Endophytic fungi strains (n = 81) were isolated from the leaves, barks, and fruits of Camellia oleifera from Hunan province (China) to delineate their species composition and potential as biological control agents of C. oleifera anthracnose. The fungi were identified by morphological and phylogenetic analyses. Fungal colonization rates of the leaves, barks, and fruits were 58.02, 27.16, and 14.81%, respectively. The isolates were identified as 14 genera, belonging to two subdivisions, Deuteromycotina and Ascomycotina; 87.65% of all isolates belonged to Deuteromycotina. The dominant species, occurring with a high relative frequency, were Pestalotiopsis sp. (14.81%), Penicillium sp. (14.81%), and Fusarium sp. (12.35%). The Simpson's and Shannon's diversity indices revealed the highest species diversity in the leaves, followed by the barks and fruits. The similarity index for the leaves versus barks comparison was the highest, indicating that the number of endophytic fungal species shared by the leaves and barks was higher than barks and fruits or leaves and fruits. Based on the results of dual culture experiments, only five strains exhibited antifungal activity against C. oleifera anthracnose pathogen, with isolate ty-64 (Oidium sp.) generating the broadest inhibition zones. Our results indicate that the endophytes associated with C. oleifera could be employed as natural agents controlling C. oleifera anthracnose.
Ahmad, Nadeem;Hamayun, Muhammad;Khan, Sumera Afzal;Khan, Abdul Latif;Lee, In-Jung;Shin, Dong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권12호
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pp.1744-1749
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2010
The role of endophytic fungi in plant growth and development is well documented. However, endophytic fungi with growth promotion capacity have never been isolated from weeds previously. In the current study, we isolated 8 fungal endophytes from the roots of Monochoria vaginalis, a serious weed of rice paddy in Korea. These isolates were screened on Waito-C, in order to identify plant growth promoting metabolites. Two fungal isolates (M5.A & M1.5) significantly promoted the plant height and shoot length of Waito-C during preliminary screening experiments. The culture filtrates (CFs) of M5.A and M1.5 also promoted the shoot length of Echinocloa crusgalli. Gibberellins (GAs) analysis of the CFs of M5.A and M1.5 showed that these endophytic fungi secrete higher quantities of GAs as compared with wild-type G. fujikuroi KCCM12329. The CF of M5.A contained bioactive GAs ($GA_3$, 2.8 ng/ml; $GA_4$, 2.6 ng/ml, and $GA_7$, 6.68 ng/ml) in conjunction with physiologically inactive $GA_9$ (1.61 ng/ml) and $GA_{24}$ (0.18 ng/ml). The CF of M1.5 contained physiologically active GAs ($GA_3$, 1.64 ng/ml; $GA_4$, 1.37 ng/ml and $GA_7$, 6.29 ng/ml) in conjunction with physiologically inactive $GA_9$ (3.44 ng/ml), $GA_{12}$ (0.3 ng/ml), and $GA_{24}$ (0.59 ng/ml). M5.A and M1.5 were identified as new strains of Penicillium sp. and Aspergillus sp., respectively, based on their 18S rDNA sequence homology and phylogenetic analysis.
Glabridin is a well-known active isoflavone found in the root of licorice (Glycyrrhiza glabra L.) that possess a wide range of biological activity. Plant cells, hairy roots, and fungal endophytes cultures are the most important alternative methods for plant resources conservation and sustainable production of natural compounds, which has received much attention in recent decades. In the present study, an efficient culture condition was optimized for the biomass accumulation and glabridin production from fungal endophyte Aspergillus eucalypticola SBU-11AE isolated from licorice root. Type of culture medium, range of pH, and licorice root extract (as an elicitor) were tested. The results showed that the highest and lowest biomass production was observed on PCB medium (6.43 ± 0.32 g/l) and peptone malt (5.85 + 0.11 g/l), respectively. The medium culture PCB was produced the highest level of glabridin (7.26 ± 0.44 mg/l), while the lowest level (4.47 ± 0.02 mg/l) was obtained from the medium peptone malt. The highest biomass (8.51 ± 0.43 g/l) and glabridin (8.30 ± 0.51 mg/l) production were observed from the PCB medium adjusted with pH = 6, while the lowest value of both traits was obtained from the same medium with pH = 7. The highest production of total glabridin (10.85 ± 0.84 mg/l) was also obtained from the culture medium treated with 100 mg/l of the plant root extract. This information can be interestingly used for the commercialization of glabridin production for further industrial applications.
Insects constitute the largest and most diverse group of animals in the world. They also serve as the hosts or nutrient sources for an immense assemblage of pathogens, parasites, and predators. More than 700 fungal species from 100 genera have adopted an entomopathogenic lifestyle. Although entomopathogenic fungi were studied as only biocontrol agents against a variety of pests in various countries, it has been recently focused their additional roles in nature. They are antagonists to/against plant pathogens, endophytes, and possibly even plant growth promoting agents. The potential antimicrobial effect against fungal plant pathogens by an isolate of entomopathogenic fungi including Beauveria bassiana, Lecanicillium spp., and Isaria fumosorosea have been reported since late 1990s, but wasn't reported pathogenicity of the isolate against pests. Later, a Canadian Lecanicillium sp. isolate and L. longisporium isolated from Vertalec$^{(R)}$ showed simultaneous control effect against both aphid and cucumber powder mildew. Therefore, the antimicrobial activities of 342 fungi isolates collected from various regions and conditions in Korea were evaluated against plant pathogenic fungus Botrytis cinerea using dual culture technique on agar plate. As a result, 186 isolates (54.4%) shown the antifungal activity against B. cinerea. The culture filtrates of selected fungi completely suppressed the growth of the microorganisms, indicating that suppression was due to the presence of antimicrobial substances in the culture filtrate. Mode of action of these fungi against insect involves the attachment of conidia to the insect cuticle, followed by germination, cuticle penetration, and internal dissemination throughout the insect. During infection process, secreted enzymes, proteinous toxins, and/or secondary metabolites secreted by entomopathogenic fungi can be used to overcome the host immune system, modify host behavior, and defend host resources. Recently, secondary metabolites isolated from entomopathogenic fungi have been reported as potential bioactive substances. Generally, most of bioactive substances produced by entomopathogenic fungi have reported low molecular weight (lower than 1,000 g/mol) as peptide and, in contrast the high molecular weight fungal bioactive substances are rare. Most substances based on entomopathogenic fungi were shown antimicrobial activity with narrow control ranges. In our study we analyzed the antimicrobial substances having antagonistic effects to B. cinerea. Antimicrobial substances in our fungal culture filtrates showed high thermostability, high stability to proteolytic enzymes, and hydrophilicity and their molecular weights were differed from substance. In conclusion, entomopathogenic fungi showed pathogenicity against insect pests and culture filtrate of the fungi also shown to antimicrobial activity. In the future, we can use the entomopathogenic fungi and its secondary metabolites to control both insect pest control and plant pathogenic fungi simultaneously.
This study investigated the distribution of endophytic fungi obtained from the surface sterilized tissues of leaves, stems and roots of chili pepper ($Capsicum$$annuum$ L.) plants in seedling, flowering and fruiting stages in Korea and their antifungal activity. A total of 481 isolates were recovered and were identified using molecular techniques. Based on rDNA ITS gene sequence and phylogenetic analysis, 21 fungal genera were characterized, belonging to 16 Ascomycota and 5 Basidiomycota. $Penicillium$ in seedling stage, $Fusarium$ in flowering stage, $Colletotrichum$ followed by $Fusarium$, $Alternaria$ and $Xylaria$ in fruiting stage was predominant and $Alternaria$, $Cladosporium$ and $Fusarium$ were common in all growth stages. Among 481 endophytes 90 phenotypes were evaluated for the antimicrobial activity against three major pathogens ($Phytophthora$$capsici$, $Colletotrichum$$acutatum$ and $Fusarium$$oxysporum$) of chili pepper. Among them 16 isolates inhibited the growth of at least one test microorganisms. Three strains showed a broad spectrum antifungal activity and displayed strong inhibition against chili pepper pathogenic fungi.
생강나무에 공생하는 내생균의 다양성을 확인하기 위하여, 강원도 4 개 지역에서 병증이 없는 생강나무 잎을 채집하여 내생균을 분리하였다. 분리된 내생균의 rDNA의 ITS지역을 분석한 결과, Alternaria alternata, Annulohypoxylon annulatum, Creosphaeria sassafras, Diaporthe eres, Discosia sp., Epicoccum nigrum, Glomerella acutata, Glomerella cingulata, Paraconiothyrium brasiliense, Pestalotiopsis neglecta, Phomopsis amygdali, Xylaria sp.의 총 7과 11속 12종이 확인되었으며 Phomopsis amygdali가 모든 연구 지역의 생강나무 잎에서 가장 높은 빈도로 분리되었으며 채집지에 따라 내생균의 종 다양성에 차이가 있음을 확인하였다.
본 연구에서는 강원도 함백산에 서식하는 잣나무, 전나무, 일본잎갈나무, 산겨릅나무 등 4종의 목본식물의 잎에서 내생균을 분리하여 균의 형태적 특징과 ITS 부위의 염기서열을 이용하여 분자계통 분석을 실시하였다, 그 결과, 국내 미기록종인 Talaromyces radicus, Myceliophthora verrucosa, Cryptosporiopsis diversispora, Sphaerulina berberidis로 동정되었으며, 각 균주의 형태학적, 분자계통학적 특징을 기술하였다.
Park, Young-Hwan;Mishra, Ratnesh Chandra;Yoon, Sunkyung;Kim, Hoki;Park, Changho;Seo, Sang-Tae;Bae, Hanhong
Journal of Ginseng Research
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제43권3호
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pp.408-420
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2019
Background: Ginseng (Panax ginseng Meyer) is an invaluable medicinal plant containing various bioactive metabolites (e.g., ginsenosides). Owing to its long cultivation period, ginseng is vulnerable to various biotic constraints. Biological control using endophytes is an important alternative to chemical control. Methods: In this study, endophytic Trichoderma citrinoviride PG87, isolated from mountain-cultivated ginseng, was evaluated for biocontrol activity against six major ginseng pathogens. T. citrinoviride exhibited antagonistic activity with mycoparasitism against all ginseng pathogens, with high endo-1,4-${\beta}$-D-glucanase activity. Results: T. citrinoviride inoculation significantly reduced the disease symptoms caused by Botrytis cinerea and Cylindrocarpon destructans and induced ginsenoside biosynthesis in ginseng plants. T. citrinoviride was formulated as dustable powder and granules. The formulated agents also exhibited significant biocontrol activity and induced ginsenosides production in the controlled environment and mountain area. Conclusion: Our results revealed that T. citrinoviride has great potential as a biological control agent and elicitor of ginsenoside production.
오서산의 소나무와 일본잎갈나무 두 수종의 침엽에서 내생균의 다양성을 분석하였다. 총 13개체의 숙수식물에서 채집한 침엽을 표면살균하여 분리한 균주들은 형태적인 특징과 rDNA 유전자(ITS 부위) 분석을 수행하였다. 그 결과 총 37개의 균주가 분리되었으며 이들은 17개의 분류군으로 묶을 수 있었다. 그 중 59%는 Leotiomycetes에 속하였으며, 30%는 Sordariomyetes에, 8%는 Dothideomycetes에 속하였으며, 3%는 Agaricomycetes에 속하는 균으로 판명 되었다. 이러한 결과들은 선행연구의 결과들과 매우 유사하였으며 소나무에서보다 일본잎갈나무에서 내생균의 종 다양성이 높게 나타났다. 특히 Lophodermium 속에 속하는 분류군들이 내생균의 다양성에서 주요한 균류로 확인되었으며, 한국에 분포하는 Lophodermium 속 내 종들에 대한 심도 있는 연구가 요구된다.
Hoa Thi Tran;Giang Thu Nguyen;Hong Ha Thi Nguyen;Huyen Thi Tran;Quang Hong Tran;Quang Ho Tran;Ngoc Thi Ninh;Phat Tien Do;Ha Hoang Chu;Ngoc Bich Pham
Mycobiology
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제50권5호
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pp.389-398
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2022
Endophytic fungi are promising sources for the production of podophyllotoxin-an important anticancer compound, replacing depleted medical plants. In this study, the endophytes associated with Dysosma difformis-an ethnomedicinal plant species were isolated to explore novel sources of podophyllotoxin. Fifty-three endophytic fungi were isolated and identified by morphological observation and ITS-based rDNA sequencing, assigning them to 27 genera in 3 divisions. Fusarium was found the most prevalent genus with a colonization frequency of 11.11%, followed by Trametes (9.26%) and Penicillium (7.41%). Phylogenetic trees were constructed for the endophytic fungi community in two collection sites, Ha Giang and Lai Chau, revealing the adaptation of the species to the specific tissues and habitats. Cytotoxic activity of endophytic fungal extracts was investigated on cancer cell lines such as SK-LU-1, HL-60, and HepG2, demonstrating strong anti-cancer activity of six isolates belonging to Penicillium, Trametes, Purpureocillium, Aspergillus, and Ganoderma with IC50 value of lower than 10 ㎍/mL. The presence of podophyllotoxin was indicated in Penicillium, Trametes, Aspergillus and for the first time in Purpureocillium and Ganoderma via high-performance liquid chromatography, which implied them as a potential source of this anticancer compound.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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