Gong, Daecheol;Kim, Juyeon;Choi, Hansol;Noh, Sang Kyu
Food Science and Preservation
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v.21
no.1
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pp.91-96
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2014
Evidence suggests that dietary indole, particularly rich in cruciferous vegetables, may reduce the risk of cardiovascular diseases. Endosulfan is a residual organochlorine pesticide, which is detected in fruits, vegetables, and crops. In this study, we investigated the effect of luminal indole on endosulfan transport in the small intestine in mesenteric lymph duct-cannulated rats. The duodenum was also cannulated and a fasting phosphate buffered saline-glucose solution was infused overnight at 3 mL/hr. After recovery, a lipid emulsion containing [2,3-$^{14}C$] endosulfan ($^{14}C$-endosulfan) was infused into the duodenum for 8 hours. The tested rats were infused with the same lipid emulsion, but with indole. Samples from the lymph-fistula were collected hourly, and the luminal contents and mucosa were collected at the end of the infusion. The lymph flow in the mesenteric lymph did not differ between the two groups. However, the intestinal absorption of both endosulfan and cholesterol were significantly decreased by indole. The amount of radioactive endosulfan, which remained in the mucosa, was greater in the indole-infused rats due to the decreased transport of endosulfan into the lymph. This study indicates that the indole decreases the intestinal transport of endosulfan into the mesenteric lymph.
Jae Wha kim;Mi Young Han;Hee Gu Lee;Eun Young Song;Tai Wha Chung;Kyung Soo Nam;In Seong Choe
Biomedical Science Letters
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v.2
no.1
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pp.121-126
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1996
Specific monoclonal antibodies(mAbs) against bis-indole alkaloids related to vinblastine were established to develop a simple and specific immunoassay system for the quantitation of Vinca alkaloids. Vinca alkaloids were extracted from tissue cultured cells of periwinkle plant (Vinca rosea L.). Spleen cells from Balb/c mice immunized with vinblastine-bovine serum albumin(VBL-BSA) conjugate as immunogen were fused with myeloma cells(Sp2/0-Ag.14) in the presence of polyethylene glycol. In the preliminary experiments, 32 clones which highly reacted with VBL-BSA conjugate were selected by ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay).These clones were further analyzed by inhibition assay of ELISA. The results obtained with two typical monoclonal antibodies, KN-1 and KN-2, were described. KN-1 exhibited considerable reactivities with soluble dimeric bis-indole alkaloids, whereas no cross reacted with monomeric bis-indole alkaloids. However KN-2 showed cross reactivity with mono- and di-meric bis-indole alkaloids. Furthermore, KN-1 was applied to the immunoassay system for determining the VBL amounts of in vitro cultured cell extracts. This assay system could detect dimeric vinca alkaloid as low as 0.05 nM.
Potato tubers treated at $4^{\circ}C$ for 4 weeks were irradiated with a dose of 0.12 kGy from $^{60}Co$ source and stored at $20^{\circ}C,\;70{\sim}90%$ humidity for 5 weeks. Changes of ${\alpha}-amylase$, peroxidase, indole acetic acid oxidase, indole acetic acid synthesizing enzyme activities were determined. In addition, treatment of gibberellin or indole acetic acid to tubers irradiated were carried out to examine reversal of sprout-inhibition of tubers irradiated. Results are as follows; 1. Irradiation by ${\gamma}-ray$ at 0. 12 kGy dose inactivated easily the enzyme activities in vitro. $D_{37}$ values obtained were 0.94, 0.36 kGy for ${\alpha}-amylase$ and peroxidase, respectively 2. Complete inhibition of the toter sprouting was resulted by the irradiation of tubers with a dose of 0.12 kGy. 3. The indole acetic acid oxidase activity increased 2 times immediately after irradiation. Meanwhile, indole acetic acid synthesizing activity decreased about $50{\sim}75%$ for 5-week storage in irradiated potatoes, whereas the activity increased about 3.5 times along with sprouting in non-irradiated tubers. 4. In morphological aspects, deformed buds with necrosis in the meristmatic tissue were developed in irradiated tubers. Treatment of gibberellin or indole acetic acid at the concentration of 100 or 20 ppm to the irradiated tubers reversed the sprout-inhibition partially. Nevertheless, the deformed buds remained without change.
This study explores the interaction between the production of indole-3-acetic acid (IAA), a typical phytohormone auxin and the role of IAA biosynthetic pathways in each IAA producing rhizobacterial strain. The bacterial strains were isolated from rhizosphere of wild plants and identified as Acinetobacter guillouiae SW5, Bacillus thuringiensis SW17, Rhodococcus equi SW9, and Lysinibacillus fusiformis SW13. A. guillouiae SW5 exhibited the highest production of IAA using tryptophan-dependent pathways among the 4 strains. When indole-3-acetamide (IAM) was added, Rhodococcus equi SW9 showed the highest IAA production of $3824{\mu}g/mg$ protein using amidase activity. A. guillouiae SW5 also showed the highest production of IAA using two pathways with indole-3-acetonitrile (IAN), and its nitrile hydratase activity might be higher than nitrilase. B. thuringiensis SW17 showed the lowest IAA production, and most of IAA might be produced by the amidase activity, although the nitrilase activity was the highest among 4 strains. The roles of nitrile converting enzymes were relatively similar in IAA synthesis by Lysinibacillus fusiformis SW13. Tryptophan-independent pathway of IAA production was utilized by only A. guillouiae SW5.
We have investigated the secondary metabolites from the mushroom Suillus granulatus. The methanolic extract of fruit body was separated by silica gel and Sephadex LH-20 column chromatographies. TLC and HPLC were also used for the further purification on compounds from the extracts, Nine compounds were finally isolated and their structures were assigned as 4-hydroxyphenylacetic acid 4-hydroxybenzaldehyde 2,5-dihydroxybenzoic acid methyl ester 5'-deoxy-5'methylthioadenosine. indole-3- carboxlic acid methyl ester indole 3-carboxaldehyde 1,3,5-trihydroxy 7-methylanthraquinone nicotinamide and 3-geranylgeranyl-4-hydroxybenzoic acid on the basis of NMR studies.
Lee Sang-Kil;Park Je-Won;Park Sung-Ryeol;Ahn Jong-Seog;Choi Cha-Yong;Yoon Yeo-Joon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.6
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pp.974-978
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2006
The cytochrome P450 monooxygenase from the pikromycin biosynthetic gene cluster in Streptomyces venezuelae, known as PikC, was observed to hydroxylate the unnatural substrate indole to indigo. Furthermore, the site-directed mutagenesis of PikC monooxygenase led to the mutant enzyme F171Q, in which Phe171 was altered to Gln, with enhanced activity for the hydroxylation of indole. From enzyme kinetic studies, F171Q showed an approximately five-fold higher catalytic efficiency compared with the wild-type PikC. Therefore, these results demonstrate the promising application of P450s originating from Streptomyces, normally involved in polyketide biosynthesis, to generate a diverse array of other industrially useful compounds.
To produce economically important indole alkaloids by cell cultures, we selected protoplastsderived clones (protoclones) of vinca (Catharanthus roseus) for high yields of catharanthine and ajmalicine. Protoplasts were enzymatically isolated from suspension-cultured cells. The highest plating efficiency (1%) was obtained when protoplasts were plated at a density of 1$\times$105 protoplasts/ml in a culture medium solidified with 0.4% Seaplaque agarose. The growth rates of 40 protoclones subcultured on a solid medium varied over a wide range. Protoclone VPC-6, which had the highest growth rate, was observed to produce relatively high yields of catharanthine and ajmalicine when cultured in a liquid medium. Although the original cell line did not produce catharanthine at a detectable level by HPLC, protoclone VPC-10 produced it at a level of 5.9$\mu\textrm{g}$/g fresh weight of cells for 10 days of culture. Under the same conditions, protoclone VPC-15 produced ajmalicine at a level of 133.6$\mu\textrm{g}$/g, of which productivity was improved about ,3 times than that of the original cell line. The results indicate that differences in the growth rate and indole alkaloid yield among the protoclones reflect the somaclonal variation in suspnsion-cultured cells.
A gas chromatographic analytical method for IAA was developed. IAA was extracted with 80% acetone & methanol. Sample was macerated with 80% acetone & methanol to extract IAA. After filtration, the solvent was removed and residual IAA was esterified with 14% $BF_3$/MeOH. The IAA esters can be easily separated with intermediate polar column.
Pseudomonas sp. BCNU 106 isolated from industrial wastewater was able to produce indigo from indole by utilizing various organic solvents. BCNU 106 produced indigo effectively when grown in the presence of a large volume of p-xylene, propylbenzene, and mesitylene and a high level of indole. The present study demonstrated that the maximal yield was achieved with 20% (v/w) p-xylene and 4 g/l indole. Under these conditions, the indigo yield and the transformation efficiency of indole were 315.5 mg/l and 97%, respectively. The results suggest that Pseudomonas sp. BCNU 106 might be a potential candidate for industrially important indigo production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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