Cytotoxicity of glucose oxidase(GO) and cardioprotective effect of Salviae Multiorrhizae Radix(SMR) against GO-induced cardiotoxicity were measured for evaluation of cardiotoxicity on cultured mouse pulmonary endotherial cells(PEC) by MTT assay after PEC were cultured for 8 hours at various concentrations of GO. GO was toxic in a time and dose-dependent manner on cultured PEC after PEC were grown for 8 hours in media containing 1~60mU/ml GO. While, cultures were pretreated with 60 μg/ml SMR for 2 hours increased remarkably cell viability. From the above results, it is suggested that GO is toxic on cultured PEC by the decrease of cell viability, and herb medicine such as SMR is very effective in the prevention of vascular toxicity induced by GO.
Fructosyltransferase와 glucose oxidase의 혼합효소계를 이용한 고순도 fructo-oligosaccharides 생산반응에서의 수학적 모델을 제안하고 실험적으로 검증한 결과 실험치와 모델 값이 서로 잘 일치하였다. 혼합 효소계에서 두 효소의 kinetic parameters를 구한 결과, fructosyltransferase 단일 효소계에서의 값들에 비해 $K_m$ 값들은 감소하였고, $K_m,\;V_{max}$값들은 증가하였다. 혼합 효소계의 반응메카니즘은 전체적으로 Michaelis-Menten kinetics로 표현할 수 있었고, 제안된 모델을 이용하여 고순도 fructo-oligosaccharides 생산에 이상적인 설탕농도를 예측할 수 있었다.
It has been suggested that oxidative stress of reactive oxygen species(ROS) may play an important role in the pathogenesis of neurological disorder. The aim of this study was to elucidate the oxidative stress of glucose oxidase(GO) in the cultured mouse spinal motor neurons and the preventing effect of Benincasae Semen(BS) on ROS-induced neurotoxicity. Cytotoxic effect of GO and protective effect of BS were performed by MTT assay. 30mU/ml GO decreased cell viability in dose-and time-dependent mannner, and BS diminished GO-induced neurotoxicity in these cultures. From above the results, ROS such as GO has toxic effect, and herb extract of BS is very effective against GO-induced neurotoxicity in cultured spinal motor neurons of neonatal mouse.
In this work fiber-optic biosensor that has been used in medical applications was developed. And we can monitored the concentration of glucose and lactate in blood sample by using developed fiber-optic glucose and lactate sensor. Glucose oxidase(GOD) and Lactate oxidase(LOD) were immobilized by using acrylamide adhesive and zeolite on the tip of the optic fiber.
Lin, S.C.;Chen, M.C.;Huang, A.J.;Salem, B.;Li, K.C.;Chou, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제13권6호
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pp.748-756
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2000
Effects of xanthine (X), xanthine oxidase (XO), and catalase (C), $H_2O_2$, and carbohydrates on sperm capacitation, acrosome reaction, and fertilizing ability in vitro were examined. Glucose alone, but not fructose, supported the maximum rate of sperm capacitation and acrosome reaction. However, in the combination of X, XO, and C (XXOC) or $H_2O_2$, fructose alone also supported maximum capacitation, acrosome reaction, and fertilization. Either insufficient or excessive amounts of $H_2O_2$ decreased sperm capacitation and the acrosome reaction. In order to understand how glucose generates $H_2O_2$ or other reactive oxygen species in sperm cells, 6-aminonicotinamide, an inhibitor of the pentose-phosphate pathway (PPP), and apocynin, an inhibitor of NADPH oxidase, were added to sperm suspensions in glucose-containing medium. Results appeared that sperm capacitation, acrosome reaction, and fertilization were consequently inhibited by either one of these compounds. These inhibitory effects were nullified by addition of XXOC. These results support the hypothesis that glucose, in addition to being a substrate for glycolysis, facilitates sperm capacitation and the acrosome reaction by generating reactive oxygen species through G-6-P dehydrogenase and NADPH oxidase.
본 연구에서는 탄소나노튜브(CNT), 글루코스 산화효소(Glucose oxidase, GOx) 및 다양한 분자량의 가지달린 폴리에틸렌이민(Polyethyleneimine, branched, bPEI)을 물리적으로 결합하여 GOx/PEI/CNT 구조를 제조한 뒤, 가교제인 테레프타랄데하이드(Terephthalaldehyde, TPA)와 알돌축합반응을 통해 TPA/[GOx/bPEI/CNT] 구조의 촉매를 합성하였으며, 각각의 전기화학적 특성 및 장기안정성 등을 평가하였다. GOx/PEI/CNT의 경우, PEI의 분자량의 증가에 따라 유의한 차이를 확인할 수 없었으나, TPA 도입한 TPA/[GOx/bPEI/CNT]는 PEI 분자의 증가에 따라 전자전달 및 장기안정성은 향상되며 글루코스의 물질전달은 감소함을 확인하였다. 또한 효소연료전지 음극 촉매로서의 최적 bPEI 분자량을 확인한 결과, 750 k PEI를 이용한 촉매(TPA/[GOx/bPEI-750k/CNT]에서 최고의 최대전력밀도($0.995mW{\cdot}cm^{-2}$)를 얻을 수 있음을 확인하였다.
In the case of immobilizing of glucose oxidase into polypyrrole (PPy) using electrosynthesis, the glucose oxidase (GOx) forms a coordinate bond with the polymer's backbone. However, because of intrinsic insulation and net-chain of the enzyme, the charge transfer and mass transport are obstructed during the film growth. Therefore, the film growth is dull. We synthesized the enzyme electrode by electropolymerization added some organic solvent, A formative seeds of film growth is delayed by adding the solvent. The delay is induced by radical transfer between the solvent and pyrrole monomer. In the case of adding ethanol, the radical transfer shares the contribution of dopant between electrolyte anion and GOx polyanion. This may lead to increase amount of immobilized the enzyme in ppy. However, adding tetrahydrofuran (THF), the radical transfer is more brisk, resulting in short chained polymer. Therefore, the doping level is lowered and then amount of immobilized of enzyme is decreased. For the UV absorption spectra of synthetic solution before synthesis and after, in the case of ethanol added, the optical density was slightly decreased for the GOx peaks. It suggests amount of GOx in the solution was decreased and amount of GOx in the film was increased. We established qualitatively that amount of immobilization can be improved by adding a little ethanol in the synthetic solution. It is due to radical transfer reaction. The radical transfer shares the contribution of dopant between small and fast electrolyte anion and big and slow GOx polyanion.
유리화탄소전극 위에 탄소나노튜브(CNT), 전하전달체(CTC), 글루코스 산화효소(GOx), 폴리이온복합체(PIC, poly-L-lysine hydrobromiderhk과 poly(sodium 4-styrenesulfonate) 혼합물)를 순차적으로 도포하여 글루코스/산소 바이오전지용 효소전극을 제조하였다. 또한, CNT, bilirubin oxidase (BOD), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS), 그리고 PIC 등의 층으로 제조한 전극을 바이오캐쏘드로 사용하여 바이오전지를 제조하였다. CNT와 CTC가 전극의 성능에 미치는 영향을 조사하였으며, 글루코스농도 5, 20, 200 mM에서 각각 3.6, 10.1, $46.5{\mu}W/cm^2$의 최대전력밀도를 나타내었으며, 본 연구에서 제시한 전극이 바이오전지 및 바이오센서의 개발에 활용될 수 있다는 것을 보여주었다.
혈액 및 생체반응물질등에 함유된 미량의 glucose를 효소적으로 간편하게 측량하기 위하여 먼저 고가의 glucose oxidase를 고정화 시켰다. 전리 방사선조사에 의하여 이 효소를 쉽게 고정화 시킬수 있는 방법과 그 알맞는 조건 및 높은 잔여 활성에 관한 결과는 다음과 같다. 1) 여러가지 monomer 및 polymer의 combination 중에서 AA-Bis, NK ester 23G, 물 (1:1:2)에 가용성 효소 1ml를 고정화 시켰을 경우를 비롯하여 GOD의 잔여활성이 50%이상인 여러 monomer Combination 찾았다 2) Carrier의 방사선중합에 필요한 선량은 100 krad 이상 이였으나, 400~500krad가 적당하였고, solvent는 toluene, n-haxane, petoleum ether chloroform 등을 이용할 때 고정화된 GOD의 잔여 활성 및 이화학적 성장이 좋았다. 3) GOD 고정화에 이용될 수 있는 완충 용액은 tris-glycerol buffer (pH 7.0)가 phosphate (pH 7.0) 보다 높은 활성을 보여 주었다. 4) 고정화된 GOD의 최적 pH는 6.0~6.5 또 온도는 30~4$0^{\circ}C$로서 가용성 효소보다 작용범위가 넓었고, pH 및 온도의 변화도 완만하였다. The author acknowledges with gratitude financial assistance from International Atomic Energy Agency, Vienna, Austria and also sincerely thanks Dr. K. Kawashima and his colleagues, National Food Research Institute, Tokyo, Iapan for encouragement and assistance.
육계와 돼지의 혈장에서 포도당과 lysine이 축합하여 갈색의 물질을 생성하는 Maillard 반응을 억제시키기 위하여 혈장에 GOD 5 또는 10 units/g이나 제빵용 효모(0.3% w/w)를 첨가하여 탈당시켰다. GOD와 제빵용 효모의 첨가가 혈장 포도당 함량과 pH 변화에 미치는 영향을 조사했다. 초기 닭과 돼지 혈장의 평균 포도당 농도는 각각 $150\;mg/100\;cm^{3}$과 $143\;mg/100\;cm^{3}$이었다. GOD나 효모를 첨가한 혈장의 포도당 농도는 시간이 지남에 따라 감소되었다. 효모를 이용한 경우, 육계와 돼지의 혈장 포도당이 거의 없어지는데는 약 4시간 정도 걸렸다. 효모가 GOD 보다 혈장 포도당을 빨리 감소시켰고 GOD의 농도 10 units/g이 5 units/g보다 효과적이었다. 혈장 포도당을 제거함으로써 Maillard반응의 억제가 가능하리라 여겨진다. 혈장 포도당의 감소에 따라 pH도 같이 감소했다가 포도당 양이 안정된 후에는 pH 값이 약간 상승했다. 혈장의 pH를 측정함으로써 혈장의 탈당 정도를 간접적으로 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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