Young-Hyun You;Han Jung Sung;Manh Ha Nguyen;Jong Myong Park;Ji Won Hong;Won-Jae Chi;Kim Bomi;Dae Ho Kim
The Korean Journal of Mycology
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v.51
no.3
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pp.251-257
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2023
We isolated fungi from the rhizosphere of Fallopia sachalinensis in Dokdo islands. Morphological and molecular characters, based on the internal transcribed spacer (ITS), and partial large subunit (LSU) or partial beta-tubulin genes, were used to identify the isolated fungi. The results revealed the fungi isolated from the Fallopia rhizosphere to be Penicillium striatisporum and Gongronella sichuanensis. Given that these species have never previously been recorded in Korea, we have described the morphological and molecular characteristics of these fungi in this study.
Jang, Won Hee;Jeong, Young Joo;Choi, Sun Hee;Lee, Won Hee;Kim, Mooseong;Kim, Sang-Jin;Urm, Sang-Hwa;Moon, Il Soo;Seog, Dae-Hyun
Journal of Life Science
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v.25
no.5
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pp.594-600
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2015
Protein-protein interactions have a critical role in the regulation of many cellular functions. Postsynaptic density-95/disks large/zonula occludens-1 (PDZ) domain is one of domains that mediate protein-protein interactions. PDZ domains typically bind to the specific motif at the carboxyl (C)-terminal end of partner proteins. Multi-PDZ domain protein 1 (MUPP1), which has 13 PDZ domains, serves a scaffolding function for structure proteins and signaling proteins, but the cellular function of MUPP1 has not been fully elucidated. We used the yeast two-hybrid system to identify proteins that interact with PDZ domains of MUPP1. We found an interaction between MUPP1 and muskelin. Muskelin was recently identified as a GABAA receptor (GABAAR) α1 subunit binding protein and known to have a role in receptor endocytosis and degradation. Muskelin bound to the 3rd PDZ domain, but not to other PDZ domains of MUPP1. The C-terminal end of muskelin was essential for the interaction with MUPP1 in the yeast two-hybrid assay. When co-expressed in HEK-293T cells, muskelin but not the C-terminal deleted muskelin was co-immunoprecipitated with MUPP1. In addition, MUPP1 co-localized with muskelin at the same subcellular region in cells. These findings collectively suggest that MUPP1 or its interacting proteins could modulate GABAAR trafficking and turnover through the interaction with muskelin.
An intensive interaction between yeasts and insects has highlighted their relevance for attraction to food and for the insect's development and behavior. Yeast associated in the gut of insects secretes cellulase which aided in the food digestion (cellulose degradation). Three strains of cellulose-degrading yeast were isolated from the gut of adult grasshoppers collected in Gyeonggi Province, South Korea. The strains $ON22^T$, $G10^T$, and $G15^T$, showed positive cellulolytic activity in the carboxymethyl cellulose (CMC)-plate assay. The phylogenetic tree based on sequence analysis of D1/D2 domains of the large subunit rRNA gene and the internal transcribed spacer (ITS) regions revealed that the strains $ON22^T$ (100 and 98.4% sequence similarities in D1/D2 domains and ITS) and $G10^T$ (99.8 and 99.5% in D1/D2 domain and ITS region) were most closely related to the species Moesziomyces aphidis JCM $10318^T$; $G15^T$ (100% in D1/D2 domains and ITS) belongs to the species Moesziomyces antarcticus JCM $10317^T$, respectively. Morphology and biochemical test results are provided in the species description. Cellulase with its massive applicability has been used in various industrial processes such as biofuels like bioethanol productions. Therefore, this is the first report of the cellulolytic yeast strains $ON22^T$, $G10^T$, and $G15^T$ related to the genus Moesziomyces in the family Ustilaginaceae (Ustilaginales), in Korea.
Kim, Ju-Young;Jang, Jun Hwee;Park, Ji-Hyun;Jung, Hee-Young;Park, Jong-Seok;Cho, Sung-Jin;Lee, Hoon Bok;Limtong, Savitree;Subramani, Gayathri;Sung, Gi-Ho;Kim, Myung Kyum
Korean Journal of Microbiology
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v.54
no.4
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pp.362-368
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2018
Grasshoppers play vital role in the digestion of photosynthetically fixed carbons. With the aid of intestinal microflora, the grasshopper can degrade leaves constituents such as cellulose and hemicellulose. The purpose of this study was to examine cellulolytic yeast isolates from the gut of grasshoppers collected in Gyeonggi Province, South Korea. Among the yeast isolates, ON2, ON17 (two strains), and ON6 (one strain) showed positive cellulolytic activity in the CMC-plate assay. The sequence analyses of D1/D2 domains of the large subunit rDNA gene and the internal transcribed spacer (ITS) regions revealed that the strains ON2 and ON17 were most closely related to Papiliotrema aspenensis CBS $13867^T$ (100%, sequence similarity in D1/D2 domains; 99.4% sequence similarity in ITS) and strain ON6 related to Saitozyma flava (100% in D1/D2 domains; 99.0% in ITS). All these three yeast strains are capable of degrading cellulose; therefore, the members of endosymbiotic yeasts may produce their own enzymes for carbohydrate degradation and convert mobilized sugar monomers to volatile fatty acids. Thus, the endosymbiotic yeast strains ON2, ON17 (represents the genus Papilioterma) and ON6 (Saitozyma) belonging to the family Tremellomycetes, are unreported strains in Korea.
Rumen microbiology research has undergone several evolutionary steps: the isolation and nutritional characterization of readily cultivated microbes; followed by the cloning and sequence analysis of individual genes relevant to key digestive processes; through to the use of small subunit ribosomal RNA (SSU rRNA) sequences for a cultivation-independent examination of microbial diversity. Our knowledge of rumen microbiology has expanded as a result, but the translation of this information into productive alterations of ruminal function has been rather limited. For instance, the cloning and characterization of cellulase genes in Escherichia coli has yielded some valuable information about this complex enzyme system in ruminal bacteria. SSU rRNA analyses have also confirmed that a considerable amount of the microbial diversity in the rumen is not represented in existing culture collections. However, we still have little idea of whether the key, and potentially rate-limiting, gene products and (or) microbial interactions have been identified. Technologies allowing high throughput nucleotide and protein sequence analysis have led to the emergence of two new fields of investigation, genomics and proteomics. Both disciplines can be further subdivided into functional and comparative lines of investigation. The massive accumulation of microbial DNA and protein sequence data, including complete genome sequences, is revolutionizing the way we examine microbial physiology and diversity. We describe here some examples of our use of genomics- and proteomics-based methods, to analyze the cellulase system of Ruminococcus flavefaciens FD-1 and explore the genome of Ruminococcus albus 8. At Illinois, we are using bacterial artificial chromosome (BAC) vectors to create libraries containing large (>75 kbases), contiguous segments of DNA from R. flavefaciens FD-1. Considering that every bacterium is not a candidate for whole genome sequencing, BAC libraries offer an attractive, alternative method to perform physical and functional analyses of a bacterium's genome. Our first plan is to use these BAC clones to determine whether or not cellulases and accessory genes in R. flavefaciens exist in clusters of orthologous genes (COGs). Proteomics is also being used to complement the BAC library/DNA sequencing approach. Proteins differentially expressed in response to carbon source are being identified by 2-D SDS-PAGE, followed by in-gel-digests and peptide mass mapping by MALDI-TOF Mass Spectrometry, as well as peptide sequencing by Edman degradation. At Ohio State, we have used a combination of functional proteomics, mutational analysis and differential display RT-PCR to obtain evidence suggesting that in addition to a cellulosome-like mechanism, R. albus 8 possesses other mechanisms for adhesion to plant surfaces. Genome walking on either side of these differentially expressed transcripts has also resulted in two interesting observations: i) a relatively large number of genes with no matches in the current databases and; ii) the identification of genes with a high level of sequence identity to those identified, until now, in the archaebacteria. Genomics and proteomics will also accelerate our understanding of microbial interactions, and allow a greater degree of in situ analyses in the future. The challenge is to utilize genomics and proteomics to improve our fundamental understanding of microbial physiology, diversity and ecology, and overcome constraints to ruminal function.
It has been known that the silk degumming treated by hot alkali solution is easy to handle but is liable to yield poor-quality silk due to the degree of degumming loss, incomplete-degumming or over-degumming. Therefore, many studies have been carried out on the silk degumming by enzyme in order to improve the quality of silk. However, no attention has been paid to the physicochemical analysis of enzymatic degummed silk. In this paper, two different degumming methods, soap and enzymatic, are compared in aqueous solution state of silk fibroin. The results can be summarized as follows: There was no significant difference between two solutions on the bases of polarizing microscopy, TEM observation and SDS-PAGE. Spherulite of silk fibroin was not observed in polarizing microscopy, however the leaf-shape fibril structure was developed upon solidification. The size of spherulites of silk fibroin in TEM observation were 30~120nm with a wide range of size distribution. The intrinsic viscosity of enzymatic degummed fibroin solution was lower than that of soap degummed solution. This can be explained that the silk fibroin was more degraded by enzymatic degumming method compared with the soap degumming method. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis showed that the fibroin molecule was composed of large component of molecule weight above 50 kd and small component of molecule weight about 20 kd. There was no difference in crystallinity between two degumming methods on the bases of results of DSC thermograms and IR spectra.
China has a long history of sheep (Ovis aries [O. aries]) breeding and an abundance of sheep genetic resources. Knowledge of the complete O. aries mitogenome should facilitate the study of the evolutionary history of the species. Therefore, the complete mitogenome of O. aries was sequenced and annotated. In order to characterize the mitogenomes of 3 Chinese sheep breeds (Altay sheep [AL], Shandong large-tailed sheep [SD], and small-tailed Hulun Buir sheep [sHL]), 19 sets of primers were employed to amplify contiguous, overlapping segments of the complete mitochondrial DNA (mtDNA) sequence of each breed. The sizes of the complete mitochondrial genomes of the sHL, AL, and SD breeds were 16,617 bp, 16,613 bp, and 16,613 bp, respectively. The mitochondrial genomes were deposited in the GenBank database with accession numbers KP702285 (AL sheep), KP981378 (SD sheep), and KP981380 (sHL sheep) respectively. The organization of the 3 analyzed sheep mitochondrial genomes was similar, with each consisting of 22 tRNA genes, 2 rRNA genes (12S rRNA and 16S rRNA), 13 protein-coding genes, and 1 control region (D-loop). The NADH dehydrogenase subunit 6 (ND6) and 8 tRNA genes were encoded on the light strand, whereas the rest of the mitochondrial genes were encoded on the heavy strand. The nucleotide skewness of the coding strands of the 3 analyzed mitogenomes was biased toward A and T. We constructed a phylogenetic tree using the complete mitogenomes of each type of sheep to allow us to understand the genetic relationships between Chinese breeds of O. aries and those developed and utilized in other countries. Our findings provide important information regarding the O. aries mitogenome and the evolutionary history of O. aries inside and outside China. In addition, our results provide a foundation for further exploration of the taxonomic status of O. aries.
The porcine PRKAG3 (RN) gene encodes the regulatory gamma subunit of adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK), which is a good candidate gene affecting meat quality. In this study, the effects of two missense mutations A595G (Ile199Val) and G154A (Gly52Ser) in porcine PRKAG3 gene on meat quality traits were studied in M. Longissimus dorsi (LD), M. Semispinalis capitis (SC) and M. Biceps femoris (BF) from different populations of 326 pigs. The PRKAG3 alleles 199I, 199IV, 52S and 52G were identified with PCR-RFLPs and all genotypes - 199I/199I, 199I/199V, 199V/199V, 52S/52S, 52S/52G and 52G/52G - were found. The frequency of V allele was larger than that of I allele in all populations. I allele frequency was zero in Chinese Meishan pigs (population D) especially. G allele frequency was larger than that of S allele in all populations except Large White (population A). Both variations at the PRKAG3 locus significantly affected these meat quality traits. The pork meat quality has not previously been established in Meishan or crosses thereof. The results suggested that generally pH of LD, SC and BF was higher in Meishan pigs than that in other populations. Moreover, Meishan pigs showed higher water-holding capacity and intramuscular fat (IMF), lower water content and water loss percentage compared to other populations in terms of the two variations. The results present here supply new evidence that alleles V199I and G52S at the PRKAG3 locus affect pork meat quality and provide useful information on pork production.
Kim, Myung-Kyum;Jigden, Baigalmaa;Sun, Hua;Noh, Jong-Hun;Kim, Se-Young;Yang, Deok-Chun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.16
no.1
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pp.20-26
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2008
Anemarrhena asphodeloides (Korean name "Ji-Mo") has been used for oriental medicinal purposes in Korea, China and Japan. In this study, 29 A. asphodeloides samples were collected including 3 certified A. asphodeloides plants and many commercially marketed A. asphodeloides products. Chloroplast trnL-F regions of the "Ji-Mo" samples were sequenced and used to identify whether the samples were genuine A. asphodeloides or not. As the result, the trnL-F sequences of all the "Ji-Mo" samples were shown to be identical and it was proven that commercially available medicinal products "Ji-Mo" are genuine A. asphodeloides. Phylogenetic tree of. A. asphodeloides using the trnL-F sequences was constructed and compared with phylogenetic tree using rubisco large subunit (rbcL) gene sequences. In these tree, A. asphodeloides was affiliated in the family Agavaceae in the order Asparagales. It is proven that trnL-F phylogenetic tree is useful to study taxonomic position of A. asphodeloides.
This study was performed to determine the effects of dietary fat sources, i.e., beef tallow, soybean oil, olive oil and coconut oil (each 3% in feed), on the growth performance, meat quality and gene expression in growing-finishing pigs. A total of 72 crossbred pigs (Landrace${\times}$Large White${\times}$Duroc) were used at $71{\pm}1$ kg body weight (about 130 d of age) in 24 pens ($320{\times}150$ cm) in a confined pig house (three pigs per pen) with six replicate pens per treatment. The growing diet was given for periods of $14{\pm}3$ d and the finishing diet was given for periods of $28{\pm}3$ d. The fat type had no significant effect either on growth performance or on chemical composition or on meat quality in growing-finishing pigs. Dietary fat type affected fatty acid composition, with higher levels of unsaturated fatty acids (UFAs) and monounsaturated fatty acids (MUFAs) in the olive oil group. Microarray analysis in the Longissimus dorsi identified 6 genes, related to insulin signaling pathway, that were differentially expressed among the different feed groups. Real time-PCR was conducted on the six genes in the longissimus dorsi muscle (LM). In particular, the genes encoding the protein kinase, cAMP-dependent, regulatory, type II, alpha (PRKAR2A) and the catalytic subunit of protein phosphatase 1, beta isoform (PPP1CB) showed the highest expression level in the olive oil group (respectively, p<0.05, p<0.001). The results of this study indicate that the type of dietary fat affects fatty acid composition and insulin signaling-related gene expression in the LM of pigs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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