High concentration of glutathione(GSH) has been found in some species of yeast, of which Saccharomyces cerevisiae is used for commercial fermentative production. In this study, we have investigated the optimal conditions of production which could increase the GSH productivity and used it to maximize the production of GSH in fed-batch culture of Sacchromyces cerevisiae. Fermentation process have been also real time monitored by a 2-dimensional fluorescence sensor.
Nitric oxide (NO), products of activated macrophages, have a great impact on the regulation of cytokine production. The role of NO in non-specific host cells is commonly accepted. On the contrary, its role as an immuno-regulatory molecule is still controversial. In this study, we have investigated the effect of NO on the production of cytokines from murine splenocytes and macrophages. S-nitroso-L-glutathione inhibited the release of both interferone-$\gamma$ and interleukin-2 produced by Th1 cells and tumor necrosis factor-$\alpha$ and interleukin-1$\beta$ produced by macrophages, but did not affect the release of interleukin-4 and interleukin-10 produced by Th2 cells. These results suggest that NO exerts a down-regulatory effect on the secretion of cytokines from Th1 cells and macrophages which are implicated in immune response. Thus, NO may have an important role as an immune-modulatory as well as effector molecule in the immune system.
This experiment was conducted to investigate the effect of arsenic ($As^{III}$) on lipid peroxidation, glutathione content and antioxidant enzymes in growing pigs. Ninety-six Duroc-Landrace-Yorkshire crossbred growing pigs (48 barrows and 48 gilts, respectively) were randomly assigned to four groups and each group was randomly assigned to three pens (four barrows and four gilts). The four groups received the same corn-soybean basal diet which was supplemented with 0, 10, 20, 30 mg/kg As respectively. Arsenic was added to the diet in the form of $As_2O_3$. The experiment lasted for seventy-eight days after a seven-day adaptation period. Malondialdehyde (MDA) levels, glutathione (GSH) contents and superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR) and glutathione-S-transferase (GST) activities were analyzed in serum, livers and kidneys of pigs. The results showed that pigs treated with 30 mg As/kg diet had a decreased average daily gain (ADG) (p<0.05) and an increased feed/gain ratio (F/G) (p<0.05) compared to the controls. The levels of MDA significantly increased (p<0.05), and the contents of GSH and the activities of SOD, CAT, GPx, GR and GST significantly decreased (p<0.05) in the pigs fed 30 mg As/kg diet. The results indicated that the mechanism of arsenic-induced oxidative stress in growing pigs involved lipid peroxidation, depletion of glutathione and decreased activities of some enzymes, such as SOD, CAT, GPx, GR and GST, which are associated with free radical metabolism.
The objective of this study was to investigate the effect of selenium (Se) on in vitro development of bovine embryos. In CR1BSA, FBS-free medium, the bovine embryos could not proceed past the developmental block more efficiently to morula stage than in chemically undefined media. Addition of glutathione precursor, cysteine, with $\beta$-mercaptoethanol did not improve the development in chemically defined medium and neither did glutathione alone. Exogenous selenium improved the embryonic development to the morula and blastocyst stages at 6 days post-insemination (dpi) significantly (67.1% vs 57.5%, p<0.05), and blastocyst stage at 8 dpi (30.1% vs 20.5%, p>0.05). These improvements might be induced by elevated glutathione peroxidase activity due to addition of Se, and a possible mechanism of selenium to elevate the activity of glutathione peroxidase is discussed.
Garlic has been known to be effective against the gastrointestinal diseases which can be induced by production of oxygen-derived free radical. It has been shown that bamboo salt is effective on the treatment and prevention of various gastrointestinal disorders. Bamboo salt is a processed salt invented by a Korean, ll-Hoon Kim. It has been reported that garlic and bamboo-salt are useful to the treatment of gastric disorders in Korea. To clarify the protective mechanism of the garlic-bamboo salt mixture, the gas-tropathy was induced in rats with alcohol-salicylate and the activities of the free radical scavenging enzymes were examined. In this study, we found that the garlic-bamboo salt mixture reduced the severity of hemorrhagic lesion in gastric mucosa in the rats. In addition, the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR) were significnatly increased and the total content of GSH was recovered. From those results, we concluded that the protective effect of the garlic-bamboo salt mixture on gastropathy in rats is its ability to recover the level of GSH and to increase the activities of the free radical scavenging enzymes (SOD, GPx, GR).
In the present study, to determine whether the antioxidative components of Korean red ginseng protect against radiation damage and the possible relationship among the radioprotective effects and antioxidant actions, the effects of total saponin (200 mg/kg, ip) and lipophilic fraction (200 mg/kg, oral) preferment of mice on the survival ratio, major antioxidant enzymes (SOD, catalase and glutathione peroxidase) activities, glutathione levels and lipid peroxidation in the liver were exiled for 2 weeks after whole ${\gamma}$-body ${\gamma}$-irradiation (6.5 Gy). The 30-day survival ratio increased from 10% to 57% and 40% for mice treated with total saponin and lipophilic fraction, respectively. On day 14 after ${\gamma}$-irradiation, the ginseng total saponin pretreatment produced a slight increase of antioxidant enzymes activities and significantly Increased reduced glutathione (GSH) contents (p<0.05) in the liver compared with non-treated group. Pretreatment with ginseng total saponin significantly deceased GSSG/total GSH ratio (p<0.05) without change of GSSG in the liver and inhibited the radiation-induced incense in the hepatic malondialdehyde levels. (p<0.05) In these results, GSH plays an important role in the liver in several detoxifications and the reduction of lipid peroxides. Thus, it appears that total saponin of red ginseng exerts its radioprotective effect by accelerating the production of endogenous antioxidants, such as glutathione from radiation induced damages and thereby oxygen free radicals.
The antioxidant and anti-inflammatory protective effects of $\beta$-glucan from barley on RAW 264.7 murine macrophage cells induced by lipopolysaccharide (LPS) were examined. The RAW 264.7 murine macrophages were preincubated with various concentrations ($0-200\;{\mu}g/mL$) of $\beta$-glucan and stimulated with LPS to induce oxidative stress and inflammation. The $\beta$-glucan treatments were found to reduce thiobarbituric acid-reactive substance (TBARS) accumulation, and enhance glutathione levels and the activities of antioxidative enzymes, including superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione reductase, and glutathione peroxidase (GSH-px) in the LPS-stimulated macrophages as compared to the LPS-only treated cells. Nitric oxide (NO) production was significantly suppressed in a dose-dependent manner (p<0.05) with an $IC_{50}$ of $104\;{\mu}g/mL$. Further treatment with $\beta$-glucan at $200\;{\mu}g/mL$ suppressed NO production to 2% of the LPS-control, and suppressed the levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) protein and mRNA in a dose-dependent manner. The specific DNA binding activity of nuclear factor ${\kappa}B\;(NF{\kappa}B)$ was significantly suppressed by $\beta$-glucan treatment with an $IC_{50}$ of $220\;{\mu}g/mL$ in a dose-dependent manner. Finally, barley $\beta$-glucan ameliorates NO production and iNOS expression through the down-regulation of $NF{\kappa}B$ activity, which may be mediated by attenuated oxidative stress in RAW 264.7 macrophages.
The synthesis of betalain in hairy root cultures of Phytolacca esculenta van Houtte required the light, but the growth of hairy roots was inhibited 5 times under light condition(1500 1X) compared to dark condition. To investigate the growth inhibition of hairy roots under light condition, we surveyed the effects of several antioxidants on growth and betalain production if suspension cultures of hairy roots was increased 1.2-1.4 times under dark condition and 1.3-1.9 times under light condition by the treatment of ascorbic acid, glutathione, $\alpha$-tocopherol, sodium pyrosulfate and propylgallic acid. The betalain production was increased 1.2-2.1 times by antioxidants under light condition. The combination treatment of antioxidants didn't have any significant effect on the growth of hairy roots and betalain synthesis. The antioxidants of the betalain production were more effect under blue light than others. It was discussed that the endogenous oxidants may be produced under blue light.
Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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2003.10b
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pp.189-189
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2003
Recent studies suggest that inflammatory events are implicated in a variety of human diseases including cancer and neurodegenerative diseases. It has been reported that expression of inducible cyclooxygenase (COX) and nitric oxide (NO) synthase and subsequent production of prostaglandins (PG)s and NO, respectively are elevated in many inflammatory disorders.(omitted)
Glutathione S-transferase is known to play a crucial role in detoxification in many cases. To develop a herbicide detection biosensor, we in this study attempted to immobilize glutathione S-transferase enzyme on solid supports, polystyrene and agarose, and Na-alginate. These matrixes were attractive materials for the construction of biosensors and might also have utility for the production of immobilized enzyme bioreactors. We also compared the activities of glutathione-S-transferase immobilized OsGSTF3 and free OsGSTF3. The specific activity of the free enzyme in solution was 3.3 higher than the immobilized enzyme. These results suggest that 50% of the enzyme was bound with the catalytic site in polystyrene-alkylamine bead and immobilized enzymes showed 80% remaining activity until 3 times reuse.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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