• 제목/요약/키워드: gel fraction

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Gel filtration에 의한 한방사선 인삼단백 분획의 정제 (Further Purification of Radioprotective Ginseng Protein Fraction by Gel Filtration)

  • 김춘미;박경애
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제13권2호
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    • pp.254-259
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    • 1989
  • A radioprotective ginseng protein fraction was obtained from Korean white ginseng powder by the following isolation and purification procedures: Tris-HCI buffer extraction, 70% ammonium sulfate fractionation, CM-rellulosr column chromatography, heat inactivation and Sephadex G-75 column chromatography. This fraction was further purified by Sepharose 4B and Sephadex G-150 column chromatographies. Three fractions obtained were subjected to Native-PAGE and SDS-PAGE using gradient gels and the silver staining method. Molecular weights of the native proteins and their subunits were estimated.

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Mycobacterium fortuitum의 스테로이드 9${\alpha}$-하이드록실라제의 분리 및 부분정제 (Isolation and Partial Purification of the Steroid 9${\alpha}$-Hydroxylase from Mycobacterium fortuitum)

  • 강희경
    • 약학회지
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    • 제41권5호
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    • pp.638-646
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    • 1997
  • The steroid 9${alpha}$-hydroxylase activity has been detected in cytosol fraction, $100,00{\times}g$ supernatant of cell free extract of Mycobacterium fortuitum. The activity was not linear with protein concentration in the assay suggesting 9${alpha}$-hydroxylase is a multicomponent enzyme. The 9${alpha}$-hydroxylase system was partially purified through fractional saturation of ammonium sulfate, strong anion exchange (Mono Q) column chromatography, gel filtration (Superose 12) column chromatography, and testosterone affinity gel chromatography. Ammonium sulfate 50~60% saturated fraction of the cytosol gave 9${alpha}$-hydroxylase activity. For further purification, the half-saturated ammonium sulfate fraction was applied to Mono Q, Superose 12, or affinity gel column. The purification factors of 9${alpha}$-hydroxylase containing fraction after Mono Q, Superose 12, and affinity gel chromatography was 13, 11, and 17 respectively.

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Gel filtration에 의한 콩나물 제조중(製造中) 단백질(蛋白質)의 변화조사(變化調査) (Changes of Protein During Growth of Soybean Sprout)

  • 양차범;박상기;윤석권
    • 한국식품과학회지
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    • 제16권4호
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    • pp.472-474
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    • 1984
  • 대두(大豆)와 대두(大豆)의 발아과정별(發芽過程別) 수추출단백질(水抽出蛋白質)을 Sephadex G-200에 의해서 gel fietration 으로 분획(分劃)한 결과 자엽부(子葉部)에서는 5 개의 분획 (A, B, C, D 및 E) 이 얻어졌고 표품(標品)의 gel filtration과 disc gel electrophoresis 로서 그중(中) A분획이 혼탁물질, B가 11S, C가 7 S, D가 2S로 동정(同定)되었으며 E는 전기영동상에 1 peak를 보였다. 발아(發芽)에 따른 이들 분획(分劃) 변화(變化)는 자명부(子蓂部)에서는 7 S가 먼저 감소되고 2 S가 그 다음이며 11S가 맨나중에 감소되었다. A분획(分劃)은 6 일까지 증가되다가 감소를 보이고 E분획(分劃)은 계속 증가추세를 보이었다. 배축(胚軸)에서는 단지 2 개의 분획(分劃)이 나타났고 그 하나는 B+C(11S+ 7S)의 혼합물이었고 다른 하나는 E분획(分劃)이었다. 발아(發芽)에 따라서 11S+ 7 S 분획(分劃)은 큰 변화(變化)가 없었고 E 분획(分劃)은 약간의 증가를 보였다.

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Antilipolytic Activity를 보유하는 인삼 Oligopeptide의 추출 및 정제 (Extraction and Purification of Ginseng Oligopeptides with Antilipolytic Activities)

  • 김수일;나지영;조도현;이춘영
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제30권1호
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    • pp.88-94
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    • 1987
  • 인삼 성분중 생리적 활성을 가지고 있는 oligopeptide를 검출하고 분리하기 위하여 물 추출액을 ultra-filtration 한 후 gel filtration, ion-exchange chromatography 및 thin layer chromatography 등을 행하였다. 인삼 물 추출액으로부터 고분자 물질을 제거한 ultra-filtrate는 epinephrine에 의해 유도된 fat cell의 lipolysis를 저해하는 antilipolytic activity를 보유하고 있었으며 Sephadex G-25 gel filtration에 의해 3개 fraction으로 나뉘어졌다. 이중 첫번째 fraction(S-FI)만이 peptide 성분을 함유하고 있었으며 saponin 및 당도 검출되었다. S-FI fraction은 $Dowex\;50{\times}2\;ion-exchange\;chromatography$에 의하여 6개의 $fraction(P-F1{\sim}P-F6)$으로 분리되었고 TLC검정 결과 P-F2 fraction이 peptide fraction으로 antilipolytic를 보유하고 있었으며 TLC로 분리한 6개 spot는 각각 가수 분해한 전후의 TLC pattern을 비교해 본 결과 모두 oligopeptide임이 밝혀졌다. S-FI fraction에 존재한 saponine과 당은 P-F1 fraction 에서 모두 용출되었다.

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사과의 Hemicellulose가 Ca-Pectate Gel형성에 미치는 영향 (Effect of Apple Hemicellulose on the Ca-Pectate Gel Formation)

  • 김영지;김창식
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.13-17
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    • 1988
  • Fuji 사과의 hemicellulose가 사과 Ca-pectate gel 형성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 hemicellulose를 $HF_1$(1N KOH 가용성), $HF_2$(2N KOH 가용성), $HF_3$(3N KOH 가용성), $HF_4$(4N KOH 가용성)으로 분획한 후 다시 gel여과 정제하여 사과 Ca-pectate gel 형성에 미치는 영향을 조사하였다. Fuji hemicellulose는 KOH의 농도가 1N에서 4N로 증가됨에 따라 hexose peak은 점차 저분자쪽과 고분자쪽의 용출이 증가되었으며 pentose peak는 특히 고분자쪽의 용출이 증가되었다. Gel여과에 의하여 분획된 hemicellulose는 분자량 1만${\sim}$143만에 이르는 $8{\sim}10$개의 peak로 구분되었으며 사과 Ca-pectate gel 형성시에 첨가시킨 결과 고분자보다 저분자쪽이, pentose보다 hexose와 uronic acid가 많이 함유된 쪽에서 gel의 hardness, adhesiveness 및 gumminess 가 증가되었다.

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인유(人乳) 및 우유(牛乳)로부터 Secretory Immunoglobulin A의 분리(分離) 및 면역화학적(免疫化學的) 특성(特性)에 관(關)한 연구(硏究) (Studies on the Isolation and Immunochemical Properties of SIgA from Human and Bovine Milk)

  • 이조윤;김종우
    • 농업과학연구
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    • 제22권1호
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    • pp.82-95
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    • 1995
  • 본(本) 연구(硏究)는 한국인(韓國人) 산모(産母)로 부터 수집한 초유(初乳) 및 Holstein종(種)으로 부터 수집한 초유(初乳) 중에 존재하는 Secretory immunoglobulin A의 분리방법(分離方法)을 검토하고 분리(分離)된 분획들의 면역화학적(免疫化學的) 특성을 비교 검토하여 향후 인공영양(人工營養)에 대한 시험(試驗) 자료를 얻고자 하였으며 그 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 인유(人乳) 초유(初乳) 중의 SIgA는 Sephadex G-200과 Sepharose 6B를 통한 gel-filtration 만으로도 순수한 상태로 분리(分離) 정제할 수 있었으나, 우유(牛乳) 초유(初乳) 중의 SIgA는 gel-filtration을 반복하는 방법(方法)으로는 순수한 상태로 분리(分離) 및 정제할 수 없었으며, gel-filtration으로 얻어진 SIgA rich fraction을 모아서 DEAE를 실시한 결과(結果) 또한 마찬가지로 SIgA를 순수한 상태로 분리(分離)할 수는 없었다. 2. 인유(人乳) 초유(初乳)로 부터 gel-filtration을 통하여 분리(分離)한 분획들을 Immunoelectrophoresis 및 Double immunodiffusion 방법(方法)으로 면역화학적(免疫化學的) 특성을 살펴본 결과(結果), 첫번째 peak의 분획에서 IgM이 존재하고 있음을 확인할수 있었으며 두번째 peak의 분획에서 SIgA가 순수한 상태로 존재하고 있음을 확인할수 있었다. 반면에 우유(牛乳) 초유(初乳)로 부터 gel filtration 및 DEAE를 통하여 분리(分離)한 분획들을 같은 방법(方法)으로 면역화학적(免疫化學的) 특성을 살펴본 결과(結果), SIgA rich fraction 중에는 IgG가 다량(多量)으로 혼재(混在)되어 있음을 확인할 수 있었다. 3. 우유(牛乳) 초유(初乳)에서 분리(分離)한 SIgA rich fraction의 Fragment를 SDS-PAGE로 분자량을 측정해 본 결과(結果), Secretory component가 77,000-80,000, Heavy chain이 50,000-60,000, Light chain이 25,000-27,000 dalton으로 나타났으며 J-chain은 Light chain과 중복되어 분자량 측정이 어려웠다. 이와같은 결과(結果)는 인유(人乳) 초유(初乳) 중에 존재하는 SIgA Fragment 분자량과 유사한 결과(結果)를 보여주었다.

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원양산 오징어(Illex argentinus) 내장으로부터 Endoprotease의 분획 (Fractionation of Endoprotease from Viscera of the Argentina Shortfin Squid Illex argentinus)

  • 김혜숙;김진수;허민수
    • 한국수산과학회지
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    • 제41권3호
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    • pp.176-181
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    • 2008
  • To evaluate the effective use of endoprotease from squid viscera as a food processing aid, various methods of fractionating endoprotease from viscera of the Argentina shortfin squid (Illex argentinus) were evaluated. The endoprotease-positive fractions of each fractionation were fraction II (30-40%, w/w) with cold acetone, fraction IV (50-60% saturation) with ammonium sulfate, fraction UF with anion exchange chromatography, and fraction II (15-24 kDa) with gel filtration. The specific activities (approximately 25 U/mg) of the fractions using ammonium sulfate and gel filtration were higher than the others. Total azocaseinolytic activity and recovery of the positive fraction using gel filtration were 806.95U and 37.82%, respectively, and were the highest among the positive fractions. Based on the results, gel filtration was the most efficient method for fractionating endoprotease from the viscera of Illex argentinus.

난백 내 Ovotransferrin의 분리방법에 관한 연구 (Development of the Purification Method of Ovotransferrin in Egg White)

  • 장애라;조윤제;이무하;김재철
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제47권6호
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    • pp.1025-1032
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    • 2005
  • 난백 단백질 중 ovotransferrin을 gel chromato- graphy와 heparin affinity chromatography를 통하여 분리 하였다. 1차 gel filtration의 경우에 샘플인젝션 후 65-70min(fraction No. 14) 이후에는 ovalbumin이 ovotransferrin과 혼입되어 분리되고 오히려 ovalbumin의 농도가 더 높은 분포를 보였다. 고순도의 ovotransferrin을 분리하기 위하여 다시 fraction No. 12-14을 농축한 뒤 gel filtration을 실시한 결과 ovotransferrin이 완전히 분리되지 않았는데 이는 gel filtration만의 반복을 통해서 순수한 ovotransferrin을 얻는 것이 비효과적임을 의미하는 것으로 판단된다. Ovotransferrin을 heparin affinity chromatography을 이용하여 분리한 경우 칼럼에 Fe2+를 고정시킨 후 50mM EDTA를 흘려 주었는데 ovalbumin이 5-10분경에 용출이 되었고 10-15분경에 ovalbumin과 ovotransferrin이 같이 용출되었다. 그 후에 50mM Phosphate buffer (pH 7.2, 0.15M salt)를 흘려주었는데 여전히 ovalbumin의 밴드가 보여 순수하지 않음을 확인하였다. Fe3+를 컬럼에 고정시킨 후 50mM EDTA를 흘려주었을 때 ovalbumin이 10-15분경에 용출이 되었고 15-20분경에 ovalbumin과 ovotransferrin이 같이 용출되었지만 50mM Phosphate buffer (pH 7.2, 0.15M salt free)를 흘려주었을 때 156-165분경에 ovalbumin이 혼입되지 않은 매우 순수한 ovotransferrin이 용출되는 것을 확인하였다. 위의 결과를 종합해볼 때 gel chromatography를 반복적으로 실시한 경우 보다는 heparin affinity chromatography를 이용하여 분리하고 컬럼에 Fe2+를 고정시킨 경우보다 Fe3+를 고정시켰을 때 더욱 순수한 ovotransferrin을 분리해낼 수 있었다.

잔류농약 다성분 동시분석을 위한 흡착 크로마토그래피의 적용 (Adsorption Column Chromatography for Simultaneous Determination of Multi-pesticide Residues)

  • 김찬섭;임양빈;최주현;이경미;이영득
    • 농약과학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.347-360
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    • 2010
  • 잔류농약 다성분 동시분석을 위하여 국내에 등록되어 사용되고 있는 농약 180종을 대상으로 서로 다른 흡착제를 사용하는 2종의 흡착크로마토그래피 체계를 확립하고자 하였다. 유럽과 미국, 우리나라의 흡착크로마토그래피 방법을 참고하여 Florisil과 silica-gel 크로마토그래피 용출용매체계를 정한 후 농약성분별 용출양상을 확인하였다. 칼럼정제실험 결과 Florisil 체계와 silica-gel 체계에서 각각 대상농약의 145와 137종이 70-120% 범위의 회수율을 나타내었다. 인접분획에 걸쳐 용출된 경우를 중복 계수하여 얻은 용출분획별 분포율은 용출분획 순서별로 Florisil 체계의 경우 12, 76, 81, 60 및 30성분 순이었고, silica-gel 체계의 경우는 22, 59, 102, 46 및 8성분 순이었다.

Comparison of the Exopeptidase Activity of Fractions from Crude Extracts of Octopus Octopus vulgaris Cuvier Hepatopancreas Using Different Fractionation Methods

  • Kim, Min Ji;Kim, Hyeon Jeong;Kim, Ki Hyun;Heu, Min Soo;Kim, Jin-Soo
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제17권2호
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    • pp.181-187
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    • 2014
  • This study was performed to identify the optimum fractionation method and conditions to obtain exopeptidase-active fractions from octopus hepatopancreas (HP) crude extracts (CEs) using four techniques: solid ammonium sulfate fractionation, polyethylene glycol (PEG) fractionation, anion exchange chromatography, and gel filtration chromatography. The fractions with the highest total activity toward L-leucine-p-nitroanilide (Leu-pNA) were fraction IV from the ammonium sulfate and PEG fractionation, and fraction II in ion exchange and gel filtration chromatography. The total exoprotease activity of these fractions was highest in fraction IV (4,050.20 U) of ammonium sulfate fractionation, followed by fraction II (3,600.28 U) from gel filtration chromatography, fraction IV (2,861.30 U) from PEG fractionation, and fraction II (2,576.28 U) from ion exchange chromatography. These results suggest that ammonium sulfate fractionation using 60-80% ammonium sulfate was the most efficient method for separating the exoprotease active fractions from CEs of octopus HP.