This study was done to establish a mouse model for catheter-related biofilm infection suitable to bioluminescence imaging (BLI). Biofilm formation of Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) Xen5 grown on catheter disks in vitro and in an implanted mouse model was real-time monitored during a 7-day study period using BLI. The numbers of integrated brightness (IB) and viable bacterial count (VBC) in the biofilm disks in vitro were highest at 24 h after inoculation; the IB of biofilm in vivo was increased until 24 h after implantation. A statistical correlation was observed between IB and VBC in vitro by linear regression analysis. The actual VBC value in vivo can be estimated accurately by IB without sacrifice. In addition, we monitored the change in white blood cells (WBCs) during infection. The number of WBCs on day 7 was significantly higher in the infection group than in the control group. This study indicates that BLI is a simple, fast, and sensitive method to measure catheter biofilm infection in mice.
Effect of ginseng polysaccharide fraction was examined for $CCl_4$-induced hepatotoxicity in vitro and in vivo. In $CCl_4$-injured primary cultured rat hepatocytes, treatment of the polysaccharide fraction (0.1, 0.3, 1.0 mg/ml) significantly Inhibited the release of LDH and GOT into the culture medium in a dose-dependent manner. Oral administration of the polysaccharide fraction (100, 200 mg/kg) inhibited the decrease of body weight and the increase of the ratio of liver to body weight in $CCl_4$-intoxicated rats. Elevation of GOT, GPT and ALP activity in the serum by $CCl_4$-induced hepatotoxicity was suppressed by administration of ginseng polysaccharide fraction. MDA levels increased in the serum as well as in the liver tissue by treatment with $CCl_4$ showed a tendency to be 연w in the rats given to the polysaccharide fraction. These results suggest that the polysaccharide fraction may be active substance responsible for antihepatotoxic effect of Panax ginseng.
This study examined the effect of 3,4-dihydroxytoluene (DHT) on UVB-induced photoaging and determined its molecular mechanisms, using HaCaT human keratinocytes and SKH-1 hairless mice. DHT suppressed UVB-induced matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) expression in HaCaT cells. In vivo data from mouse skin supported that DHT decreased UVB-induced wrinkle formation, epidermal thickness, and matrix metalloproteinase-13 (MMP-13) expression. DHT appeared to exert its anti-aging effects by suppressing UVB-induced Raf-1 kinase activity and subsequent attenuation of UVB-induced phosphorylation of MEK, ERK, and p90RSK in HaCaT cells. In vitro and in vivo pull-down assays revealed that DHT bound with Raf-1 in ATP-noncompetitive manner. Overall, DHT appears to anti-photoaging effects in vitro and in vivo through the suppression of Raf-1 kinase activity and may have potential as a treatment for the prevention of skin aging.
In order to compare the suppressive effect of quercetin and several its glycosides, such as quercitrin (quercetin-3-rhamnoside), isoquercitrin (quercetin-3-glucoside), hyperin (quercetin-3-galactoside) and tutin (quercetin-3-rhamnosyl glucoside), on the genotoxicity by N-methyl-N-nitrosourea(MNU), in vitro sister chromatid exchange(SCE) test using mouse spleen lymphocytes and in vivo micronucleus test using mouse peripheral blood were performed. MNU-induced SCEs in vitro were not decreased by the simultaneous treatment of test compounds. Among them, quercetin and hyperin showed significant suppressive effects at high dose(10-5M). On the other hand, MNU-induced micronucleated reticulocytes(MNRETS) in vivo were significantly decreased with good dose-dependent manner in all compound tested. However, there were not significant differences between quercetin aglycone and its glycosides in the suppressive aglycone and its glycosides may act as an antigenotoxic agent in vivo and may be useful as a chemopreventive agent of alkylating agent.
Fish extracts were processed at high temperature (136.7 ~14$0^{\circ}C$) for possible use as functional food ingredients. Raw fish meats and those hydrothermal extracts were compared with respect to in vitro and in vivo protein qualities. 95% of fat inraw meats was reduced in extracts but there were not remarkable changes in other macronutrients in freeze-dried extracts. Most of essential amino acids were decreased significantly but two times more proline and glycine were detected in extracts. High temperature cooking resulted 2.1 ~3.7 times of higher total free amino acid content infish extracts compared iwth raw meat, and taurine and glutamic acid were increased especially. Severe protein damages were occurred when invitro protein quality indices such as availblae lysine, hydrophilic browing, trypsin inhibitor formation and in vitro protein digestibility were measured on fish extracts. In vivo protein qualities were also strongly influenced by high temperature ; however rat-body-weight gain was nearly zero during PER assay, and rat PER or NPR of fish extracts were significantly lower (p<0.001) than those of cotnrol (ANRC casein) and original raw fish meats.
본 연구에서는 점액포자충에 의한 넙치의 여윔증 치료 후보물질을 탐색하기 위하여, Coxi-stop, Coxiclin 및 BLEAN80 등의 제품을 사용하여 in vitro 및 in vivo 실험을 실시하였다. 톨트라주릴이 주성분인 Coxi-stop의 경우, BF-2 cell을 사용한 in vitro 실험에서 점액포자충의 활성을 감소시키는 결과를 보였고, cell lysis와 같은 세포 독성 현상이 나타나지 않았다. In vivo 실험에서 Coxi-stop을 사용하여 약욕한 실험군은 대조군에 비하여 누적폐사율이 낮게 나타났으며, 이것은 톨트라주릴이 어류 기생충성 질병에 치료 효과가 있다는 기존의 보고와 유사한 결과이다. 본 연구에서는 톨트라주릴이 넙치의 여윔증 치료제로서 가능성이 있는 후보 물질이라는 것을 제시한다.
Huperzine A-loaded microspheres composed of poly(D,L-lactide-co-glycolide) were prepared by an O/w emulsion solvent evaporation method. The characterization of the microspheres such as drug loading, size, shape and release profile was described. The in vitro release in the initial 7 days was nearly linear with $10\%$ released per day. Thereafter drug release rate became slow gradually and about $90\%$ drug released at day 21. The in vitro release rate determined by dialysis bag method had a good correlation with the in vivo release rate. Huperzine A aqueous solution was intramuscularly injected (i.m.) at 0.4mg/kg and microspheres were intramuscularly injected at 8.4 mg eq huperzine A/kg in rats. The maxium plasma concentration $(C_{max})$ after i.m. microspheres was only $32\%$ of that after i.m. solution. Drug in plasma could be detectd until day 14 and about $5\%$ of administered dose was residued at the injection site at day 14. The relative bioavailability of huperzine A microspheres over a period of 14 days was $94.7\%$. Inhibition of acyecholinesterase activity (AchE) in rat's cortex, hippocampus and striatum could sustain for about 14 days. In conclusion, huperzine A-loaded microspheres possessed a prolonged and complete drug release with significant inhibition of AchE for 2 weeks in rats.
The aim of this study is to evaluate the effects essential oil from Lavendular officinalis on the production of UVB-irradiated-induced nitric oxide(NO), in vivo and in vitro. NO is a recently discovered mediator of cell communication involved in a variety of physiological and pathophysiological processes. This enzyme is present in various tissues including smooth muscle cells and macrophages and take part in several immunopathological process. In vitro, the cytotoxicity and cell viability of aroma oil was evaluated by the MTT assay in the concentration of 0.01, 0.05, 0.1%. And, the effect of aroma oil was investigated to production of NO in human fibroblast cells line CCD-986sk ($2{\times}10^5$ cell/well) after UVB-irradiation with aroma oil (0.01, 0.1, and 1%). The result showed that aroma oil did not affected the production of NO. In vivo, it was investigated to production of NO after UVB- irradiation with aroma oil. The experimental groups were divided into four groups. Aroma oil was stimulated the production of NO by itself. As the results, all of the in vitro and in vivo, aroma oil were affected production of NO by dependent the concentration-manners.
Hydroxyapatite (HA) and $\beta$-tricalcium phosphate ($\beta$-TCP) are bio-compatible materials with bones and teeth. HA has been widely applied as bone substitutes because of chemical stability in vivo, while $\beta$-TCP has higher resorbability than HA when the material is implanted in a bone defect. In the present study, both HA and $\beta$-TCP porous ceramics were soaked in the simulated body fluid in order to investigate the reaction between the materials and the fluid. After the soaking test, carbonate hydroxyapatite was formed on HA surface at 1 week, and then the amount of precipitates increased with increasing period of the soaking test. While $\beta$-TCP was not dissolved in the fluid, carbonate hydroxyaopatite was also formed on $\beta$-TCP surface after 12 weeks, and the amount of precipitates was less than that on HA. In vitro behavior of HA was similar to that in vivo, but in vitro behavior of $\beta$-TCP was not similar to that in vivo.
We previously identified Streptomyces griseus as an anti-cancer agent (Kim et al., 2014). In this study, we isolated compounds from S. griseus and evaluated their anticancer effect and toxicity in vitro and in vivo. Preparative centrifugal partition chromatography (CPC) was used to obtain three compounds, cyclo($_{\small{L}}$-[4-hydroxyprolinyl]-$_{\small{L}}$-leucine], cyclo($_{\small{L}}$-Phe-trans-4-hydroxy-$_{\small{L}}$-Pro) and phenethyl acetate (PA). We chose PA, which had the highest anticancer activity, as a target compound for further experiments. PA induced the formation of apoptotic bodies, DNA fragmentation, DNA accumulation in $G_0/G_1$ phase, and reactive oxygen species (ROS) formation. Furthermore, PA treatment increased Bax/Bcl-xL expression, activated caspase-3, and cleaved poly-ADP-ribose polymerase (PARP) in HL-60 cells. Simultaneous evaluation in vitro and in vivo, revealed that PA exhibited no toxicity in Vero cells and zebrafish embryos. We revealed, for the first time, that PA generates ROS, and that this ROS accumulation induced the Bcl signaling pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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