Some eels Anguilla japonica, ranging from 16 to 23 g in their weight(average: 20 g), were sampled at the private eel farming company equipped with water recycling system, located at Kimhae city, Kyungnam Province, Korea. Three kinds of vaccine were prepared with Vibrio anguillarum (EPM-8406) isolated at National Fisheries University in Korea for the immune response experiment against eels; those vaccines were made by inactivating the strain with $0.3\%$ formalin for 24 hrs at $25^{\circ}C$, heating for 3 mins or for 15 mins at $121^{\circ}C$, respectively. The various optimal vaccination conditions for the control of vibriosis in the fish were investigated based on the cultivation temperature, vaccination concentration and booster effect. The maximum titer rapidly increased with higher temperature up to $23^{\circ}C$, but there were little differences between $23^{\circ}C\;and\;28^{\circ}C$. The formalin-killed vaccine showed good efficacy at the injection concentration of above $10^8$ cells per fish and little effect at the below $10^7$ cells. The booster effect on the vaccination showed good efficacy above twice-injections with little difference between the numbers of injection.
An, Dong-jun;Kim, Byoung-han;Jung, Byeong-yeal;Yi, Chul-hyun;Jeon, Woo-jin;Lee, Pil-soo;Chung, Gab-soo
Korean Journal of Veterinary Research
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v.45
no.2
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pp.215-221
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2005
Canine coronavirus (CCV) causes a mild gastroenteritis in dogs. The virus is highly contagious. Although the virus was isolated more than thirty years ago, canine coronavirus infection continues to be a widespread problem. Mixed infections with both CCV and canine parvovirus (CPV) are common. Four kinds of commercial killed CCV vaccines are available in Korea. All the commercial vaccines should pass the National Assay for Veterinary Biologicals prior to release. For the potency test of CCV vaccine, it is necessary to use CCV antibody free dogs. The test requires not only kennels but high cost. To develop easy, efficient and economic potency test method for killed CCV vaccine using laboratory animals, a series of experiments with rabbits and guinea pigs were carried out in this study. In the preliminary test, the guinea pigs showed better immune responses than rabbits. The guinea pig was also easy to manage. So guinea pig was selected for the potency test animals. When the guinea pigs were inoculated twice with one dose of vaccine intramuscuarly each, slower and a little lower SN antibody titers were induced in guinea pigs than in dogs (about 2 kg body weight Beagle strain) given the same posology as guinea pigs'. It was concluded that guinea pigs could be substituted for dogs in the potency test of killed CCV vaccine.
In order to examine the efficacy of concurrent vaccination with live and killed Newcastle disease(ND) vaccines two types of each live($B_1$ and LaSota) and killed(gel and oil) vaccines of all commercial origin were administered either alone or simultaneously to day-old broiler chicks having maternal antibody. Live vaccines were given by conjuntival instillation in volumes of 25${\mu}\ell$ containing $10^{6.0}$ to $10^{6.3}$ median embroy infective dose(EH)) while killed vaccines were given in 0.3$m\ell$ volumes subcutaneously at the back of the neck Hemagglutination inhibition(HI) antibodies were determined at weekly intervals until 8 weeks of age and protection rate was determined at 4 and 8 week of age by challenge inoculation with virulent ND virus(NDV). During the 8 weeks experimental period concurrent administration of live and oil vaccine produced the highest level of HI antibody and the most satisfactory protection, whereas concurrent rent vaccination with live and gel vaccine induced poor immune responses. There was no noticeable difference in the efficacy between the live vaccines, Bl and LaSota when simultaneously administered with oil vaccine. Except for oil vaccine, single administration of either live or killed vaccine at day-old produced less than 50% protection at 4 and 8 weeks postvaccination(PV). Oil vaucine alone induced 80% and 70% protection at 4 and 8 week PV, respectively. Concurrent vaccination caused on visible side reaction like respiratory symptoms and did not negatively influence the growth rate of birds until the end of experiment.
Avian influenza (AI) virus (AIV) is distributed worldwide and it has been isolated from various species of wild and domestic birds. AI transfers with high speed and shows diverse pathogenicity syndroms. In Korea, several low Pathogenic AIV, H9N2, have been isolated from the commercial farms with severe decrease of egg production and mortality resulted in severe economic loss since 1996. Therefore, it has been requested to develop AI vaccines to prevent clinical signs and economic losses from the field infection of AIV. To develop a killed vaccine that efficiently prevents low pathogenic AIV (H9N2), evaluation on the pathogenicity and selection of an inactivator for H9N2 is taking place and is being tested safety and immunogenicity of vaccine produced. Based on the pathogenicity test and viral reisolation test, the ADL0401 isolate is the characteristic low pathogenic AIVs and has fairly similar biologic functions compared with MS96 which is the official low pathogenic AIV (H9N2) and one of the predominant AIV isolated from poultry farms in Korea. In antigenicity tests, the ADL0401 and MS96 virus have no significant antigenic difference. In inactivation tests, the ADL0401 isolates can be easily inactivated with $0.1\%$ Formalin at $37^{\circ}C$ within 1 hour with a little decrease of HA titer. The vaccine developed in the present report has no harmful effect on bird and forms good immune capability. Therefore, the isolates, ADL0401 can be used for a killed vaccine which can reduce the clinical signs and viral shedding in the birds infected with H9N2 low pathogenic AIVs.
Bordetella (B.) bronchiseptica is a causative agent of swine atrophic rhinitis that promotes colonization of the mucous membrane of the swine nasal cavity by Pasteurella (P.) multocida. Mixed infection with B. bronchiseptica and P. multocida leads to growth inhibition of pigs, resulting in significant economic loss. There are many commercial vaccines for atrophic rhinitis, including B. bronchiseptica as a killed vaccine antigen (Ag). However, the immunogenicity of killed B. bronchiseptica Ag has not yet been elucidated; therefore, this study was conducted to investigate the immunogenicity of killed B. bronchiseptica Ag and the type of immune response it induces. In vitro assays using mouse spleen cells and flow cytometry revealed that B. bronchiseptica Ag induced high proliferation capability of lymphocytes, especially B lymphocytes, and the proliferating cells showed a significant response to interleukin (IL)-2. B. bronchiseptica Ag also enhanced the production of IL-12, a representative cytokine for cell-mediated immunity. In vivo experiments using mice showed that the injection of B. bronchiseptica Ag markedly induced Ag-specific antibody. Taken together, these results indicate that B. bronchiseptica Ag has high immunogenicity by itself.
This study was performed to verify the stability and efficacy of Streptococcus iniae formalin killed cells on storage at refrigerator temperature in olive flounder, Paralichthys olivaceus. The vaccines preserved for 6, 12 and 15months showed high stability of potency. The antibody titers and protection efficacy to challenge test were significantly higher in booster immunized groups than prime immunized groups during storage. Especially, above 60% of relative percent survival obtained at low antibody revel in prime immunized groups indicates that innate and non-specific immune system might act against the S. iniae challenged.
For the production of ghost bacteria vaccine to prevent the streptococcal disease in aquaculture fish species, a double cassettes vector was constructed and cloned in Escherichia coli DH5${\alpha}$. Ghost bacteria vaccine production from Escherichia coli DH5${\alpha}$/pHCE-InaN-GAPDH-Ghost 37 SDM (SIG) was maximized at a glucose concentration of 1 g/l, agitation of 300 rpm, and aeration of 1 vvm. The maximal efficiency of ghost bacteria formation was obtained at the mid-exponential phase ($OD_{600}=2.0$) with the concentration of 0.77 g/l for SIG. The molecular mass of GAPDH was detected at 67 kDa with the insoluble fraction, by SDS-PAGE and Western blot. The protective efficacy of ghost bacteria vaccine was evaluated by challenge test using olive flounder. The cumulative mortalities of the positive control, formalin-killed cell (FKC) vaccine, and SIG vaccine immunized groups were 91%, 74%, and 57%, respectively. These results suggest that SIG vaccine showed efficacy as a vaccine and had a higher potential to induce protective antibodies than did FKC vaccine.
Pasteurella multocida, a Gram-negative facultative anaerobic bacterium, is a causative animal pathogen in porcine atrophic rhinitis and avian fowl cholera. For the development of recombinant subunit vaccine against P. multocida, we cloned and analyzed the gene for outer membrane protein H (ompH) from a native strain of Pasteurella multocida in Korea. The OmpH had significant similarity in both primary and secondary structure with those of other serotypes. The full-length, and three short fragments of ompH were expressed in E. coli and the recombinant OmpH proteins were purified, respectively. The recombinant OmpH proteins were antigenic and detectable with antisera produced by either immunization of commercial vaccine for respiratory disease or formalin-killed cell. Antibodies raised against the full-length OmpH provided strong protection against P. multocida, however, three short fragments of recombinant OmpHs, respectively, showed slightly lower protection in mice challenge. The recombinant OmpH might be a useful vaccine candidate antigen for P. multocida.
A study was conducted to determine whether the vaccination programs for the control of New castle disease (ND) would affect the immune status of birds against the disease. Twenty-six poultry flocks in the epizootic area of ND were surveyed to investigate the level of urn antibody against ND virus and the programs used for the vaccination of birds. The mortality rates and vaccination status of birds during the epizootic of ND were also examined in the infected poultry flocks to elucidate the immune effect against the epizootic with particular regard to various vaccination programs used in the field. The results obtained are summerized as follows: 1. Of 26 poultry flocks investigated, 22 flocks were immunized with live and killed vaccines, their haemagglutination-inhibition (HI) antibody titer being 146 and 50, respectively. Among 22 farms using live and killed vaccines two flocks which showed the lowest HI titer of 10 and 23 had the disease later on. However, no cases of ND were recorded in the killed vaccine groups, although their HI titers were in the range of 38 to 64. 2. Of 14 infected flecks, one flock was not vaccmated against ND while all the remaining 13 flocks were vaccinated against the disease, of which 8 flocks were vaccinated with live vaccine only and the other 5 flocks with both live and killed vaccines. The mortality rate of 8 infected flocks which had been vaccinated with only live vaccine was as high as 32.5% while that of 5 flocks with both live and killed vaccines was as low as 5.1%. 3. It was found that in majority of flocks B$_1$vaccine was used via drinking water and in a few flocks the vaccine was administered via intramuscular route or method of dipping mouth, nose and eye of birds into vaccine solution.
Starry flounder, which are recently increasingly cultured in Korea, are known to highly vulnerable to Streptococcus parauberis infection. Five groups of starry flounder (n=30 for each group) were vaccinated with S. parauberis formalin-killed whole cells by intraperitoneal injection at a final concentration of 0, 0.01, 0.1, 1 and 10 mg $fish^{-1}$. Specific antibody production of 1 and 10 mg $fish^{-1}$ administered groups significantly increased at four weeks post immunization. All vaccinated groups showed higher survival rates than a control group when five groups of fish were challenged with S. parauberis at a dose of $1.14{\times}10^4$ cfu $fish^{-1}$ and $1.14{\times}10^2$ cfu $fish^{-1}$, respectively. In particular, 0.1 or higher concentrations of formalin killed bacterial cells are able to confer the fish high protection against S. parauberis infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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