The Potexvirus Alternanthera mosaic virus (AltMV) has multifunctional triple gene block (TGB) proteins, among which our studies have focused on the properties of the TGB1 protein. The TGB1 of AltMV has functions including RNA binding, RNA silencing suppression, and cell-to-cell movement, and is known to form homologous interactions. The helicase domains of AltMV TGB1 were separately mutated to identify which regions are involved in homologous TGB1 interactions. The yeast two hybrid system and Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) in planta were utilized to examine homologous interactions of the mutants. Helicase motif I of AltMV TGB1 was found to be critical to maintain homologous interactions. Mutations in the remaining helicase motifs did not inhibit TGB1 homologous interactions. In the absence of homologous interaction of TGB1, subcellular localization of helicase domain I mutants showed distinctively different patterns from that of WT TGB1. These results provide important information to study viral movement and replication of AltMV.
Jung, Yu Jin;Nam, Ki Hong;Kim, Tae Sung;Lee, In Hae;Cho, Yong-Gu;Kang, Kwon Kyoo
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.1
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pp.1-8
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2018
Meiosis is a specialized cell division, essential in most reproducing organisms to halve the number of chromosomes, thereby enabling the restoration of ploidy levels during fertilization. A key step in meiosis is homologous recombination, which promotes homologous pairing and generates crossovers (COs) to connect homologous chromosomes until their separation at anaphase I. These CO sites, seen cytologically as chiasmata, represent a reciprocal exchange of genetic information between two homologous non-sister chromatids. RAD51, the eukaryotic homolog of the bacterial RecA recombinase, plays a central role in homologous recombination (HR) in yeast and animals. Loss of RAD51 function causes lethality in the flowering plant, Arabidopsis thaliana, suggesting that RAD51 has a meiotic stage-specific function that is different from homologous pairing activity.
In vitro fertilization can be used for salvaging superior buffalo germplasm which otherwise goes waste after the slaughter of animals. This technology has also increased our basic understanding of growth of germ cells and embryos. The requirement of growing embryos is peculiar and stage specific. In the present study the cleavage and development of buffalo embryos were studied with homologous (buffalo) and heterologous (goat) oviductal cell co-culture systems. The cleavage rate improved significantly (p<0.01) in both homologous and heterologous co-culture as compared to control (55.3, 46.8 and 11.4%). The morula formation using homologous and heterologous oviductal cells also increased significantly as compared to control group (43.6, 21.9 & 1.9%). There was no blastula formation in control group, but addition of oviductal cells either from homologous or heterologous species significantly increased the blastula formation (9.5, 12.5%). The cleavage rate and embryo development was slightly better (non significant) in homologous as compared to heterologous oviductal cell culture. It was concluded that the use of oviductal cell co-culture (homologous and heterologous species) have significantly improved cleavage and development of buffalo embryos in vitro.
Ten strains of plasmid-harboring Bifidobacterium sp. were isolated from the feces of adults and children, and named as Bifidobacterium sp. GE1-GE8, ST, and SH5. These plasmids were categorized into three homologous groups (pKJ50-homologous, pKJ36-homologous, and non-homologous groups) according to Southern hybridization patterns using the formerly characterized bifidobacterial plasmids, pKJ50 and pKJ36, as probes. nine strains harboring the plasmids were shown to accumulate single-stranded DNA as a replication intermediate, based on the S1 nuclease treatment and Southern hybridization. These results suggest that the strains replicate by a rolling circle mechanism. Minimal inhibitory concentrations (MIC) of the isolated bifidobacteria against several antibiotics were determined. Two strains, GE2 and GE3, showed relatively high MiC values against tetracycline ($793.6{\mu}g/ml$) and erythromycin ($153.6{\mu}g/ml$), respectively. The tetracycline resistance of GE2 disappeared when the resident plasmid of GE2 was cured by ethidium bromide. These results show that pKJ36-homologous and pKJ50-homologous plasmids are prevalent among various Bifidobacterium strains and some Bifidobacterium plasmids appear to code for antibiotic resistance.
In spite of multiple technical advances, large amount of homologous blood transfusions usually required for open heart surgery. Because the complications associated with transfusion are increased as the number of homologous transfusion increase, especially as transfusion related acquired immunodeficiency syndrome has appeared in recent years, such risks have stimulated recent interest in the use of autologous blood. This is a report concerning 23 consecutive adult autologous donors[autologous group] who had elective cardiac surgery at the Yonsei Cardiovascular Center, Yonsei University College of Medicine, from march, 1990 to august, 1991. A similar group of 23 patients operated during the same periods without autologous blood donation was used for comparison [control group] to investigate the effect of predonated autologous blood in decreasing the need of homologous transfusion and to investigate predonation related adverse effect. Autologous group consisted of 15 men and 8 women. Control group consisted of 7 men and 16 women. There were no significant differences in mean age, hemoglobin, hematocrit, RBC count, platelet count and prothrombin time on admission between the two groups. The mean autologous blood donation in autologous group was 2.2 units. In 10[43.5%] of the 23 atuologous group patients, no homologous RBC products transfusion was required. However, all patients required homologous transfusion in control group. In autologous group, patients required less homologous RBC products than control patients[2.1 units versus 5.3 units; p<0.001]. There were no significant differences in hemoglobin, hematocrit, RBC count and platelet count between the two groups before discharge. There were no serious complications related to preoperative blood donation, although 3 patients complained of mild dizziness during donation We conclude that preoperative autologous predonation of blood is a safe and effective method for reducing homologous transfusion and is recomended in all patients undergoing elective cardiac surgery except limited contraindications such as severe aortic valve stenosis or unstable angina pectoris.
The homology among the genes coding for degradation of bipheny(BP) and 4-chlorobiphenyl(4CB) was comparatively analyzed by Southern hybridization in several BP/4CB degrading bacterial strains. As the hybridization results of their genomic DNAs with pcbABCD as the DNA probe, the group of Pseudomonas sp. DJ-12. P08 and P27 strain was separated by the group of P20 and P1242 strains. The P. pseudoalcaligenes KF707 showed the hybidization signal which was homologous to the group of DJ-12, but they had different restriction endonuclease sites. The pcbAB genes in pCUl recombinant plasmid from Pseudomonas sp. DJ-12 appeared to be homologous to pchAB genes in pKTF20 cloned from P. pseudoalcaligenes KF707, but the C genes in both strains were not homologous. The bphABC in pKTF20 showed the signals homologous to the cbp ACB in pAW6194 cloned from P. putida OU83, but homologous signal was not found botween the pcbABCD genes in pCUl and the cbpADCB genes in pAW6194 recombbinant plasmid.
Fusarium verticillioides (teleomorph Gibberella moniliformis) is associated with maize worldwide causing ear rot and stalk rot, and produces fumonisins, a group of mycotoxins detrimental to humans and animals. While research tools are available, our understanding of the molecular mechanisms associated with fungal virulence and fumonisin biosynthesis in F. verticillioides is still limited. One of the restraints that hampers F. verticillioides gene characterization is the fact that homologous recombination (HR) frequency is very low (<2%). Screening for a true gene knock-out mutant is a laborious process due to a high number of ectopic integrations. In this study, we generated a F. verticillioides mutant (SF41) deleted for FvKU70, a gene directly responsible for non-homologous end-joining mechanism, with the aim of improving HR frequency. Here, we demonstrate that FvKU70 deletion does not impact key Fverticillioides phenotypes, e.g., development, secondary metabolism, and virulence, while dramatically improving HR frequency. Significantly, we also confirmed that a high percentage (>85%) of the HR mutant strains harbor a desired mutation with no additional copy of the mutant allele inserted in the genome. We conclude that SF41 is suitable for use as a type strain when performing high-throughput gene function studies in F. verticillioides.
An efficient method for the in vitro reassembly of homologous DNA sequences is presented. The proposed method involves obtaining single strands of homologous genes and hybridizing them to obtain partially hybridized heteroduplex DNA; cleaving the single-stranded regions of the heteroduplex DNA using S1 nuclease to generate double-strand DNA fragments; denaturing the double-strand DNA fragments to generate single-strand DNA fragments; conducting a series of polymerase chain reactions (PCR) using the single-strand DNA fragments as internal primers and a mixture of homologous DNA as templates to obtain elongated reassembled DNA; and finally, amplifying the reassembled DNA by a PCR using terminal primers. As a result, DNA reassembly could be achieved between homologous genes with a sequence similarity as low as 78%.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
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v.20
no.9
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pp.2800-2811
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1996
The deformation of a structure shall be called homologous, if a given geometrical relation holds, for a given number of structural points, before, during, and after the deformation. Some researchers have utilized the idea on structural design with finite element method. The approaches use the decomposition of the FEM equation or equality of eqality equations to obtain homologous deformation. However, weight reduction and response constraints such as stress, displacement or natural frequency cannot be considered by those theories. An optimization method solving the above problems is suggested to gain homologous deformation. Homology constraints can be considered under multiple loadindg conditions as well as a single loading condition. Homology index is defined for the multiple loading conditions Examples are solved to present the performances of the method.
In February 1991 I initiated a blood conservation program that included hemodilution, use of a cell conservation device to concentrate diluted blood from operative field and from mediastinal shed blood, acceptance of a minimal hematocrit level of 25% in stable patients, and strict avoidance of use of blood products without definitive indication. A retrospective study to evaluate the effects of blood conservation program was designed to compare the amount of homologous transfusion, hematologic data, and postoperative outcome in patients operated on before and after initiation of blood conservation program. Patient characteristics were not different between two groups, before[n = 18] and after[n = 42] initiation of the program. The significant decrease of homologous transfusion[5.2 vs 1.4 units] and the marked increase of nontransfused patients[none vs 57%] in experimental group were due to marked decrease in homologous transfusion during the operation[4.6 vs 0.7 unit]. I conclude that with strict intraoperative blood conservation program, cardiac patients can be operated on with minimal homologous transfusion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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