The assimilability of glucose and xylose of Rhodopseudomonas K-7, whose hydrogen evolution has been characterized previously, was investigated under the anaerobic photosynthetic and the aerobic dark conditions. This organism is able to grow well in the medium containing glutamate and malate as organic substances under the anaerobic light condition. However, the substitution of glucose for malate retarded the growth rate, while the addition of glucose to the seed culture remarkably promoted the utilization of glucose added in the main culture. Optimal glucose concentration in the seed culture to induce glucose assimilability of the organism was around the concentration of 60 mM of glucose. Then, the seed culture grown in the medium containing 60 mM of glucose were inoculated in the medium containing 10, 20, 30, 60 and 100 mM of glucose respectively. The results were revealed that the consumable content of glucose was limited even though the high concentrations of glucose was contained in the medium. The consumption of considerable amount of glucose was observed when cultured under the aerobic dark conditions than the anaerobic illuminated conditions.
The purpose of this study was to optimize the conditions of continuous mixed culture of C.butyricum and R. spaeroides K-7, which were able to produce hydrogen using biomass-dreived substrate. To investigate the possibility of continuous culture, semi-continuous culture was carried out for 20 days. In semi-continuous culture using the reactor system, the replacement rate of fresh medium was 30% of total medium volume for the highest hydrogen evolution. In continuous culture, the optimum dilution rate was determined to be 0.05$h^{-1}$. The continuous culture produced 3.1 times as compared with the hydrogen on batch culture. On the other hand, the continuous mixed culture produced 1.3~2.1 times as much as hydrogen of the continuous monoculture of C. butyricum. When 10g of glucose in the media (1l) was supplied as a carbon source on continuous culture, mixed culture of C. butyricum and R. sphaeroides K-7 increased hydrogen evolution rate. Because considerable amount of glutamate was contained in waste water of glutamate fermentation, utilization of glutamate was examined in mixed culture. As a result of examination, production of hydorgen was slightly inhibited by high concentration of glutamate, more than 20mM, on continuous monoculture of R. sphaeroides K-7. On the other hand, both on continuous monoculture of C. butyricum and on mixed culture of C. butyricum and R. sphaeroides K-7, production of hydrogen was not inhibited by high concentration of glutamate such as 100mM. Hence this suggests that high concentration of waste water can be used as good substrate for hydrogen production on monoculture of C. butyricum and mixed culture of C. butyricum and R. sphaeroides K-7.
Kim, Eun-A;Yang, Seung-Ju;Choi, Soo-Young;Lee, Woo-Je;Cho, Sung-Woo
BMB Reports
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v.45
no.8
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pp.458-463
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2012
We investigated the mechanisms involved in KHG26377 regulation of glutamate dehydrogenase (GDH) activity, focusing on the roles of SIRT4 and SIRT3. Intraperitoneal injection of mice with KHG26377 reduced GDH activity with concomitant repression of glucose-induced insulin secretion. Consistent with their known functions, SIRT4 ribosylated GDH and reduced its activity, and SIRT3 deacetylated GDH, increasing its activity. However, KHG26377 did not affect SIRT4-mediated ADP-ribosylation/inhibition or SIRT3-mediated deacetylation/activation of GDH. KHG26377 had no effect on SIRT4 protein levels, and did not alter total GDH, acetylated GDH, or SIRT3 protein levels in pancreatic mitochondrial lysates. These results suggest that the mechanism by which KHG26377 inhibits GDH activity and insulin secretion does not involve ADP-ribosylation of GDH by SIRT4 or deacetylation of GDH by SIRT3.
Effects of 13 organic compounds including glucose, fructose, xylose, glutamate, succinate, malate, glycine, lactate, acetate, pyruvate, citrate, formate and cis-aconitate on the oxidation of thiosulfate and the availability of these compounds as the substrate for the respiration by Thiobacillus ocncretivorus, which is known to be an obligated autotroph, were studied. Malate nad glycine at 0.5 per cent concentration nearly doubled the thiosulfate oxidation compared to the control. No other organic substances enhanced the thiosulfate oxidation compared to the control. No other organic substances enhanced the thiosulfate oxidation. Moreover, some 30 to 40 per cent decrease was recorded by fructose, sulfate-salts medium, some 30 to 40 per cent decrease was recorded by fructose, citrate, xylose, malate, flucose, glutamate and succinate. No respiration could occur when formate and pyruvate were supplied as the substrate for respiration. But it was obvious that flucose, fructose, xylose, glutamate, malate, citrate and succinate could be used as the substrate for respiration to some extent, regarding the fact that some increase in respiration rates could be recorded compared to the result from the salts medium, where neither thiosulfate nor orgnic compounds were added. Thus, it was postulated that this organism could possibly be converted into mixotroph or hetrotroph if appropriate conditions could be prepared.
The effects of antimycin A(AA), dodium azide ($NaN_3$) and 2,4-dinitrophenol (DNP), which inhibit mitochondrial ATP production, on cellular functions of cultured astrocytes were studied. High concentrations of AA $(50{\;}\mu\textrm{g}/ml),{\;}NaN_3$ (100mM) and DNP (20mM) significantly decreased 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reduction, which was known to be related to mitochondrial function and then cel viability. AA ($50{\;}\mu\textrm{g}/ml$) increased lactate dehydrogenase (LDH) release and decreased [$^3H$] glutamate uptake, suggesting severe damage of cellular function by the concentrations of the compounds. Meanwhile, low concentrations of AA $(\leq{;\}10{\;}\mu\textrm{g}/ml),{\;}NaN_3{;\}(\leq{\;}50mM)$ and DNP ($\leq{\;}5mM$) significantly increased MTT reduction, the effect of which was specific to astrocytes. AA (5 and $10{\;}\mu\textrm{g}/ml$) did not affect LDH release and [$^3H$] glutamate uptake, indicating that these compounds increased MTT reduction at the low concentrations without cellular membrane damage. However, the low concentrations of AA produced significant decrease of MTT reduction in a glucose-free medium. Low concentrations of AA (1 and $5{\;}\mu\textrm{g}/ml$) did not change ATP production of astrocytes in the medium containing 10 mM glucose, but completely inhibited in a glucose-free medium, suggesting marked increase of cytosolic ATP production by the blockade of mitochondrial ATP production with low concentrations of AA. These results suggest that astrocytes have ability to enhance neuronal function or survival under conditions of incomplete ischemia or early by enhancement of glycolysis, and that cellular reduction of MTT occurs not only mitochondrially but also extramitchondrially.
The effects of ginseng total saponins (GTS) on hypoxic damage of primary cultures of astrocytes were studied. Hypoxia was created by placing cultures in an air tight chamber that was flushed with 95% $N_2/5%CO_2$ for 15 min before being sealed. Cultures showed evidence of significant cell injury after 24 h of hypoxia (increased lactate dehydrogenase (LDH) content in the culture medium, cell swelling and decreased glutamate uptake and protein content). Addition of GTS (0.1, 0.3 mg/ml) to the cultures during the exposure to hypoxic conditions produced dose-dependent inhibition of the LDH efflux. GTS (0.1, 0.3 mg/ml) also produced significant inhibition of the increased cell volume of astrocytes measured by $[^3H]$ O-methyl-D-glucose uptake under the hypoxic conditions. Decreased glutamate uptake and protein content was inhibited by GTS. These data suggest that GTS prevents astrocytic cell injury induced by severe hypoxia in vitro.
Recombinant Escherichia coli BLR(DE3) harboring the hemA gene from Rhodobacter capsulatus under the control of a constitutive promoter, which we constructed previously, was used for the extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA). The effects of several factors on ALA production were investigated in flask culture. ALA production by the recombinant E. coli was more efficient at $30^{\circ}C$ than $37^{\circ}C$. The glycine concentration had an important effect on cell growth. Glycine and succinic acid concentration of 5-10 and 10-20 g/L, respectively, resulted in high ALA production. In addition, the partial replacement of succinic acid by sodium glutamate increased the ALA production. The ALA production was inhibited by the presence of glucose in the medium. Using the optimal conditions, an ALA concentration of 8.2 g/L was achieved in jar fermentation without an added inducer or ALA dehydratase inhibitor; this is the highest reported concentration.
Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal motor neuron disorder that causes progressive paralysis. L-Citrulline is a nonessential neutral amino acid produced by L-arginine via nitric oxide synthase (NOS). According to previous studies, the pathogenesis of ALS entails glutamate toxicity, oxidative stress, protein misfolding, and neurofilament disruption. In addition, L-citrulline prevents neuronal cell death in brain ischemia; therefore, we investigated the change in the transport of L-citrulline under various pathological conditions in a cell line model of ALS. We examined the uptake of [14C]L-citrulline in wild-type (hSOD1wt/WT) and mutant NSC-34/ SOD1G93A (MT) cell lines. The cell viability was determined via MTT assay. A transport study was performed to determine the uptake of [14C]L-citrulline. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) analysis was performed to determine the expression levels of rat large neutral amino acid transported 1 (rLAT1) in ALS cell lines. Nitric oxide (NO) assay was performed using Griess reagent. L-Citrulline had a restorative effect on glutamate induced cell death, and increased [14C]L-citrulline uptake and mRNA levels of the large neutral amino acid transporter (LAT1) in the glutamate-treated ALS disease model (MT). NO levels increased significantly when MT cells were pretreated with glutamate for 24 h and restored by co-treatment with L-citrulline. Co-treatment of MT cells with L-arginine, an NO donor, increased NO levels. NSC-34 cells exposed to high glucose conditions showed a significant increase in [14C]L-citrulline uptake and LAT1 mRNA expression levels, which were restored to normal levels upon co-treatment with unlabeled L-citrulline. In contrast, exposure of the MT cell line to tumor necrosis factor alpha, lipopolysaccharides, and hypertonic condition decreased the uptake significantly which was restored to the normal level by co-treating with unlabeled L-citrulline. L-Citrulline can restore NO levels and cellular uptake in ALS-affected cells with glutamate cytotoxicity, pro-inflammatory cytokines, or other pathological states, suggesting that L-citrulline supplementation in ALS may play a key role in providing neuroprotection.
Microalgae are functional foods because they contain special anti-aging inhibitors and other functional components, such as ecosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), and omega-3 polyunsaturated fatty acids. Many of these functional dietary components are absent in animals and terrestrial plants. Thus, microalgae are widely utilized in human functional foods and in the feed provided to farmed fish and terrestrial livestock. Many marine organisms consume microalgae, often because they are in an appropriate portion of the cell size spectrum, but also because of their nutritional content. The nutritional requirements of marine organisms differ from those of terrestrial animals. After hatching, marine animals need small live forage species that have high omega-3 polyunsaturated fatty acid contents, including EPA and DHA. Euglena cells have both plant and animal characteristics; they are motile, elliptical in shape, 15-500 μm in diameter, and have a valuable nutritional content. Mixotrophic cell cultivation provided the best growth rates and nutritional content. Diverse carbon (fructose, lactose, glucose, maltose and sucrose) and nitrogen (tryptone, peptone, yeast extract, urea and sodium glutamate) supported the growth of microalgae with high lipid contents. We found that the best carbon and nitrogen sources for the production of high quality Euglena cells were glucose (10 g L–1) and sodium glutamate (1.0 g L–1), respectively.
A bacterium which grows on D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam as sole carbon, energy and nitrogen source was isolated from the sludge of industrial areas in Taegu, and identified as Alcaligenes eutrophus. The optimum pH, temperature and concentration of D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam for the growth were 6.0, 3$0^{\circ}C$ and 0.2% respectively. The bacteria could utilize glucose and fructose as a carbon source, and utilize ammonium chloride, ammonium nitrate, ammonium sulfate and sodium nitrate as a nitrogen source, and utilize L-Iysine and L-glutamate as a carbon and nitrogen source. It was found with thin layer chromatography and polarimeter that D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam was converted to L-Iysine by the cell-free extracts of Alcaligenes eutrophus A52.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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