning at 60 DAH in longtooth grouper. The gonads in longtooth grouper differentiated directly into ovaries in all fish examined.
자바리와 대왕자바리 2종을 대상으로 MS-222 농도 및 수온에 따른 마취효과 실험을 수행하였다. 농도는 100, 150, 200 그리고 250 ppm을, 수온은 18, 22, 26 그리고 30℃에서 마취 및 회복시간을 조사하였다. MS-222 농도와 수온이 높아질수록 마취시간이 짧아지는 경향을 보였으며, 회복시간은 농도와는 비례하지만 수온과는 반비례하는 경향을 보였다. 회복시간은 22℃ 이하에서는 큰 차이가 없었다. 자바리의 최적 마취조건은 회복시간이 가장 짧은 30℃와 100 ppm, 대왕자바리의 경우 30℃ 150 ppm이 회복시간이 100 ppm과 유의적으로 차이가 없으면서 마취시간은 유의하게 짧아 가장 적합했다. 이원배치분산분석 결과 자바리와 대왕자바리의 종 간 유의한 차이가 있었으나, 종과 농도 그리고 종, 농도, 수온에 대한 상호작용 효과는 없었다.
We investigated the effects of fadrozol, an aromatase inhibitor (AI), and $17{\alpha}$-methyltestosterone (MT) on the induction of sex change in juvenile longtooth grouper $Epinephelus$$bruneus$, via histological observation of gonads. Changes in the mRNA expression of GtH subunits (FSH-${\beta}$ and LH-${\beta}$) in the pituitary, and estradiol-$17{\beta}$ (E2) and 11-ketotestosterone (11-KT) levels in the blood were also surveyed after AI and MT treatment. Juvenile longtooth groupers ($113{\pm}17g\;body\;weight$; $16.2{\pm}1.2cm\;body\;length$) received intramuscular injections of AI at 3 (3-AI) and 5 (5-AI) mg/kg BWdoses and MT at a 5 mg/kg BW (5-MT) dose. At week 7 post-injection, 3-AI and 5-MT oocytes were degenerated, and gonads of the 5-AI group initiated spermatogenesis. At week 21 post-injection, 3-AI- and 5-MT-treated gonads contained spermatogonia and spermatocytes, while 5-AI treatment induced advanced stages of spermatogenesis. The serum E2 level showed no significant differences throughout the experimental period, whereas that of 11-KT was significantly elevated in the 5-AI group at weeks 7 and 21 post-injection. A significant increase in the expression of FSH-${\beta}$ mRNA was evident in the 5-AI group at week 21 post-injection. In contrast, LH-${\beta}$ mRNA expression did not significantly differ among groups during the experimental period. These results imply that sex change has two stages in the longtooth grouper. In the first stage, oocytes are degenerated by the stimulation by 11-KT, and in the second stage spermatogenesis occurs, owing to the co-effects of 11-KT and FSH-${\beta}$.
To understand the sex reversal characteristics in the longtooth grouper (Epinephelus bruneus), this study examined the sex reversal and artificial masculinization of wild caught E. bruneus reared in indoor rearing tank after a 17${\alpha}$-methyltestosterone injection. To domesticate a broodstock, 64 wild caught E. bruneus, between 47.0 to 110.0 cm in total length and from 1.5 to 21.4 kg in body weight, were reared in indoor rearing tank (4.0 to 5.0 m wide, and 2.5 to 3.0 m depth) for four years. Seven specimens showed sex reversal from female to male during indoor rearing condition, whose total length and body weights were from 63.0 to 99.0 cm and from 4.4 to 13.2 kg, respectively. After inducing artificial masculinization in 14 female E. bruneus with a 17${\alpha}$-methyltestosterone (2.0 mg/kg BW) implants for 3 years, spermiation occurred in 9 specimens (total length: 54.0 to 68.0 cm, body weight: 2.3 to 4.3 kg). Among the female to male sex reversals, two specimens returned back to being female, whose body weights were 2.8 kg (initially 2.6 kg) and 2.7 kg (initially 2.3 kg). Therefore, this study suggested that E. bruneus (> 3.0 kg) was more effective in masculinizing by 17${\alpha}$-methyltestosterone implants.
We examined the effects of 17${\alpha}$-methyltestosterone (MT) on growth and induced sex change in the longtooth grouper Epinephelus bruneus. The growth rate for body weight (GRW) and specific growth rate (SGR) of the group injected with MT over 8 weeks were significantly higher than those of the sham-injected control group, the group injected over 4 weeks, and the control group. Of the orally administrated groups, the GRWs of the control group and the group given 1 kg of feed with 2.0 mg of MT were highest and did not significantly differ from one another. For SGR, the treatment groups differed significantly, and the SGR of the control group was higher than those of the other groups (P<0.05). The condition factor (CF) of the group injected over 4 weeks was higher than those injected over 8 weeks, the sham-injected control group over 8 weeks, and the control group. The CF did not significantly differ between the sham-injected control group over 8 weeks and the injected group over 8 weeks, but these two groups differed from the control group (P<0.05). The CFs of the groups given 1 kg of feed with 0.5, 1.0, and 2.0 mg of MT were significantly higher than that of the control group (P<0.05). The feed efficiency ratio was not significantly affected by MT administration. Most of the experimental groups receiving MT developed many unidentified germ cell cysts and perinucleolus oocytes, although neither spermazoa cells nor sex-changed males were observed in any of the treatments.
Puberty is the developmental period which animals obtain the ability of reproducing sexually for the first time in life. In commercially important aquaculture fish species, the onset of puberty is a matter of major interest due to controlling of sexual maturation to improve broodstock management. To investigate pubertal characteristics of female longtooth grouper (Epinephelus bruneus), specimens were classified into three groups by the bodyweight, including 1, 2, and 3 kg group. Thereafter, we focused on ovarian development and level changes of endocrine regulation factors (GnRH, GTHs, steroid hormone). In the non-breeding season (April), the levels of endocrine regulation factors showed increasing trends in accordance with bodyweight gaining; nevertheless, the oocytes were growth phase belongs to almost peri-nucleous stages in all groups. In the breeding season (June), the levels of endocrine regulation factors were fluctuated that decreases in levels of sbGnRH and $FSH{\beta}$ mRNA expressions along with serum $E_2$ concentrations in 3 kg of group. However, $LH{\beta}$ mRNA expression levels sustained increasing trends by the bodyweight. Moreover, the oocytes developed that 2 kg and 3 kg groups obtained plentiful vitellogenic oocytes while 1 kg group was still composed with greater part of pre-vitellogenic oocytes. Especially, the oocytes of 3 kg group reached over 450 ${\mu}m$ of diameters that indicating possibility to enter the final maturations. These results suggest that the progress of pubertal development in female E. bruneus could be classify into three phases via bodyweight, including pre-puberty (1 kg), early-puberty (2 kg) and puberty (3 kg).
The nutrient composition of the muscle of the hybrid grouper (Epinephelus fuscoguttatus×E. lanceolatus, HG) and the hybrid longtooth grouper (E. moara×E. lanceolatus, HLG) was measured as a function of body weight in this study. The crude protein and lipid levels in HG were 21.0-21.2 g/100 g and 1.9-3.4 g/100 g, respectively. HLG contained 20.6-20.7 g/100 g protein, and 3.9-5.5 g/100 g crude lipid. The total amino acid contents of HG were 18,829.7-18,980.2 mg/100 g and that of HLG was 17,793.7-19,293.7 mg/100 g. The mean saturated fatty acid content was 0.61-1.09 g/100 g for HG and 1.27-1.77 g/100 g for HLG. Monounsaturated and polyunsaturated fatty acid levels were 0.59-1.02 g/100 g (Monoene), 0.67-1.11 g/100 g (Polyene) in HG, which were lower than the 1.21-1.78 (Monoene), 1.22-1.69 g/100 g (Polyene) found in HLG. The highest mineral content (K and P) of HG was 510.13-517.05 mg/100g and 231.59-247.67 mg/100 g, while that of HLG was 518.81-523.59 mg/100 g and 257.51-248.84 mg/100 g, respectively. In conclusion, there is potential for expanding the commercial utilization of HG and HLG as food resources as they are both nutrient-rich.
The physiological response of the longtooth grouper, Epinephelus bruneus to low water temperature (LWT) stress while on three different concentrations of dietary vitamin E (1 mg/diet g, 5 mg/diet g, and 10 mg /diet g) were investigated. Plasma cortisol, glucose, and aspartate aminotransferase (AST) levels were higher in the control and sham control compared with the vitamin E supplemented groups. The most addition with vitamin E in the diet (10 mg/diet g) showed the lowest levels of cortisol, glucose, and AST. However, plasma alanine aminotransferase (ALT) showed no significant differences across all experimental conditions (P>0.05). Also the more disposing vitamin E into feeding the better resistance against stress on the LWT was shown through cortisol, glucose, ALT, and AST.
This study examines the effects on fertilization rate (FR), hatching rate (HR), and normal individual rate after artificial fertilization using frozen thawed sperm according to the cryoprotectant (DMSO) concentration and the period of cryopreserved sperm of longtooth grouper, Epinephelus bruneus. Performing artificial fertilization using frozen-thawed sperm, after freezing the sperm at different DMSO concentration of 5.0%, 7.5%, 10.0% respectively, FR were (DMSO 5.0%: $99.5{\pm}0.8%$, DMSO 7.5%: $99.5{\pm}0.7%$, and DMSO 10.0%: $99.6{\pm}0.6%$). The results are not significantly different from the control fresh sperm (100%). HR also (DMSO 5.0%: $96.2{\pm}2.3%$, DMSO 7.5%: $95.3{\pm}3.6%$, 10.0%: $96.6{\pm}1.8%$) were not significantly different in each group. The normal individual rate after hatching using with control fresh sperm ($98.4%{\pm}0.5$) and DMSO concentration level of 5.0% ($97.8{\pm}0.1%$) were not significantly different. However, with 7.5% ($97.2{\pm}0.6%$) and 10.0% DMSO concentrations ($95.9{\pm}0.2%$) are lower than the normal individual rate after hatching observed in the control and 5.0% DMSO. Performing artificial fertilization using frozen-thawed sperm at different frozen period (2 days, 2 years, and 3 years), 10% DMSO FR and HR of 3 years (FR; $66.8{\pm}1.8%$, HR: $82.0{\pm}12.9%$) and 2 years (FR; $78.5{\pm}14.8%$, HR: $79.3{\pm}0.6%$) cryopreserved sperm were lower than control (FR; 100%, HR: $91.1{\pm}3.6%$) and 2 days cryopreserved sperm (FR; $99.6{\pm}0.6%$, HR: $96.6{\pm}1.8%$). These results suggest suitable DMSO concentration ranges of cryopreservation sperm for E. bruneus is 5 to 10% and with 2 to 3 years cryopreservation period, cryopreservation sperm can be useful for seed production.
이 연구는 실내 사육수조에서 자연산란 후 수정된 난을 대상으로 수온에 따른 난 발생속도와 부화율을 조사하였다. 부화에 이르기까지 각 수온조건에서 소요된 시간은 $15^{\circ}C$에서 상실기 이후 발생이 진행되지 않았고, 18, 21, 24, $27^{\circ}C$에서 각각 70시간 30분, 44시간 10분, 29시간 10분 그리고 24시간 30분이 소요되었다. 부화율은 $15^{\circ}C$에서 0%였고, 18, 21, 24 그리고 $27^{\circ}C$에서 각각 $8.3{\pm}1.2%$, $18.0{\pm}6.2%$, $24.0{\pm}4.0%$ 그리고 $17.0{\pm}7.2%$로 뚜렷한 차이 없이 $24^{\circ}C$에서 다소 높았고 21와 $27^{\circ}C$에서 비슷한 경향이었으며 $18^{\circ}C$에서 가장 낮게 나타났다. 이러한 결과에서 자바리의 난발생 수온범위는 $18{\sim}27^{\circ}C$로 제안된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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