In this study, the genetic diversities of multi-resistant Salmonella typhimurium (ST) isolates were analyzed via the application of both pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and Polymerase chain reaction (PCR) analysis methods, using 6 kinds of primers (REP, ERIC, SERE, BOX, P-1254 and OPB-17). And their discriminative abilities (DA) were also compared in order to determine the most effective and reliable analysis method. 118 S. typhimurium isolates, cultured from diverse animals and human patients in Korea beginning in 1993, were analyzed and subjected to a comparison of Simpson's index of diversity (SID), using both PFGE and PCR methods. PFGE by XbaI enzyme digestion allowed for discrimination into 9 pulsotypes, with high SID values (0.991) on the genomic DNA level. This shows that PFGE is a very discriminative genotypic tool, and also that multiple clones of S. typhimurium isolates had existed in domestic animals and humans in Korea since 1993. However, we could ultimately not to trace the definitive sources or animal reservoirs of specific S. typhimurium isolates examined in this study. Depending on the SID values, the combined method (7 kinds of method) was found to be the most discriminative method, followed by (in order) SERE-PCR, REP-PCR, ERIC-PCR, PFGE & OPB-17 (RAPD), P-1254 (RAPD), and BOX-PCR at the $80\%$ clone cut-off value. This finding suggests that the REP-PCR method (which utilizes 4 primer types) may be an alternative tool to PFGE for the genotyping of S. typhimurium isolates, with comparable cost, time, and labor requirement. The establishment of a highly reliable and discriminatory method for epidemiologic analysis is considered necessary in order for researchers to trace the sources of specific pathogens and, consequently, to control and prevent the spread of epidemic S. typhimurium isolates to humans.
Siddiqui, Kehkashan;Mondal, Aftab Hossain;Siddiqui, Mohammad Tahir;Azam, Mudsser;Haq., Qazi Mohd. Rizwanul
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.46
no.2
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pp.135-144
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2018
The rapid increase in number and diversity of Extended Spectrum ${\beta}$-Lactamases (ESBLs) producing Enterobacteriaceae in natural aquatic environment is a major health concern worldwide. This study investigates abundance and distribution of ESBL producing multidrug resistant Enterobacteriaceae and molecular characterization of ESBL genes among isolates from highly polluted stretch of river Yamuna, India. Water samples were collected from ten different sites distributed across Delhi stretch of river Yamuna, during 2014-15. A total of 506 non duplicate Enterobacteriaceae isolates were obtained. Phenotypic detection of ESBL production and antibiotic sensitivity for 15 different antibiotics were performed according to CLSI guidelines (Clinical and Laboratory Standard Institute, 2015). A subset of ESBL positive Enterobacteriaceae isolates were identified by 16S rRNA gene and screened for ESBL genes, such as $bla_{CTX-M}$, $bla_{TEM}$ and $bla_{OXA}$. Out of 506 non-duplicate bacterial isolates obtained, 175 (34.58%) were positive for ESBL production. Susceptibility pattern for fifteen antibiotics used in this study revealed higher resistance to cefazolin, rifampicin and ampicillin. A high proportion (76.57%) of ESBL positive isolates showed multidrug resistance phenotype, with MAR index of 0.39 at Buddha Vihar and Old Delhi Railway bridge sampling site. Identification and PCR based characterization of ESBL genes revealed the prevalence of $bla_{CTX-M}$ and $bla_{TEM}$ genes to be 88.33% and 61.66%, respectively. Co-occurrence of $bla_{CTX-M}$ and $bla_{TEM}$ genes was detected in 58.33% of the resistant bacteria. The $bla_{OXA}$ gene was not detected in any isolates. This study highlights deteriorating condition of urban aquatic environment due to rising level of ESBL producing Enterobacteriaceae with multidrug resistance phenotype.
Park, Jiyoung;Lee, Seuk-Ki;Park, Hye-Young;Choi, Hye-Sun;Cho, Dong-Hwa;Han, Sang-Ik;Lee, Kyung Ha;Oh, Sea-Kwan
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.286-286
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2017
We conducted to compare the characteristics of rice flours according to the different milling processes. Five rice varieties (Oryza sativa L.) with different amylose content were prepared by wet and dry milling processes. The moisture contents of wet-milled rice flours (WMR) was mostly three-time higher than those of dry-milled flours (DMR). Water absorption index (WAI), water solubility index (WSI) and swelling power (SP) increased in proportion to temperature ($50-90^{\circ}C$). WAI, WSI, SP of DMR showed higher value than those of WMR. Baeokchal (BOC) which is waxy rice cultivar was significantly high level of WSI. Pasting properties of DMR except BOC cultivar resulted in higher peak viscosity, trough viscosity, final viscosity and Setback. The levels of resistant starch in the four cultivars except Dodamssal (DDS) were under 1% irrespective of Milling processes, whereas the resistant starch contents of DMR and WMR in DDS was 9.18 and 6.27, respectively. Damaged starch content of WMR were less than those of DMR, moreover, negative correlation was observed between amylose content and damaged starch of rice cultivars. These results suggest that the properties of rice flour varied depending on the milling methods and varieties, and it could be a reference for selecting the appropriate processing purposes.
Mixture study of bifenthrin and prothiofos was conducted to control insecticide resistant diamondback moth (DBM), Plutella xylostella, which had shown 581, 18, 19, 11 fold resistance to fenvalerate, cypermethrin, furathiocarb, and prothiofos in Chinju strain, respectively and 38 and 9 fold resistance to fenvalerate and furathiocarb in Seosang strain, respectively. Optimal mixture ratios of bifenthrin and prothiofos was selected against Seosang strain of DBM by leaf dipping method in laboratory and by field test. Maximum co-toxicity coefficient by dipping method was shown at a ratio of 1:50 mixture of bifenthrin 1EC and prothiofos 50EC in active ingredient(a.i.) by 243.2 and then suddenly decreased. The mixed formulation from the dipping test was examined at the cabbage field of Seosang, Hamyang. Although insecticides were reduced to half, control efficacy was similar to farmer's conventional method. In addition, the mixture combination was also more effective against Chinju DBM population which had very high level of resistance to several representative insecticides. Mixture methods of insecticides will be effective countermeasures to the resistance problem of pests.
Kim, Mi-Jin;Lee, Do-Kyung;Jang, Seok;Yang, Hwan-Jin;An, Hyang-Mi;Baek, Eun-Hye;Ha, Nam-Joo
YAKHAK HOEJI
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v.52
no.6
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pp.434-440
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2008
The purpose of this research was to investigate the microbiological quality and antimicrobial susceptibilities of the ready-to-eat side dishes, which are were collected from the grocery stores, big markets, and department stores in Seoul throughout November, 2007. Of total 124 samples, presence of staphylococci and enteric bacilli was observed in 38 samples (31%) and 53 samples (43%), respectively. And 30 samples (24%) were shown to be of unsatisfactory quality for total bacterial count (>$10^5$). Antimicrobial susceptibilities of the staphylococci isolated from the side dishes were tested for six different antimicrobial agents, which are in widespread clinical use in Korea, as well as four new antimicrobials, daptomycin, linezolid, quinupristin/dalfopristin and tigecycline. As a result, the staphylococcal isolates were found to be resistant to oxacillin (${MIC}_{90}$, >128 ${\mu}g$/ml), teicoplanin (${MIC}_{90}$, >128 ${\mu}g$/ml), mupirocin (${MIC}_{90}$, >128 ${\mu}g$/ml), linezolid (${MIC}_{90}$, 128 ${\mu}g$/ ml) and quinupristin/dalfopristin (${MIC}_{90}$, 32 ${\mu}g$/ml). Especially, some of the staphylococcal isolates exhibited high level and multi-drug resistance. Moreover, these bacteria were also resistant to new antimicrobials, except tigecycline.
Kim, Min-Ji;Lee, Si-Won;Lee, Do-Kyung;Park, Jae-Eun;Kang, Joo-Yeon;Park, Il-Ho;Shin, Hae-Soon;Ha, Nam-Joo
YAKHAK HOEJI
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v.57
no.2
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pp.132-138
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2013
Acinetobacter baumannii is gram-negative bacilli that can be widely found in environments. Recently, A. baumannii emerged as a serious nosocomial infection. A total of 92 A. baumannii were isolated from hospitalized patients in Seoul, Korea, between December 2010 and April 2011. Antimicrobial susceptibility testing was investigated using CLSI agar dilution methods. Tigecycline non-susceptible A. baumannii isolates were investigated by repetitive extragenic palindromic sequence-based PCR (rep-PCR). Pulsed-field gel electrophoresis was performed to determine the epidemiological relationships. All clinical isolates showed high-level resistance to the most commonly used antibiotics: Ciprofloxacin (87.0%), Ampicillin/sulbactam (82.6%), Cefotaxime (81.5%), Ceftazidime (80.4%). Moreover, 50.0% of these isolates were non-susceptible to tigecycline. When evaluated by RAPD analysis, generated distinct band ranging in size from 1kb to 8k band varying from 4 to 10 bands. Stricter surveillance and more rapid detection are essential to prevent the spread of multi drug resistant A. baumannii.
An approximately 10-fold higher level of adherence of Salmonella typhimurium strain TML to Int-407 cells was observed with organisms grown in Luria broth or in high-iron containing medium than those grown in low-iron containing medium. Iron specifically enhanced adherence, while other cations such as calcium, cobalt, copper, potassium, magnesium and manganese did not. It was suggested that iron did not act as a passive ligand - probably it stimulated production of bacterial factors necessary for adherence. A similar pattern of iron modulation of adhesiveness was also seen in Salmonella mutants with single or different combinations of multiple mutations in genes encoding the mannose sensitive hemagglutinin (type 1 fimbriae), mannose resistant hemagglutinin and flagellum. The adhesiveness of an isogenic fur mutant was modulated by iron in a manner similar to the wild-type strain, suggesting that iron modulation of adherence is independent of the fur gene product.
Purpose: To develop fat-free dressing containing a resistant starch (RS) as a dietary fiber, the viscosity and stability of various type RSes prepared from wheat, maize, potato, rice, waxy rice, and amaranth starches were investigated by using Brookfield viscometer. The shape of RS granule in the dressing during storage was also observed. Methods: The viscosity of fat free dressing with different retrograded RS3 (RS3V) prepared from waxy rice starch with 0.1% lemon vinegar and ascorbate mixed solution had higher RS3 that was maintained constant during storage. Annealing and heating prior to cross-linking, and heating after cross-linking increased RS level of RS4 type starches. Results: The viscosities and stabilities of dressings with RS were different depending on starch sources and RS preparation conditions. The heated RS4 (HRS4) increased in viscosity and stability with RS4 addition. Especially the fat-free dressings with HRS4 prepared from rice and waxy rice starches maintained stability regardless of separation after one month storage with only 7% separation after 6 month storages. The shape of RS4 granule in acidic medium of dressing did not change until 6 months. Conclusion: In this study, RS4 made by the rice and waxy rice starches showed high viscosity and maintained stability of the fat-free dressings during storage.
Bacterial blight is one of the most serious diseases of rice (Oryza sativa L.), and it has been known that Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) causes this disease symptom. To develop resistance rice cultivars against Xoo, 3,000 lines of $M_3$ mutants, which were irradiated with gamma ray, were tested by 'scissor-dip method' primarily, and 191 putative resistant lines were selected. In $M_4$ generation, these lines were screened again with various ways such as measuring of symptom of bacterial blight in leaf, number of tiller, fresh weight, and phenotypic segregation ratio in next generation. Finally, six resistance lines were selected. RT-PCR analysis revealed that these lines displayed high level of R-genes such as Xa21, Pi36, and Pi-ta. These results indicate that mutations by gamma ray cause disruptions of regulatory signal transduction systems of these R-genes. Furthermore, these selected mutants could be useful for the development of rice cultivar resistant to Xoo.
Objective: The present study aimed to investigate the occurrence and species of coagulase-positive staphylococci (CoPS) and coagulase-negative staphylococci (CoNS) in retail pork meat samples collected during nationwide monitoring. The staphylococcal isolates were characterized for antimicrobial and zinc chloride resistance and enterotoxigenic potential. Methods: A total of 260 pre-packaged pork meat samples were collected from 35 retail markets in 8 provinces in Korea for isolation of staphylococci. Antimicrobial and zinc chloride resistance phenotypes, and genes associated with the resistance phenotypes were determined on the isolates. Furthermore, the presence and distribution of 19 staphylococcal enterotoxin (SE) genes and enterotoxin-like genes among the pork-associated staphylococci were determined by multiplex polymerase chain reaction-based assays using the specific primer sets. Results: A total of 29 staphylococcal strains (29/260, 11.1%) were isolated from samples of retail pork meat, 24 (83%) of which were CoNS. The four CoNS species identified were S. saprophyticus (n = 16, 55%), S. sciuri (n = 3, 10%), S. warneri (n = 3, 10%), and S. epidermidis (n = 2, 7%). Among the 29 isolates, four methicillin-resistant CoNS (MR-CoNS; three S. sciuri and one S. epidermidis) and one methicillin-resistant CoPS (MR-CoPS; one S. aureus) were identified. In addition, a relatively high level of tetracycline (TET) resistance (52%) was confirmed in CoNS, along with a predominant distribution of tet(K). The most prevalent SEs were sep (45%), and sen (28%), which were carried by 81% of S. saprophyticus. Conclusion: These findings suggest that CoNS, especially S. saprophyticus strains, in raw pork meat could be a potential risk factor for staphylococcal food poisoning (SFP), and therefore, requires further investigation to elucidate the role of SEls in SFP and virulence of the pathogen. Our results also suggest that CoNS from raw pork meat may act as a source for transmission of antimicrobial resistance genes such as staphylococcal cassette chromosome mec and tet(K).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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