Chondrocyte apoptosis has been recognized as an important factor in the pathogenesis of osteoarthritis (OA). Hydrogen peroxide ($H_2O_2$), which produces reactive oxygen species, reportedly induces apoptosis in chondrocytes. The ginsenoside $Rb_1$ (G-$Rb_1$) is the principal component in ginseng and has been shown to have a variety of biological activities, such as anti-arthritis, anti-inflammation, and anti-tumor activities. In this study, we evaluated the effects of G-$Rb_1$ on the mitochondrial permeability transition (MPT) and caspase-3 activity of chondrocyte apoptosis induced by $H_2O_2$. Cultured rat articular chondrocytes were exposed to $H_2O_2$ with or without G-$Rb_1$ and assessed for viability, MPT, Bcl-xL/Bax expression, caspase-3 activity, and apoptosis. The co-treatment with G-$Rb_1$ showed an inhibition of MPT, caspase-3 activity, and cell death. Additionally, the levels of the apoptotic protein Bax were significantly lower and the levels of the anti-apoptotic protein Bcl-xL were higher compared with $H_2O_2$ treatment alone. The results of this study demonstrate that G-$Rb_1$ protects chondrocytes against $H_2O_2$-induced apoptosis, at least in part via the inhibition of MPT and caspase-3 activity. These results demonstrate that G-$Rb_1$ is a potentially useful drug for the treatment of OA patients.
Antioxidants partially ameliorated the detrimental effects of reactive oxygen species (ROS) on sperm characteristics during in vitro storage. The objective of the present study was to investigate the single or synergetic antioxidative effect of curcumin and Vit. E on the characteristics of fresh boar sperm during in vitro storage. The sperm viability in curcumin, Vit. E supplementation and curcumin+Vit. $E+H_2O_2$ groups remained over 85.0% in 3 hr incubation period, but in 6 hr incubation period, curcumin+Vit. $E+H_2O_2$ groups was sharply dropped than those of curcumin and Vit. E group. The membrane intergrity in all evaluated groups except for $H_2O_2$ group did not significantly difference in 3 hr incubation period. The viability in curcumin or Vit. E supplementation were significantly increased than in curcumin+$H_2O_2$ and Vit. $E+H_2O_2$ group in 6 hr incubation period. The percentage of mitochondrial activity and acrosome intergrity obtained similar trends within same incubation periods irrespective of treatment. The lipid peroxidation of spermatozoal plasma membrane ranged from $11.6{\sim}17.5\;nM/l{\times}10^6$ and $14.0{\sim}19.0\;nM/l{\times}10^6$ in 3 hr and 6 hr incubation periods. In conclusion, curcumin or Vit. E surpplementation alone or cooperatively improved sperm viability index (motility, membrane intergrity, viability and survival rates) and fertility index (mitochondria activity, acrosome intergrity and lipid peroxidation) of fresh boar sperm, indicating that curcumin and Vit. E have a antioxidative properties through its scavenging activity against hydrogen peroxide.
Golgi SNAP receptor complex 1 (GS28) has been implicated in vesicular transport between intra-Golgi networks and between endoplasmic reticulum (ER) and Golgi. Additional role(s) of GS28 within cells have not been well characterized. We observed decreased expression of GS28 in rat ischemic hippocampus. In this study, we examined the role of GS28 and its molecular mechanisms in neuronal (SK-N-SH) cell death induced by hydrogen peroxide ($H_2O_2$). GS28 siRNA-transfected cells treated with $H_2O_2$ showed a significant increase in cytotoxicity under glutathione (GSH)-depleted conditions after pretreatment with buthionine sulfoximine, which corresponded to an increase of intracellular reactive oxygen species (ROS) in the cells. Pretreatment of GS28 siRNA-transfected cells with p38 chemical inhibitor significantly inhibited cytotoxicity; we also observed that p38 was activated in the cells by immunoblot analysis. We confirmed the role of p38 MAPK in cotransfected cells with GS28 siRNA and p38 siRNA in the cell viability assay, flow cytometry, and immunoblot. Involvement of apoptotic or autophagic processes in the cells was not shown in the cell viability, flow cytometry, and immunoblot analyses. However, pretreatment of the cells with necrostatin-1 completely inhibited $H_2O_2$-induced cytotoxicity, ROS generation, and p38 activation, indicating that the cell death is necroptotic. Collectively these data imply that $H_2O_2$ induces necroptotic cell death in the GS28 siRNA-transfected cells and that the necroptotic signals are mediated by sequential activations in RIP1/p38/ROS. Taken together, these results indicate that GS28 has a protective role in $H_2O_2$-induced necroptosis via inhibition of p38 MAPK in GSH-depleted neuronal cells.
Objectives : The purpose of this study is to examine the antioxidant effects on male mouse reproductive cells of the extract of Platycladi Semen. Methods : The extract was studied for diphenyl-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, cell viability by a modified MTT assay, the effects on $H_2O_2$-induced cytotoxicity by MTT assay, lipid peroxidation by malondialdehyde (MDA) formation and super oxide dismutase (SOD), respectively. Results : The results showed that the extract scavenged DPPH radical in a dose-dependent manner by up to 74.87%. The cell viability of the extract was within 72~96% on Leydig cells and GC-2 cells at concentrations of 1, 5, 10, 50 and 100 ug/ml. The hydrogen peroxide-induced cytotoxicity of Leydig cells was protected to 72.09% by the extract at concentration of 100 ${\mu}g/ml$. The hydrogen peroxide-induced lipid peroxidation of MDA formation was decreased to 1.80 and 1.65 nmoles/mg protein by the extract at concentrations of 50 and 100 ${\mu}g/ml$. The extract at all concentrations, SOD activity was not significantly changed. Conclusions : In conclusion, the extract of Platycladi Semen has antioxidant effects on Leydig cells and protect male reproductive system against oxidative stress.
The present study was conducted to examine the antioxidant activities and neuroprotective effects of methanolic extracts from Schizonepeta tenuifolia Briquet (STE). STE ($100\;{\mu}g/mL$) showed $43.33\;{\mu}M$ of total phenolic content, 64.43% of radical scavenging activity, and 0.157 of reducing power. In addition, the effect of STE on $H_2O_2$-induced DNA damage in human leucocytes was evaluated by the comet assay, where STE was a dose dependent inhibitor of DNA damage induced by $200{\mu}M$ of $H_2O_2$. The protective effect of STE against $H_2O_2$-induced oxidative damage on PC12 cells was investigated by an 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reduction assay and lactate dehydrogenase (LDH) release assays. After 2 hr of cell exposure to $H_2O_2\;(500\;{\mu}M)$, a marked reduction in cell survival was observed. However, this reduction was significantly prevented by $1-50\;{\mu}g/mL$ of STE. Therefore, these results suggest that STE could be a new antioxidant candidate against neuronal diseases.
Enzyme-assisted extraction is a cost-effective, safe, and efficient method to obtain bioactives from plant materials. During this study, 10 different marine algae from Sri Lanka were individually extracted by using five commercial food-grade carbohydrases. The enzymatic and water extracts of the seaweeds were analyzed for their antioxidant and anti-inflammatory activities. The highest DPPH, hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and intracellular $H_2O_2$ scavenging abilities were observed from the Celluclast extract of Sargassum polycystum (CSp). CSp exerted protective effects against oxidative stress-induced cell death in hydrogen peroxide-induced Chang cells and in model zebrafish. The Celluclast extract of Chnoospora minima (CCm) showed the strongest anti-inflammatory activity against lipopolysaccharide (LPS)-induced NO production in RAW 264.7 macrophages ($IC_{50}=44.47{\mu}g/mL$) and in model zebrafish. CCm inhibited the levels of iNOS, COX-2, $PGE_2$, and TNF-${\alpha}$ in LPS stimulated RAW 264.7 macrophages. Hence, CSp and CCm could be utilized in developing functional ingredients for foods, and cosmeceuticals.
생체는 산소를 소비하는 대사 과정 중에 초산화물(superoxide, $O_{2}$), 과산화수소($H_2O_2$), 수산 라디칼(OH)과 같은 다양한 활성산소(reactive oxygen)들을 생성하게 되며, 그 중에서도 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)는 biological membrane을 자유롭게 통과하며, 세포내에서 hydroxyl radical 등의 반응성이 큰 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)을 발생시키는 작용을 하는 강력한 산화제이다. 세포를 계대 배양 (5, 15, 25, 35 passage)하여 $H_2O_2$를 농도별(100 ${\mu}M$, 500 ${\mu}M$, 1 mM, 5 mM)로 처리하고, 또한 $H_2O_2$의 처리 시간(30 분, 1 시간)을 변화시킴으로써, Hepatoma 세포주에서 $H_2O_2$ 처리에 의한 Cu/Zn SOD의 발현을 Northern blot을 통하여 다음과 같이 분석하였다. 1)Hepatoma 세포주에서 시간별, 농도별로 산화제를 처리 했을 때 각각의 경우에서 발현양의 차이는 적었지만, 오랜 시간동안 고농도의 산화제에 노출시켰을 때 항산화 능력이 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 2)계대배양을 증가시키는 것은 노화가 진행된다는 것을 의미하므로, 산화제를 처리했을 때 25 passage에서 35 passage 단계에서 항산화 효소의 발현 정도가 급격히 감소되는 것으로 미루어 보아 이 단계에서 노화가 진행되었음을 추측할 수 있었다. 3)동일한 시간과 농도로 처리했을 때 각각의 passage의 발현 level에서 보이는 양상과는 다르게 35 passage에서는 500${\mu}M$이상의 농도를 1 시간동안 노출시켰을 경우에 Cu/Zn SOD가 거의 발현되지 않았으며, 30 분 동안 노출시켰을 때에는 500 ${\mu}M$의 농도까지 방어할 수 있는 능력을 가진 것으로 보인다.
최근 기능성과 친환경 화장품에 대한 관심이 증가하고 있으며, 이에 따라 안전하면서 효능이 우수한 식물 추출물을 활용한 소재 개발이 이루어지고 있는 실정이다. 따라서 본 연구에서도 주로 건강 기능성 소재로써 다양한 효능이 있는 것으로 알려진 그라비올라 추출물이 기능성 화장품 소재로써의 가능성을 확인하고자 하였다. 그라비올라 추출물의 항산화 활성을 확인하고자 총 폴리페놀과 총 플라보노이드 함량, DPPH radical 소거 활성을 측정하였고, HDF 세포에서의 세포 독성을 확인한 후 적정 농도에서 HDF 세포에 과산화수소($H_2O_2$)를 처리하여 산화적 스트레스에 대한 ROS 활성 억제 효과와 세포 보호 효과를 측정하였다. 본 실험 결과, 그라비올라 추출물은 항산화 지표가 되는 총 폴리페놀과 플라보노이드의 100g당 26.6 mg(CA)/100g, 14.3 mg(CA)/100g의 높은 함량을 확인하였으며, 높은 radical 소거 활성을 확인하였다. HDF 세포에 대한 세포 생존율을 측정한 결과, 모든 농도에서 유의한 세포 독성이 나타나지 않았으며, 추후 $100{\mu}g/mL$ 농도에서 실험하였다. $H_2O_2$로 유도된 HDF 세포에 ROS 활성 억제를 측정한 결과, 농도 의존적인 ROS 활성 억제 효과를 확인하였고, $H_2O_2$를 4 시간, 24 시간, 48 시간 동안 처리 후 그라비올라 추출물의 세포 보호 효과를 측정한 결과, $25{\mu}g/mL$ 농도에서 24시간까지 89.92%의 높은 세포 보호 효과를 확인하였다. 이와 같은 결과를 통하여 그라비올라 추출물은 항산화 활성이 우수하고, HDF 세포에 대한 독성이 거의 없으며, $H_2O_2$에 의해 발생하는 활성산소에 대한 효과적인 활성 억제 효과와 세포 보호 효과가 우수한 것으로 확인됨에 따라 항산화 및 세포 보호 효과를 가진 다양한 기능성 소재로서의 가능성을 확인하였다.
To evaluate the protective effect of Houttuynia cordata on hydrogen peroxide-induced oxidative DNA damage in HepG2 cell line, we used an alkaline single-cell gel electrophoresis (SCGE; comet assay). The DNA damage was analyzed by tail moment (TM) and tail length (TL), which used markers of DNA strand breaks in SCGE. The $100{\mu}g/ml$ of methanolic extract of Houttuynia cordata root showed significant protective effects (p < 0.01) against hydrogen peroxide-induced DNA damage in HepG2 cells and increased cell viability against hydrogen peroxide. The results of this study indicate that Houttuynia cordata root methanol extract acts as a potential antioxidant, and exhibits potential anticancer properties, which may provide a clue to find applications in new pharmaceuticals for oxidative stability.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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