• 제목/요약/키워드: ion exchange chromatography

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고려인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)에서 생리활성을 보이는 25 kDa 주요단백질 (GMP)의 분리정제 (Purification of a major protein with physiological activities from Panax ginseng C. A. Meyer)

  • 권택헌;오세량;박훈;김경현
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제41권6호
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    • pp.410-413
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    • 1998
  • Gel filtration과 ion exchange chromatography, reversed-phase 및 ion exchange FPLC를 이용하여 고려인삼 뿌리에서 subunit 분자량 약 25 kDa의 주요단백질(이하 GMP)을 분리하였다. PAS 염색을 통하여 GMP는 carbohydrate moiety를 갖는 당단백질일 가능성을 보여주었고, 이는 glycosidase 처리후 protein band shift 실험으로 확인되었다. GMP는 native polyacrylamide 전기영동 및 gel permeation FPLC를 통해 native form은 약 63 kDa의 분자량을 갖는 dimer로 판단된다. GMP의 생리활성 측정결과, inflammation mediator의 기능탐색에 쓰이는 anticomplementary activity를 보여주었다.

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Comparison of the Exopeptidase Activity of Fractions from Crude Extracts of Octopus Octopus vulgaris Cuvier Hepatopancreas Using Different Fractionation Methods

  • Kim, Min Ji;Kim, Hyeon Jeong;Kim, Ki Hyun;Heu, Min Soo;Kim, Jin-Soo
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제17권2호
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    • pp.181-187
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    • 2014
  • This study was performed to identify the optimum fractionation method and conditions to obtain exopeptidase-active fractions from octopus hepatopancreas (HP) crude extracts (CEs) using four techniques: solid ammonium sulfate fractionation, polyethylene glycol (PEG) fractionation, anion exchange chromatography, and gel filtration chromatography. The fractions with the highest total activity toward L-leucine-p-nitroanilide (Leu-pNA) were fraction IV from the ammonium sulfate and PEG fractionation, and fraction II in ion exchange and gel filtration chromatography. The total exoprotease activity of these fractions was highest in fraction IV (4,050.20 U) of ammonium sulfate fractionation, followed by fraction II (3,600.28 U) from gel filtration chromatography, fraction IV (2,861.30 U) from PEG fractionation, and fraction II (2,576.28 U) from ion exchange chromatography. These results suggest that ammonium sulfate fractionation using 60-80% ammonium sulfate was the most efficient method for separating the exoprotease active fractions from CEs of octopus HP.

이온교환크로마토그라피를 이용하여 굴 박신액에서 Taurine의 분리 (The Isolation of Taurine from the Oyster Shucking Juice Using Ion Exchange Column Chromatography)

  • 이영철;구재근;김동수;김영명
    • 한국식품과학회지
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    • 제24권6호
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    • pp.616-618
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    • 1992
  • 본 연구에서는 효과적으로 이용하지 못하는 굴박신액에서 이온교환 크로마토그라피로 taurine의 분리하고자 하였다. Dowex 50W $H^+$형과 Dowex 2 OH 형으로 처리한 용출액 중 흡광도가 높게 나타난 획분을 Amberite IRA-410 $OH^-$형에 다시 용출시켜 taurine을 흡착시킨 후 흡착한 taurine을 0.1M acetic acid로 용출시키면 수율과 순도가 84.8%와 94.9%인 taurine을 얻을 수 있었다.

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Ion Chromatography에 의한 음료수중 음이온 함량에 관한 연구 (Measurement of an Ion Concentration in Drinking Water by lon Chromatography)

  • 김형석
    • 환경위생공학
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    • 제4권1호
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    • pp.7-15
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    • 1989
  • According to the increase of population and development of industrialization air and water pollution problems are still keeping going to great nuisance to human activities. Specially man should drink 2l clean water to maintain our health every day, but we afraid of drink the city tap water because of the contaminants like heavy metals, bacteria trihalomethane, etc. In the analysis of the anions in potable water, we usually adapt the Standard methods for the Examination of Water and Wastewater. But this method is tedious and time consuming, so the Ion Chromatography method is now used in research of water quality. Author worked with Ion Chromatography in measuring the anions in drinking water by attaching conductivity dector to normal High Performance Liquid Chromatograph. Low-capacity ion-exchange coulmn and dilute eluents, 0.00M phthalic aic was used in this study. The concentration of chloride ion was 1.55 ppm$\~$3 8.81ppm, nitrate ion was 5.45 ppm$\~$18.27ppm, and sulfate ion was 19.64 ppm$\~$28.86 ppm. The phosphate ion was detected only in Apt. tap water as 167.99 ppm whose amount was supposed to be used as a water pipe cleaner.

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능이버섯으로부터 Fibrin 분해활성이 있는 단백질의 분리 및 정제 (Isolation and Purification of Fibrinolytic Enzyme of Edible Mushroom, Sarcodon aspratus(Berk.)S. Ito)

  • 이종호;양정례;정청송;김희숙;조재선
    • 생명과학회지
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    • 제11권6호
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    • pp.561-567
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    • 2001
  • 능이버섯[Sarcodon aspratus(Berk.)S.Ito]의 fibrin 분해 활성물질을 분리정제하기 위하여(N $H_4$)$_2$S $O_4$침전법, DE52 anion exchange column chromatography, Sephacryl-S2000 gel filtration chromatography 및 Mono S cation FPLC를 행하였으며 정제된 효소의 특성을 측정하였다. 혈전용해 요소의 활성물질은 DE52 anion exchange colum chroma-tography에 NaCI의 농도가 0.2M 정도에서 용출되었으며 계속된 Sephacryl-S200 gel fitration chromatography 및 Mono S cation EPLC를 실시한 결과 단일 Peak를 얻었고 혈전용해효소의 특이활성은 55.2 U/mg protein으로 조효소액으로 비하여 11.3 배 증가하였으며 수율은 49.5%이었다. 또한 Mono S cation EPLC에서 얻은 활성획분을 12% SDS-PAGE로 전기영동한 결과 단일 band를 얻었으며 gel filtration의 결과와 비교함으로서 정제된 능이의 혈전용해 효소의 분자량은 29.300 Da인 것으로 확인되었다. 능이로 부터 정제한 혈전용해효소는 pH가 높아질수록 효소활성이 증가하였으며 pH 10.5의 알카리성에서도 안정하였으며 6$0^{\circ}C$이상의 온도에서는 효소활성이 급격히 실활하기 시작하였지만 8$0^{\circ}C$에서 25%의 상대활성을 보였다. 또한 본 효소는 C $u^{2+}$이온 $Co^{3+}$ 이온 등 중금속에 의하여 68%및 38%활성이 저해되었으며 $Ca^{2+}$이온 또는 $Mg^{2+}$의 초딤색 인 EDTA및 serine protease inhibitor이 PMSF에 의하여 활성이 저해되었었다. 이러한 결과들은 능이의 혈전용해효소가 Ca.sup 2+/또는M $g^{2+}$에 의하여 활성이 증가하는 serine protease임을 암시해 주고 있다.

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Partisil/Partisphere 이온 교환 컬럼 재생 가이드 (Column regeneration for Partisil/Partisphere ion-exchange columns)

  • Mark Fever;Gemma Howse
    • FOCUS: LIFE SCIENCE
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    • 제1호
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    • pp.5.1-5.3
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    • 2024
  • The document discusses the regeneration of Partisil/Partisphere ion-exchange columns in chromatography. It mentions that column efficiency can diminish with use due to the accumulation of sample and/or mobile phase impurities at the head of the column. This can lead to a change in back pressure, lower column efficiency, and sometimes a change in selectivity. The document outlines a procedure that may restore column performance. The document also provides everyday practices to enhance the lifetime of a column. These include using only high-purity HPLC solvents and buffers, using freshly prepared mobile phases and buffers, filtering mobile phases to remove particulates, using appropriate sample clean-up procedures, using a guard column or pre-column filter, and working within the pressure and flow rate limitations of the column. For the regeneration of Partisil/Partisphere SAX, SCX, WAX, and WCX columns, the document suggests passing 20 column volumes of various mobile phases through the column. These include a buffer wash, distilled water, an acid wash, a chelating wash, a methanol wash, and a buffer for separation. The document emphasizes that not all of these wash steps are required for every column clean-up and that some chromatographers require only a combination of certain steps.

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Bacillus sphaericus Asporogenic Mutant Spo - D1216의 독성에 관한 연구 (Studies on the Toxic Activity of Bacillus sphaericus Spo -D1216 Asporogenic Mutant)

  • 복거중;김영한;이형환
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.157-162
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    • 1985
  • Bacillus sphaericus 1593 K-5 균주의 Culex pallens 모기유충에 대한 LC$_{50}$(cells/$m\ell$)은 2.6$\times$$10^2$이었다. B. sphericus 1593 K-5 Spo-D 1216 균주는 Culex pallens 모기유충에 대해 독성을 나타내지 않았다. B. sphaericus 1593 K-5 균주는 포자가 형성되어 가면서 독성이 증가함을 보였다. B. sphaericus 1593 K-5 균주의 세포질을 Sep-hadex G-100 컬럼상에서 gel permeation 크로마토그래피를 행하였을 때 3개의 단백질 분획을 보였으며 이 중 한 분획이 활성분획있다. 이 활성 분획을 DEAE-Sepha dex A-50 컬럼상에서 ion-exchange 크로마토그래피를 행하였을 때 4개의 단백질 분획을 보였으며 이중 한 분획이 활성분획이었다. B. sphericus 1593 K-5 Spo-D1216균주의 세포질은 Sephadex G-100 컬럼상에서 gel permeation 크로마토그래피를 행하였을 때 2개의 단백질 분획을 보였으며 이 분획 모두가 활성이 없음이 생체실험 결과 밝혀졌다.다.

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Bacillus cereus $\beta$-아밀라아제의 정제 및 이화학적 성질 (Purification and Some Physicochemical Study of Bacillus cereus $\beta$-Amylase)

  • 송예헌
    • 한국식품영양학회지
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    • 제6권4호
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    • pp.307-313
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    • 1993
  • Bacillus cereus $\beta$-amylase was purified by Sephadex G-100 gel filtration, CM Sephadex C-50 ion exchange chromatography and CM Sephadex C-50 ion exchange rechromatography The purified enzyme showed 871 unit/mg of specific activity. The purified enzyme was identified as homogenious by disc PAGE, SDS-PAGE and analysis of reaction product. The purified enzyme showed optimum pH 7.0. optimum temperature 5$0^{\circ}C$, and was stable at 0~5$0^{\circ}C$ and at pH range of 6~10.

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오염된 물로부터 이온교환수지를 이용한 방사성이온 제거 (Removal of Radioactive Ions from Contaminated Water by Ion Exchange Resin)

  • 신도형;주고운;정성일;임지원
    • 공업화학
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    • 제27권6호
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    • pp.633-638
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    • 2016
  • 본 연구에서는 상용화된 양이온교환수지, 음이온교환수지, 혼합이온교환수지 각각 3종을 이용하여 Cs과 I 등의 방사성이온을 포함하고 있는 오염수 중 방사성 이온을 분리하는 연구를 하였다. 실험은 상온에서 회분식으로 진행하였으며, 이온교환수지의 양을 달리하여 각각의 이온교환수지에 대한 Cs와 I의 제염성능을 비교하였다. 이온크로마토그라피 기기로 농도분석을 한 결과, D사의 이온교환수지의 대체적으로 이온교환능력이 높은 결과 값을 가졌으며, 공통적으로 이온교환수지의 양이 적을 때, 이온교환수지 질량 대비 제염성능이 높은 것을 알 수 있었다. D사의 양이온교환수지의 질량이 적을 때, Cs 이온에 대한 이온교환용량은 0.199 meq/g, 음이온교환수지의 I 이온에 대한 이온교환용량은 0.344 meq/g의 결과 값을 확인할 수 있었으며, 혼합이온수지를 사용했을 때에는 I 이온에 대한 이온교환용량이 0.33 meq/g으로, D사의 이온교환수지가 다른 이온교환수지에 비해 특히 I에 대한 이온교환능력이 높은 것을 알 수 있었다.

Euphorbia lathyris에서 분비되는 Latex 65kD 단백질의 특성규명 (Characterization of 65 kD Protein in Latex Excreted from Euphorbia lathyris)

  • 박희성
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제31권4호
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    • pp.319-323
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    • 2004
  • Euphorbia lathyris의 유관세포로부터 분비되는 수용성 latex단백질을 10% SDS-polyacrylamide 전기영동으로 분리하여 특징적으로 잘 나타나고 있는 ELp65, ELp55, ELp43, ELp32 그리고 ELp23 등의 주요단백질을 확인하였다. 이들 latex 주요단백질들 중에서 ELp65는 ammonium sulfate 침전, gel permeation chromatography 그리고 ion exchange chromatography 등의 방법으로 순수 분리하였는데 ELp65의 N-terminal amino acid 서열분석에 의하면 이는 토마토의 p69a subtilisin-like pretense의 mature peptide의 앞부분과 강한 유사성을 지니고 있었으며 식물방어와 관련된 기능이 제시되었다. PCR증폭에 의하여 클로닝된 토마토의 p69a DNA를 probe로 이용하여 Southern blot hybridization을 수행한 결과 E. lathyris genome은 토마토의 subtilisin-like proteases와 유사한 정보를 지닐 수도 있는 3-5 유전자들로 구성된 gene family가 분석되었다.