• BMB Reports
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• 제32권1호
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• pp.67-71
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• 1999

We have investigated the effect of cholestasis on the closely related acyl-CoA:amino acid N-acyltransferase, benzoyltransferase, and phenylacetyltransferase activities in rat liver. Benzoyltransferase and phenylacetyltransferase activities in the liver cytosol, mitochondria, and microsome were investigated for a period of 42 d after common bile duct ligation. Both the mitochondrial and microsomal benzoyltransferases showed significant increase in their activities between the 1st and 7th day after common bile duct ligation, although the cytosolic benzoyltransferase activity did not show a significant change compared to the activities from the sham-operated control. The cytosolic phenylacetyltransferase activity showed a significant increase between the 1st and 2nd day, the mitochondrial activity showed a significant increase between the 2nd and 7th day, and microsomal activity showed a significant increase between the 1st and 7th day, respectively. Enzyme kinetic parameters of hepatic benzoyltransferase were analyzed using benzoyl coenzyme A as a substrate with the preparations from the 1st day post-ligation. Enzyme parameters of hepatic phenylacetyltransferase were also analyzed using phenylacetyl coenzyme A as a substrate with the preparations from the 2nd day post-ligation. The results indicated that although the $K_m$ values of these enzymes were about the same as the sham-operated control, the $V_{max}$ values of both enzymes increased significantly. These results, therefore, suggest that the biosynthesis of benzoyltransferase and phenylacetyltransferase has been induced in response to cholestasis.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제6권3호
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• pp.247-255
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• 1998

Carbon tetrachloride (CCI$_4$) induces the hepatotoxicity due to the reactive free radicals generated by cytochrome P-450 (CYP-450) enzyme, which result in destabilization of cellular membrane. Diltiazem, a calcium channel blocking agent, has been known to suppress the CYP-450 enzyme activities. To study the effect of diltiazem in $CCl_4$-treated rats, we measured the activities of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and glutathione S-transferase (GST), contents of bilirubin, albumin, total protein, cholesterol, triglyceride, blood urea nitrogen, creatinine malondialdehyde and calcium. Also we conducted liver histopathologic examinations. Diltiazem, when administered 1 hour prior to CCI$_4$ treaeent, significantly reduced the activities of ALT and AST, the contents of microsomal malondialdehyde and calcium in liver and microsome as compared with those of $CCl_4$-treated rats. In addition, histopathologic examination showed that diltiazem prevented the development of centrilobular necrosis induced by CCI$_4$ in liver tissue. Our results suggested that diltiazem could inhibit the formation of free radicals and the influx of calcium. Therefore diltiazem may be applied to suppress the liver damage caused by $CCl_4$.

• 분석과학
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• 제5권1호
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• pp.83-90
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• 1992

$^{14}C$-warfarin을 흰쥐에 경구투여 후 4시간 경과시 혈액에서 최고치를 나타내었으며, coumarin과 그 유도체인 warfarin에 의한 간조직 microsome 내의 Cyt. p-450은 이들 화합물에 의해 microsomal electron transport system이 증가됨과 Cyt. p-450의 isozyme들이 유도됨을 확인할 수 있었다.

• 생명과학회지
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• 제14권5호
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• pp.863-867
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• 2004

식물성 성분 중에서 생리활성 인자를 탐색할 목적으로 솔잎의 수용성 추출물에 의한 항산화 활성을 DPPH법, thiocyanate법, TBA법 및 microsome 생 체 막 지 질 과산화물 생성정도를 TBARS법으로 측정 하고, 총 폴리페놀 함량을 측정하였다. 솔잎 수용성 추출물의 총 폴리페놀 화합물 함량은 1.61%이었으며, DPPH 측정법에서는 짙은 자색의 탈색되는 정도로 나타내는 전자 공여능이 솔잎 수용성 추출물의 0.1% 농도에서 BHT와 비슷한 수준으로 항산화 활성이 높게 나타났다. 간 microsome을 이용한 생체막 지질 과산화 억제정도는 솔잎 수용성 추출물의 0.1% (67.7%)>0.05% (63.1%)>0.01%(28.2%) 순으로 농도에 비례하여 증가하였다. Linoleic acid 산화 실험계를 이용한 thiocyanate법에서는 0.01%, 0.05%, 0.1%의 농도에서 모두 반응 7일째까지 대조구에 비해 매우 강한 항산화 활성을 보였으며, TBA법에서는 반응 6일째까지 는 0.1%>0.05%>0.01%의 순으로 농도 증가에 따라 항산화 활성도 높게 나타났다. 이상의 결과에서 솔잎 수용성 추출물 중에는 in vitro 항산화 실험에서 항산화 활성을 나타내는 생리활성 성분이 존재하는 것으로 볼 수 있으므로 천연 항산화제로서의 가능성을 시사하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제38권2호
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• pp.168-173
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• 1995

Endosulfan이 흰쥐(Balb/c.) 체내의 cytochrome P-450 효소계에 미치는 영향을 조사하기 위해 endosulfan을 7.5 mg/kg 수준으로 복강주사하였다. Endosulfan을 복강주사 처리하여 48시간 후 적출한 흰쥐의 간에서는 cytochrome P-450 함량이 $3.3{\sim}4.2$배, cytochrome $b_5$ 함량이 $2.3{\sim}3.8$배, NADPH cytochrome P-450 reductase 활성이 $5.3{\sim}6.4$배 그리고 총 haem 함량이 $3.1{\sim}3.6$배씩 대조구의 그것들에 비해 증가하였다. Endosulfan은 대조구 흰쥐 간의 cytochrome P-450 효소계와 상호작용하여 파장 387와 389 nm에서 흡광도의 증가를 보였으며 파장 407 nm에서 넓은 흡수대를 형성하였다. 환원형 P-450-CO spectrum은 대조구의 경우 파장 451 nm에서 흡광도의 극대를 보인 반면 endosulfan으로 처리된 흰쥐 간의 그것은 파장 449와 450 nm에서 흡광도의 극대를 보였다. Endosulfan 처리로 흰쥐 간과 신장의 aldrin epoxidase 활성이 각각 2.8배와 2.1배씩 증가하였으며 7-ethoxyresorufin dealkylase 활성은 각각 1.7배와 1.8배씩 증가하였다.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제15권1_2호
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• pp.7-12
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• 2000

Scavenging effects on paraquat induced toxicity were investigated by using methanol (MeOH) and ethylacetate (EtoAC) extracts of Lonicera japonica. The results are summerized as follows: 1. To Fe(III)-ADP-NADPH induced microsomal lipid peroixdation, MeOH and EtoAC extracts showed antioxidative activiies and inhibition ratio at 100 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 44.4% and 73.8% respectively 2. To microsomal NADPH dependent cytochrome p -450 reductase in rat liver, MeOH and EtoAC extracts inhibited the enzyme activiies and inhibition ratio were 26.3% and 44.8% respectively. 3. Administration (30 mg/kg, iv) of paraquat to rats caused the marked elevation of GOT, GPT, LDH, ALP in the serum and lipid peroxides in the microsome as compared to the control group. Serum GTP, LDH, ALP and liver microsomal LPO were reduced significantaly by administration of MeOH extract. (1,000 mg/kg), EtoAC extract (40 mg/kg) and Silymarin (150 mg/kg) as compared to the paraquat group. From the results, MeOH and EtoAc exuacts. of Lonicera japonica showed the useful scavenger and reducer on the paraquat induced hepatotoxicty.

• 대한한방내과학회지
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• 제22권3호
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• pp.309-320
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• 2001

Objectives : This study was done to investigate the protective effects of Samgiinjin-tang on liver injury of rats induced by CCI4 and d-galactosamine. Methods: All animals were divided into .5 groups, those were normal group(untreated), control group(treated with 0.9% Saline solution), sample I group(2,250mg/kg administrated), sample II group(4,500mg/kg administrated), Silymarin 200mg/kg administrated group. Liver injury of rats were induced by CCI4 and d-galactosamine, and then the serum transaminases(ALT&AST) alkaline phosphatase(ALP), lactic dehydrogenase(LDH) for enzyme activities, liver weight, lipid peroxidation and catalase, glutathione S-transferase(GST) for enzyme activities were measured. Results : The inhibitory effects on the serum ALT, AST activities in liver injury of rats induced by CCI4 were noted in both sample I and sample II group. The inhibitory effects on the serum ALP, LDH activities and the Lipid peroxidation of Mitochondria & Cytosol were noted in only sample II group. The decreased effects on the GST activities of Homogenate & Cytosol were inhibited in both sample I and sample II groups. The decreased effects on the GST activities of Mitochondria & Microsome were inhibited in sample II group. The inhibitory effects of the serum ALT, AST, LDH activities in liver injury of rats induced by d-galactosamine were noted in both sample I and sample II groups. In serum AST activities, sample II group. Conclusions : Samgiinjin-tang has protective effects against liver injury of rats induced by CCI4 and d-galactosamine. So it is required to study about the actions of mutual relation of medicines and patho-mechanism by experiment.

• 생명과학회지
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• 제14권3호
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• pp.514-520
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• 2004

유산균 발효유, 버섯(표고, 영지, 느타리) 추출물 및 이를 함유한 유산균 발효유가 SD계 암컷 흰쥐의 각 조직 과산화지질 농도 및 DPPH 전자공여능에 미치는 항산화 효과를 검토하였다. 표고, 영지, 느타리버섯 추출물의 Folin-Denis 법에 의한 총 폴리페놀 화합물 농도는 각각 0.34, 0.20, 0.34%로 나타났다. 유산균 발효유, 버섯 추출물, 버섯 추출물 함유 유산균 발효유 및 이들 시료의 standard로서 사용된 BHT의 DPPH법에 의한 전자공여능은 각각 33.9, 34.9, 51.9 및 95.6%로 나타났다. 실험 식이군은 정상군, 콜레스테롤군, 콜레스테롤 + 유산균 발효유군, 콜레스테롤 + 버섯 추출물군 및 콜레스테롤+버섯 추출물 함유 유산균 발효 유군으로 구성하였다. 간 조직 및 microsome 획분과 과산화지질 농도는 콜레스테롤+유산균 발효유군 및 콜레스레롤+버섯 추출물 함유 유산균 발효유군이 다른 실험군 보다 유의적으로 감소하였다. 신장 조직의 과산화지질 농도는 정상군에 비해 콜레스테롤군에서 현저히 증가하였고, 이러한 콜레스테롤 식이에 의한 증가는 유산균 발효유 및 버섯 추출물 함유 유산균 발효유 첨가로 인해 유의적으로 감소하였다. 한편, 심장 및 비장 조직, 이들의 microsome 및 mitochondria 획분의 과산화지질 농도는 각 실험군간에 유의한 차이가 없었다. 본 실험의 결과, 버섯 추출물 함유 유산균 발효유 식이는 흰쥐 간장 및 신장 조직의 과산화지질 생성을 감소시키는 작용이 있는 것으로 밝혀졌다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제27권2호
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• pp.100-106
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• 1984

신생 쥐 간의 subcellular fraction의 특징과 $6{\alpha}$-steroid hydroxylase의 subcellular localization및 특성을 살펴본 결과는 다음과 같다. 1000g 30초 침전 fraction은 총 DNA의 95%를 차지하므로써 crude nuclei fraction으로 나타났으며 또한 5'-nucleotidase의 specific activity가 높은 것은 파괴되지 않은 세포에 기인된 것으로 생각이 되며, 1450g 10분 침전 fraction은 5'-nucleotidase의 activity가 가장 높으므로 crude plasma membrane fraction으로 동정하였으나 mitochondria가 같이 침전되어 있었으며, 9000g 20분 침전 fraction은 succinate-cytochrome C reductase의 activity가 가장 높아 mitochondria fraction으로 하였고, 105,000g 60분 상등액은 LDH가 가장 높아 cytosol로 하였으며, 105,000g 60분 침전은 남은 부분으로 microsome fraction으로 추정하였다. 각 fraction에 기질인 $3{\beta}$-hydroxy-$5{\alpha}$-pregnan-20-one을 incubation시킨 후의 생성된 steroid를 보면 crude nuclei fraction에서는 pregnadiol($5{\alpha}$-pregnane-$3{\alpha}/{\beta}$, $20{\alpha}$-diol)의 형성으로 $20{\alpha}$-reduction과 $3{\alpha}$-$3{\beta}$ iso${\beta}$merization을 볼 수 있었으며 crude plasma membrane fraction에서는 $20{\alpha}$-reduction과 $6{\alpha}$-hydroxylation을 볼 수 있었으며 crude mitochondria와 cytosol에서는 $20{\alpha}$-reduction만을 crude microsome에서는 $16{\alpha}$-hydroxylation을 볼 수 있었으므로 $6{\alpha}$-hydroxylase는 crude plasma membrane에 존재함을 확인하였다. 한편 $6{\alpha}$-steroid hydroxylase에 존재함을 확인하였다. 한편 $6{\alpha}$-steroid hydroxylase의 최대 활성도는 pH 7에서 나타났으며 progesterone은 hydroxylation을 시키지 못한 반면 $3{\alpha}$-hydroxy-$5{\alpha}$-pregnan-20-one은 $6{\alpha}$-hydroxylation이 되었다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제25권6호
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• pp.492-500
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• 1992

본 연구에서는 비타민 A 과량 섭취가 비타민 K 기능에 미치는 영향을 알아보기 위하여 carboxylase의 기질인 쥐의 간내 microsome 단백질과 첨가된 펩티드의 vitamin K-dependent carboxylation rate를 측정하였다. In vitro 실험에서는 정상 vit.A 섭취군의 간 microsome을 vit.A 로 incubation했을때 간 내 prothrombin 선구 물질이나 첨가된 peptide기질의 carboxylation rate는 영향을 받지 않았다. 이와 비슷한 양상으로서 무비타민 K 식이와 함께 비타민 A를 정상수준 혹은 과잉 수준으로 섭취한 쥐를 비교한 경우에는 동일군 간에는 carboxylation rate에 유의한 차이를 나타내지 않았다. 그러나 비타민 A 과잉군의 간내 단백질의 carboxylation rate는 대조군에 비하여 증가하는 경향이었다, 비타민 A 과잉군은 비타민 A로 incubate한 경우나 하지 않은 경우 모두 대조군에 비하여 약 2~3 배 의 carboxylase 활성을 보였다. In vivo study 에서는 첨가된 peptide에 대한 carboxylase활성은 비타민 A 광일 섭취에 의하여 영향을 받지 않았다. 그러나 간 내 단백질의 carboxylation rate는 비타민 A과잉군이 대조군에 비하여 2~3 배나 더 높았다. Carboxylase 활성은 대조군이나 비타민 A과잉군 모두 연구기간이 진행될수록 더 증가하였다. 그리고 간 내 단백질의 carboxylation에 대한 비타민 A 과잉 효과는 실험 식이를 시작한 후 일주일 정도에서 나타나기 시작하였다. 그러므로 이 연구 결과는 비타민 A 과잉 시에는 과잉증이 빠른 시일내에 일어나며, 비타민 A 과잉은 비타민 K 결핍의 지표인 prothrombin 의 선구물질을 증가시킨다는 것을 시사한다.