• 한국동물위생학회지
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• 제39권3호
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• pp.167-174
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• 2016

In this study, we analyzed for the changes of low organic compounds during 4 weeks incubation though inoculation of harmful microorganisms on commercial feed. Two percent of overnight cultures of Exiguobacterium acetylicum, Acinetobacter calcoaceticus, Aspergillus flavus and Fusarium graminearum were inoculated in feed, respectively. After adjusting moisture level to 50% for the promotion of feed spoilage, pH was decreased to 4.58~5.03 and microorganism was ranged to $6{\sim}10log_{10}CFU/g$. The compounds were compare between aflatoxin G1 producing feeds and aflatoxin G1 non-producing feeds. Aflatoxins G1 were detected by the immunoaffinity column clean-up method with HPLC-FLD, and were confirmed in samples incoulated by Aspergillus flavus and Acinetobacter calcoaceticus. Koiganal II, cyclohexanol and butadien-one were detected from samples (the non-sterilized inoculated feed) by Aspergillus flavus and Acinetobacter calcoaceticus. Respectively as aflatoxin G1 pre-detected substance, Koiganal II, cyclohexanol and butadien-one may be useful substance for the pre-detection of aflatoxin G1.

• 한국식품과학회지
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• 제44권2호
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• pp.247-250
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• 2012

본 연구에서 적용한 시험법의 회수율은 97.4-122.5%, 상대표준편차(RSD)는 6%이내로서 적합한 시험법임을 확인하였다. 조사된 원유 및 시유의 검출농도는 아플라톡신 $M_1$이 평균 29.6 ng/kg(5.4-72.7 ng/kg)로 나타났으며, 원유 및 시유에 대한 아플라톡신 $M_1$ 오염수준은 현행 식품공전에서 정한 허용기준치인 500 ng/kg 보다 낮은 안전한 수준인 것으로 판단된다.

• 한국환경성돌연변이발암원학회지
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• 제20권1호
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• pp.34-39
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• 2000

Although shipbuilding workers were exposed to a variety of genotoxic compounds including polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), limited number of studies were conducted to evaluate the biomarkers related to PAH exposure in painting workers in shipbuilding industry. One hundred and thirty three workers including 73 employees using coal tar paints were recruited from a shipbuilding company located in South Korea. Urinary 1-hydroxypyrene glucuronide (1-OHPG), as internal dose of PAH exposure, were measured by synchronous fluorescence spectroscopy after immunoaffinity purification using monoclonal antibody 8E11. Glutathione S-transferase (GST)M1 and GSTT1 genotypes were assessed by multiplex PCR. Information on demographic characteristics, smoking gabit, diet, job title, use of personal protective equipments were collected by self-administered questionnaire. Urinary 1-OHPG were higher in workers using coal tar paints than in workers using general paints, however, the difference was not statistically significant (p=0.20, Mann-Whitney U test). Urinary 1-OHPG levels in smokers were higher than in non-smokers (p<0.05 by Mann-Whitney U test) and there was a significant increase in urinary 1-OHPG levels with the numbers of cigarettes consumed per day (Spearman's correlation coefficient = 0.28, p=0.02). Genetic polymorphisms of GSTM1 and GSTT1 did not influence the level of 1-OHPG in study subjects. Multiple regression analysis show that smoking is the only significant predictor for lon-transformed 1-OHPG (overall model R2=0.1). These results suggest that workers using coal tar paints were exposed to significant amount of PAHs and individual difference in xenobiotic metabolism might affect the levels of internal dose of PAHs.

• 대한의생명과학회지
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• 제15권1호
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• pp.37-45
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• 2009

Insect cell cultures have become important tools in the production of biological substances for use in a variety of research, human and veterinary medicine, and pest control applications. These applications often require the introduction of foreign DNA into the cells and have generally used methods originally developed for use with human and other mammalian cell cultures. While these methods can be successfully employed, they are often less efficient with insect cells and frequently involve complex procedures or require specialized equipment. Even when they do work, they may require substantial modification because of differences in the culture medium or growth patterns of insect cells. In this study, We have optimized transfection conditions of Sf9 cell line using insect expression vector pIZT/V5-His which expresses green fluorescent protein effectively. Human stem cell factor (hSCF) is a glycoprotein that plays a key role in hematopoiesis acting both as a positive and negative regulator, often in synergy with other cytokines. It also plays a key role in mast cell development, gametogenesis, and melanogenesis. It can exist in membrane-bound form and in proteolytically released soluble form. As determined by an enzyme-linked immunosorbent assay performed, hSCF level in supernatant averaged 995ng/ml. The human hSCF was partially purified by immunoaffinity chromatography and analyzed with sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and immunoblotting. The results show that the hSCF has N-linked carbohydrate and corresponds to the soluble form, at or about 223 amino acids in length. The findings suggest functional importance for soluble hSCF in cells.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권1호
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• pp.1-8
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• 1991

스파르가눔 생리식염수 추출액 내에 포함되어 있는 성분단백질 중 스파르가눔증 환자 혈청내 특이 IgG항체와 민감하고 특이하게 반응하는 항원단벼질인 36, 29 kDa단백질을 단세포군 항체를 이용한 면역친화성 크로마토그 래피로 순수분리할 수 있음은 이미 보고하였다. 이 연구에서는 스파르가눔 추출액 내에 포함된 이 36, 29 kDa단백질이 젤라틴을 고리로 한 친화성 크로마토그래피로 훨씬 쉽게 순수분리할 수 있음을 증명하고자 하였다. 젤라틴을 고리로 부착시킨 Sepharose 4B column에 스파르가눔 추출액을 통과시키고 젤라틴에 부착한 단백질은 4 M urea/0.1M NaCl 용액을 분리완충액으로 분리하였다. 이렇게 분리한 단백질은 SDS-PAGE에서 36, 29 kDa band로 구성되어 있었고, SDS-PAGE/immunoblot 결과 환자의 polyclonal 항체는 이들 band에만 반응하였다. 스파르가눔증, 기타 기생충증 환자 및 건강대조군 혈청내 스파르가눔 특이항체가(IgG)를 면역효소측정 법으로 측정 한 결과 순수분리한 이 단백질은 특히 특이도가 95.8%로 생리식염수 추출액의 89%보다 우수하였고 민감도는 차이가 없었다. 이상의 결과는 젤라틴을 고리로 이용한 친화성 크로마토그래피는 스파르가눔 생리식염수 추출액 내의 36 및 29 kDa 단백질을 간편하게 순수분리할 수 있고 단백질의 항원성도 유지할 수 있음을 보이고 있었다.

• 한국식품과학회지
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• 제38권1호
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• pp.140-142
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• 2006

이전의 연구 결과에 나타난 바 있는 막걸리 중 ochratoxin A의 낮은 회수율(<50%)은 시료 내 본 곰팡이독소의 추출 혹은 전처리 과정의 개선이 필요함을 지적하였다. 본 연구에서 막걸리 시료의 균질화에 이용되던 추출 용액을 PBS 용액 대신 3% sodium bicarbonate 용액으로 채택할 경우, 80% 이상의 첨가된 ochratoxin A가 회수되어 그 검출이 용이해졌다. 한편 개선된 해당 분석법의 막걸리 시료에 대한 적용 가능성을 알아보기 위하여 국내 시판 중인 살균막걸리 30점을 대상으로 분석한 결과 밀 막걸리 2점에서 ochratoxin A가 검출되었고(0.8, 2.1 ppb), 그 결과를 다시 HPLC-ESI-MS로 확정하였다. 본 연구를 통해 수행된 개선된 시료 전처리 방법(3% sodium bicarbonate)과 병행된 IAC 및 HPLC-FD 분석법은 막걸리를 대상으로 한 ochratoxin A의 오염 조사에 유효한 분석법임이 확인되었다.

• 분석과학
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• 제24권2호
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• pp.150-157
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• 2011

아플라톡신은 Aspergillus flavus와 A. parasiticus에 의해 생성되는 독소대사산물로 발암물질이며 곡류(옥수수, 쌀, 보리), 땅콩, 과실류 및 종자류의 생산과 저장과정에서 생성된다. 곰팡이가 생성되기 쉬운 조건에서 오랜 기간 저장된 종자류에서 아플라톡신이 생성될 가능성이 있으며 이를 원료로 하여 유지로 가공 할 때도 아플라톡신이 이행될 우려가 있다. 또한 곡류나 두류 등을 가공하여 만든 영유아용식품도 아플라톡신 오염 가능성이 있다. 따라서 본 연구는 식용유지 및 영유아용식품에 대해 액체 추출법의 아플라톡신 시험법 적용가능 여부를 검토하고 필요시 새로운 분석방법을 확립하고자 하였다. 식용유지에 대한 아플라톡신은 MSPD (Matrix Solid Phase Dispersion)법으로 아플라톡신을 추출해 내고 면역친화성 칼럼을 사용해 정제하여 형광검출기가 장착된 고성능액체크로마토그래피(HPLC/FLD)를 이용해 분석하였다. 아플라톡신($B_1$, $B_2$, $G_1$, $G_2$) 검량선의 직선성은 상관계수가 0.999 이상을 나타냈고 회수율은 85.9~93.0%의 양호한 결과를 얻었으며 상대표준편차는 5.7% 이하였다. 식용유지에서 액체 추출법과 비교해 볼 때, MSPD-면역친화성컬럼법을 사용하여 회수율을 향상시켜 시험법을 확립하였다. 영유아용식품에 대한 아플라톡신 분석방법은 액체 추출법이 적합하였으며 아플라톡신($B_1$, $B_2$, $G_1$, $G_2$)에 대한 회수율은 89.5~92.3%로 양호한 결과를 얻었다.

• 한국식품과학회지
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• 제52권4호
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• pp.317-324
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• 2020

본 연구는 국내에서 소비되는 총 41종의 동물성 식품 중의 비타민 B₁₂ 함량을 immunoaffinity-HPLC방법을 이용하여 분석하였으며, 이를 국가표준식품영양성분표로 활용하기 위한 분석데이터 신뢰성 확보를 위하여 분석법 검증 및 분석품질관리를 수행하였다. 동물성 식품 총 41종의 비타민 B₁₂ 함량은 0.00-12.45 ㎍/100 g으로 식품군과 조리 및 가공방법에 따라 다양하게 나타났다. 햄류에서는 살코기 햄이 가장 높은 함량을 나타냈으며 그중 구운 살코기 햄(0.65 ㎍/100 g)이 데친 살코기 햄(0.48 ㎍/100 g)보다 높은 함량을 나타냈다. 난류에서는 메추리알, 달걀, 오리알 중 메추리알이 0.37-12.45 ㎍/100 g으로 가장 높은 비타민 B₁₂ 함량을 나타냈으며 난황이 난백보다 최대 100배까지 높은 함량을 나타냈다. 식용곤충에서는 쌍별귀뚜라미 성충이 6.70 ㎍/100 g으로 가장 높은 함량을 보여 비타민 B₁₂ 섭취의 좋은 급원이 될 수 있을 것으로 보였으나 누에 번데기와 장수풍뎅이 유충에서는 비타민 B₁₂가 검출되지 않았다. 수산식품류에서는 조개젓(26.80 ㎍/100 g)이 가장 높은 함량을 나타냈으며 이 외 수산식품에서는 0.87-10.37 ㎍/100 g의 범위를 보였다. 본 연구에서 사용된 비타민 B₁₂ 분석에 대한 분석법의 검출한계, 정량한계, 직선성, 정확성 및 정밀성을 분석한 결과 모든 지표에서 분석법 검증 가이드라인 기준에 충족하였으며, 분석품질관리를 통하여 전체 분석 기간 동안 모든 분석이 신뢰성 있게 진행되었음이 확인되어 본 연구에서 생산된 동물성 식품류의 비타민 B₁₂ 데이터는 국가표준식품성분표 개정을 위한 데이터로 활용될 수 있을 것이라 평가된다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제54권2호
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• pp.211-223
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• 2021

본 연구는 한국인이 주로 상용하는 수산물을 이용한 다소비 메뉴 39종을 선정하고, 이를 기준 레시피로 조리한 후 이들에 대한 비타민 B₉ (엽산)과 B₁₂ (코발라민류) 함량을 분석하였다. 국가식품영양성분 데이터베이스 자료로 활용하기 위한 데이터의 신뢰도 확보를 위해 비타민 B₉(trienzyme-L. casei법)과 B₁₂ (immunoaffinity-HPLC/PDA) 분석법의 유효성을 검증하였으며 분석품질관리를 수행하였다. 각 성분 분석법의 정확성, 정밀성, 특이성, 상관성, 검출한계 및 정량 한계를 분석한결과 모두 AOAC 가이드라인 수용 기준에 충족되는 결과를 얻었으며, 분석품질관리도표를 전 분석 기간 동안 작성하여 확보된 분석 데이터의 신뢰도를 확보하였다. 상용 수산물 메뉴의 비타민 B₉과 B₁₂ 함량을 분석한 결과 각각 1.83-523.08 ㎍/100 g과 0.11-38.30 ㎍/100 g의 범위로 사용된 재료와 조리법의 특성에 따라 다양하게 나타났다. 비타민 B₉ 함량은 구이류의 김구이 (523.08 ㎍/100 g)가 가장 높은 함량을 보였으며, 볶음류에서 건새우볶음 (128.34 ㎍/100 g)과 잔멸치볶음 (121.53 ㎍/100 g)이 높은 함량을 나타내었다. 비타민 B₁₂함량은 찜·조림류의 꼬막찜 (38.30 ㎍/100 g)이 가장 높은 함량을 보였으며, 구이류의 김구이 (29.79 ㎍/100 g)와 볶음류의 멸치마늘종볶음 (18.99 ㎍/100 g)으로 높은 함량을 나타내었다. 유사 재료의 조리법에 따른 비타민 B₉과 B₁₂ 함량을 비교하면 비타민 B₉의 경우 물 사용량이 많은 국·탕·찌개류는 다른 시료군 (볶음, 찜, 조림, 구이, 튀김 및 무침)에 비하여 비교적 낮은 함량을 나타내어 수산물과 다양한 채소류를 함께 볶는 볶음 메뉴가 비타민 B₉ 섭취에 도움을 줄 것으로 보인다. 비타민 B₁₂의 경우 식물성 식품에는 발견되지 않고 주로 동물성 식품에만 존재하는데 본 연구 결과 김 및 미역과 같은 해조류 메뉴는 채식주의자들에게 비타민 B₁₂의 좋은 급원메뉴가 될 수 있을 것으로 보여진다. 본 연구는 분석법 검증 및 품질관리를 통하여 분석 신뢰도를 확보하였으며 이와 함께 제공된 한국 상용수산물 메뉴의 비타민 B₉과 B₁₂ 함량데이터는 한국인의 보건영양 정책 수립을 위한 국가식품영양성분 데이터베이스 자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

• Molecules and Cells
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• 제26권2호
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• pp.175-180
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• 2008

$I{\kappa}B$ kinase (IKK), the pivotal kinase in signal-dependent activation of nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$), is composed of multiple protein components, including IKK ${\alpha}/{\beta}/{\gamma}$ core subunits. To investigate the regulation of the IKK complex, we immunoaffinity purified the IKK complex, and by MALDI-TOF mass spectrometry identified a splice variant of zinc finger protein 268 (ZNF268) as a novel IKKinteracting protein. Both the full-length and the spliced form of the ZNF268 protein were detected in a variety of mammalian tissues and cell lines. The genes were cloned and expressed by in vitro transcription/translation. Several deletion derivatives, such as KRAB domain (KRAB) on its own, the KRAB/spacer/4-zinc fingers (zF4), and the spacer/4-zinc fingers (zS4), were ectopically expressed in mammalian cells and exhibited had different subcellular locations. The KRAB-containing mutants were restricted to the nucleus, while zS4 was localized in the cytosol. TNF-${\alpha}$-induced NF-${\kappa}B$ activation was examined using these mutants and only zS4 was found to stimulate activation. Collectively, the results indicate that a spliced form of ZNF268 lacking the KRAB domain is located in the cytosol, where it seems to play a role in TNF-${\alpha}$-induced NF-${\kappa}B$ activation by interacting with the IKK complex.