본 연구를 통하여 피부 미용 소재로 알려져 있는 콜라겐 펩타이드를 섭취한 후 혈중에 나타나는 소화분해산물 중 콜라겐 특유의 아미노산인 hydroxyproline과 이것의 dipeptide 형태인 Pro-Hyp이 피부에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 피부 미용 소재를 경구 섭취하는 사람의 피부는 광노화 및 자연노화가 어느 정도 진행된 상태이므로, 이와 유사한 조건을 조성하기 위해 경구 투여를 시작하기 전에 hairless mouse에 7주간 주 3회 UV를 조사하여 주름을 선유발시켰다. 군 분리를 시킨 후 7주간 경구로 실험물질을 주 5회 반복 투여하면서, 주 3회 UV 조사를 병행하였으며, 시험 기간 중 임상증상, 체중변화를 관찰하였고, 3회 (0,4. 7주차) 피부주형을 채취하여 영상 분석을 실시하였으며, 2회 (0,7 주차)의 피부탄력측정 및 1회(7주차)의 TEWL측정을 병행하였다. 실험종료 후 피부조직의 병리조직학적 검사(H&E, Masson-Trichrome stain) 및 피부두께 측정을 실시하였다. 실험기간 중 이상 임상증상을 보이거나 사망한 개체는 없었으며, 체중에 대한 통계적으로 유의한 변화는 관찰할 수 없었다. 피부 육안관찰 시 NC군에 비해 UC군의 피부 주름 증가가 뚜렷하였으며, 시험군들은 UC군에 비해 주름 증가가 적었다. 경구 투여 0, 4, 7주차에 제작된 replica의 주름 지표를 통계 처리한 결과, UV/H군과 UV/P군은 DC군에 비해 감소경향은 보였으나 유의적인 차이는 없었다. 탄력측정검사 결과 UV를 쬐지 않은 NC군은 UC군에 비해 UA/UF, Ur/Ue, Ur/Uf 지표에서 유의적인 증가를 보였다. UV/H군과 UV/P군은 모두 0, 7주차 모두 유의적인 차이를 보이지 않았다. 피부 보습력 측정 결과 NC군 및 모든 실험군에서 UC군에 비해 유의적인 TEWL 감소를 관찰할 수 있었다. 피부 두께의 경우 NC군, UV/H군, UV/P군은 UC군에 비해 피부 두께가 유의적으로 감소하였다. 진피층에서의 교원질 확인을 위해 실시한 Masson-Trichrome stain의 경우 UC군에서는 상부 진피층에서의 염색상 소실이 관찰되었으나, 모든 실험군에서 진피층 손상이 거의 관찰되지 않아 실험물질에 의한 회복을 확인 할 수 있었다. 이상의 실험 결과 hydroxyproline, Pro-Hyp의 경구반복투여시 자외선에 의해 광노화가 유발된 피부에 보습 효과, 피부 두께 감소 효과, 진피층 손상 회복 효과를 유의적으로 확인할 수 있었으며, 단, 피부 주름 개선 정도는 통계적 유의성은 없이 경향성만을 확인할 수 있었다. Hydroxyproline과 이를 함유하는 dipeptide 형태의 Pro-Hyp를 경구 투여한 시험으로부터 확인한 피부 보습 및 진피층 회복 효과는 이 물질들이 유래된 콜라겐을 도포 또는 섭취했을 때 피부에 나타날 수 있는 작용들과 상통하며, 단독 미용 소재로도 활용될 수 있는 가능성을 보여주었다. 본 연구에서는 콜라겐 펩타이드를 섭취 시 체내에 흡수되어 혈액을 통해 각 조직에 운반되는 분해 산물이 피부에 미치는 영향을 동물 시험을 통해 살펴보았는데, 향후 연구에서는 관절, 혈관과 같은 다른 생체 조직들에 미치는 영향에 대해서도 검증해 볼 필요가 있다.
유리규산과 자연산 석탄분진의 투여량과 관찰기간에 따른 폐조직과 hydroxyproline 량의 변화를 알아보기 위하여 대조군의 흰쥐에는 생리식염수 0.5ml를 기관지내에 주입하였고 실험군에는 생리식염수 0.5ml에 자연산석탄분진과 유리규산분진이 각각 10 mg, 30 mg, 50 mg씩 함유되도록 혼탁액을 만들어 이를 대조군과 같은 방법으로 주입한후 3주째와 20주째에 실험동물을 도살하여 젖은폐의 무게, 폐조직의 hydroxyproline량 그리고 폐의 조직학적 변화를 관찰한 바 아래와 같은 결과를 얻었다. 1) 자연산석탄분진 10 mg과 30 mg 투여군의 3주째를 제외한 모든 실험군의 젖은폐의 무게는 대조군에 비하여 유의하게 증가하였고(p<0.05), 유리규산 분진투여군에서는 20주째에 같은량의 자연산석탄분진을 투여한 군에 비하여 그리고 같은량의 유리규산분진을 투여한 군에서는 3주째에 비하여 20주째 젖은폐의 무게가 현저히 증가하였다(p<0.05). 2) 자연산석탄분진과 유리규산분진을 투여한 실험각군의 hydroxyproline 20주째에 대조군에 비하여, 그리고 동일한 분진의 같은량을 투여한 군에서는 3주째에 비하여 20주째 유의하게 증가하였으며(p<0.05), 유리규산분진 30 mg과 50 mg 투여군은 20주째에 같은량의 자연산석탄분진 투여한 군에 비하여 현저하게 증가하였다(p<0.05). 3) 분진의 투여량과 관찰기간이 같을때는 자연산석탄분진 투여군에 비하여 유리규산분진투여군에서 폐포간질과 폐포강내에 다형핵 백혈구, 섬유아세포, 대식세포가 증가하였고 폐포강내 삼출액이 관찰되었다. 진폐성결절은 3주째에 유리규산분진 30 mg과 50 mg 투여군에서만 관찰된 반면 20주째에는 모든 실험군에서 관찰되었다. 이상의 결과로 폐조직내 hydroxyproline 량의 증가와 진폐성 결절의 형성은 분진을 투여한 초기보다 후기에 현저하였고 자연산석탄분진보다 유리규산분진투여시 조기에 진폐증이 발생됨을 경험하였다.
Objectives: Although increased reactive oxygen species (ROS) is caused by stress accelerates collagen degradation, there was no data on the relationship between stress and urinary hydroxyproline (Hyp) and proline (Pro), a good marker of collagen degradation. The purpose of this study was to evaluate the relationship between depression, anxiety, and stress (DAS) and concentrations of urinary Hyp and Pro. Methods: 97 hospital employees aged 20 to 58 were asked to fill out comprehensive self-administrated questionnaires containing information about their medical history, lifestyle, length of the work year, shit-work and DAS. Depression Anxiety Stress Scale (DASS) was applied to evaluate chronic mental disorders. Urine samples were analyzed using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) with double derivatization for the assay of hydroxyproline and proline. Results: The mean value of Hyp and Pro concenturation in all subjects was $194.1{\pm}113.4\;{\mu}mol/g$ and $568.2{\pm}310.7\;{\mu}mol/g$. DASS values and urinary Pro concentrations were differentiated by sex (female > male, p < 0.05) and type of job (nurse > others, p < 0.05). In the stepwise multiple linear regressions, urinary Hyp and Pro concentrations were influenced by stress (Adjusted $r^2$ = 0.051) and anxiety and job (Adjusted $r^2$ = 0.199), respectively. Conclusions: We found that stress and anxiety were correlated with urinary Hyp and Pro concentrations. To identifying a definite correlation, further study in large populations will be needed.
The purpose of this study was to investigate nutrient intake and bone status in rural postmenopausal women in Korea. Ten postmenopausal women in An-Sung area participated in this study and they were divided into two groups ; women in group I had been postmenopausal for 4 years or less and those in group II had been postmenopausal for 5 years or more before the present study began. Their environmental factors and dietary intakes were surveyed through the personal interviews. Serum levels of calcium, phosphorus, parathyroid hormone(PTH), estradiol and urinary Ca, P, creatinine, hydroxyproline levels were measured from December 4 to December 27 in 1993. The reults of this study are summarized as follows : Average ages of group I and II were 54.8 and 57.2 years. Average menopausal ages of group I and II were 50.8 and 47.3 years. The nutrient intakes of subjects were higher than recommended dietary allowances(RDA) except calorie, protein, calcium, and vitamin A. The nutrient status did not show any significant difference between group I and II. Serum levels of Ca, P, PTH, estradiol and urinary P, creatinine excretion did not show any significant difference between group I and II, and all levels were in normal range. Urinary Ca excretion(p<0.05) and hydroxyproline excretion(p<0.01) were significantly lower in group I than in group II. Urinary Ca/creatinine(Ca/cr) and hydroxyproline/creatinine(Hpr/cr) rations were significantly higher in group II than in group I(p<0.01. And Hpr/cr levels of group I were in normal range, but most of subjects in group II were higher than 0.017 indicating sign of osteoporosis. Correlations between parameters showed that serum PTH adn urinary Ca, Ca/cr levels were positive related (p<0.01), and the years of the after menopausal year and urinary Hpr/cr was also positive related(p<0.05). The present results suggests that it is difficult to protect postmenopausal women's bone destruction having Korean usual diets. Therefore, to prevent osteoporosis with aging, minimizing the hormonal changes in postmenopausal women is needed as well as Ca supplementation and proper exercise before menopause begins.
피부 노화를 예방할 수 있는 기능성 화장품은 지질과산화를 초래하는 활성산소종(ROS)의 생성 억제와 제거 또는 collagen과 elastin의 사슬 절단 및 교차결합의 변형을 억제하는 효능이 있어야 한다. 본 연구에서는 피부 조직 중 malonedialdehydt (MDA)와 collagen이 항노화 작용이 있는 기능성 화장품의 검색 지표로서의 사용 가능성을 알아보고자 10, 25 주령 랫드의 정상 피부와 창상을 유도한 피부를 7일간 관찰하였다. 육안적인 관찰에서는 10 주령군의 11마리 랫드 중 10마리에서, 노령 랫드군의 11마리 중 8마리에서 창상이 폐쇄되었다. 10 주령 랫드와 비교했을 때 노령 랫드에서 흉터의 길이는 긴 반면에 외피의 폐쇄, collagen 밀도, 외피의 두께, 총 hydroxyproline (hyp)과 MDA 농도가 유의적으로 낮게 나타났다( p〈0.05 ∼ p 〈 0.005). 10 주령에서 진피의 규칙적으로 배열된 collagen 섬유다발과 많은 섬유아세포의 관찰과는 반대로 25 주령 이상 랫드에서는 collagen 섬유다발 사이에 많은 낭포, 소와 및 섬유아세포 수의 감소, 느슨한 외피와 진피의 결합과 얇은 외피가 관찰됨으로서 25 주령 이상의 랫드에서 감소된 hyp 양은 감소된 collagen 밀도 및 형태학적 변화와 일치하였다. 따라서 collagen 합성과 축적의 지표인 hyp의 측정은 항 피부노화 예방 및 개선제의 모니터링 연구에서 매우 유용하며 또한 피부 노화의 검객 지표로 사용이 가능하다고 사료된다.
In order to develop a suitable secondary renal disease model and diagnostic markers of renal disease in the rat, the change of PIIIP (aminoterminal procollagen III peptide) in serum and hydroxyproline levels in the renal tissue that reflect the synthesis of extracellular matrix (ECM) during development of experimental renal diseases were observed. Two types of experimental primary diseases, diabetes mellitus administrated by streptozotocin (STZ, 75 mg/kg, i.p.) and liver cirrhosis produced by bile duct ligation/scission (BDL/s) operation, were induced. The hydroxyproline level increased according to the high PIIIP and NCl(carboxyterminal procollagen IV peptide) in Western blot analysis as early as 1 week in the STZ treated-rat kidney. Increased renal ECM was observed at 15 weeks in STZ and BDL/s model under the microscopic examination. High PAS positive reaction was found in capillary basement membrane in STZ treated-rats and mesangium in BDL/s operated rats at this time, showing the histological characteristics of diabetic nephropathy and cirrhotic glomerulonephritis in human, respectively. Such secondary renal failure were supported by additional tests including urinalysis and renal function test. The serum PIIIP detected by ELISA was a useful parameter to estimate synthesis rate of renal ECM during development of renal disease without extrarenal fibrosis i.e. liver cirrhosis in rats. This study is proposed that STZ treatment or BDL/s operation may be a suitable experimental animal model for the induction and development of chronic secondary renal diseases. Morover, it was found that hydroxyproline level in renal tissues was a good parameter of the change of renal ECM at the early stage of the diseases without apparent histological changes. Especially, serum PIIIP could be a choice as a diagnostic or prognostic marker during the development of renal diseases in rats.
콜라겐은 포유동물의 가장 풍부한 동물성 단백짙로, 전체 단백질의 약 30 %를 차지하며, 결합 조직에 존재하며 대부분의 장기의 구조적 지지에 기여한다. Tripeptide (glycine-proline-hydroxyproline: INCI name Tripeptide-29) 는 collagen type 1의 주성분이며, palmitoyl tripeptide (palmitoyl-glycine-proline-hydroxyproline: INCI name Palmitoyl Tripeptide-29) 는 콜라겐의 합성을 촉진하는 항노화 불질로서 디자인된 합성소재이다 합성된 웹타이드 유도체는 HPLC를 이용하여 분식하였다. in vitro test를 통하여 콜라겐합성과 섬유아세포 증식 효능을 확인하였고, 비침습적 기기를 사용하여 피검자에 대한 8주간의 적용결과 피부주름과 탄력의 상당한 개선을 확인하였다. Palmitoyl tripeptide는 우수한 항노화 효능을 갖는 화장품 소재로 사료된다.
The functional properties of mechanically deboned chicken meat(MDCM) from whole carcass, whole carcass without exsanguination, neck without skin, leg hone, and upper back and rib were studied. Also, the effects of adding different levels of gelatin and MDCM to the comminuted meats were investigated. Proximate composition values of MDCM ranged from 54.2 to 68.6% moisture, 14.5 to 19.7% protein, 12.3 to 30.1% fat, and 1.1 to 1.3% ash. The MDCM from leg hone had a higher content of fat, and a lower contents of moisture and protein. The MDCM from neck without skin tended to be opposite to the MDCM from leg hone. The total pigment and myoglobin levels were highest in MDCM from whole carcass without exsanguination such as 3.83 and 0.29 rng /g, and those from the other parts were 1.58~2.93 mg /g and 0. 17~0.31 mg /g, respectively. The emulsifying capacity and water holding capacity were highest in MDCM from neck without skin which contained lower levels of fat, collagen and hydroxyproline, but a higher level of salt soluble protein. The emulsifying capacity of comminuted meat decreased as gelatin content increased. The extractability of hydroxyproline from gelatin showed a higher solubility in acidic solution. The MDCM could he added up to 20% level without detrimentally affecting functional properties of comminuted meats although they had less water holding capacity and cooking loss as the proportion of MDCM increased.
We observed that treatment with dimethyl α-ketoglutarate (DMK) increased the amount of intracellular α-ketoglutarate significantly more than that of α-ketoglutarate in HaCaT cells. DMK also increased the level of intracellular 4-hydroxyproline and promoted the production of collagen in HaCaT cells. In addition, DMK decreased the production of collagenase and elastase and down-regulated the expression of selected matrix metalloproteinases (MMPs), such as MMP-1, MMP-9, MMP-10, and MMP-12, via transcriptional inhibition. The inhibition of MMPs by DMK was mediated by the suppression of the IL-1 signaling cascade, leading to the attenuation of ERK1/2 phosphorylation and AP-1 transactivation. Our study results illustrate that DMK, an alkylated derivative of α-ketoglutarate, increased the level of 4-hydroxyproline, promoted the production of collagen, and inhibited the expression of selected MMPs by affecting the IL-1 cascade and AP-1 transactivation in HaCaT cells. The results suggest that DMK might be useful as an anti-wrinkle ingredient.
본 연구는 돈육 등급과 hydroxyproline(Hyp) 함량과의 상관관계를 규명하고 최종적으로 육가공품의 품질을 평가하기 위한 방법으로의 활용 가능성을 검토하기 위해 수행되었다. 그 결과 돈육 semitendinosus(사태)와 같은 특정 부위의 Hyp 함량은 돈육 등급과 상관 관계가 없는 것으로 나타났다. 그러나, 도체로부터 분리한 fresh ham(후지) 전체 부위를 분쇄하여 시료로 사용한 경우 $A{\sim}E$등급까지 등급이 낮아질수록 Hyp 함량이 유의적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었으며, D와 E등급을 혼합하였을 경우에도 E등급의 함량이 증가함에 따라 Hyp의 함량도 증가하는 것으로 나타났다. 또한, fresh ham(후지) 전체 부위를 원료로 하여 햄버거 패티를 제조한 후 Hyp 함량을 분석한 결과 등급이 낮아짐에 따라 Hyp 함량 역시 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때, 돈육 semitendinosus(사태)와 같은 특정 부위에 존재하는 Hyp의 함량은 돈육 등급과의 상관 관계를 확인할 수 없었으나, fresh ham(후지) 전체 부위를 대상으로 할 경우에는 등급에 따른 Hyp 함량과의 유의적 상관 관계가 성립될 수 있다고 판단되었다. 따라서, 육가공품의 제조시 원료용으로 많이 사용되고 있는 돈육의 경우 fresh ham(후지) 부위가 주로 사용되는 만큼 이상의 결과들은 최종적으로 육가공 제품의 품질을 평가하기 위한 기초 자료로 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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