• Journal of Microbiology
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• 제44권1호
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• pp.29-34
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• 2006

The purpose of this study was to develop molecular identification method for medical mushrooms and their preparations based on the nucleotide sequences of nuclear large subunit (LSD) rDNA. Four specimens were collected of each of the three representative medicinal mushrooms used in Korea: Ganoderma Incidum, Coriolus versicolor, and Fomes fomentarius. Fungal material used in these experiments included two different mycelial cultures and two different fruiting bodies from wild or cultivated mushrooms. The genomic DNA of mushrooms were extracted and 3 nuclear LSU rDNA fragments were amplified: set 1 for the 1.1-kb DNA fragment in the upstream region, set 2 for the 1.2-kb fragment in the middle, and set 3 for the 1.3-kb fragment downstream. The amplified gene products of nuclear large subunit rDNA from 3 different mushrooms were cloned into E. coli vector and subjected to nucleotide sequence determination. The sequence thus determined revealed that the gene sequences of the same medicinal mushroom species were more than $99.48\%$ homologous, and the consensus sequences of 3 different medicinal mushrooms were more than $97.80\%$ homologous. Restriction analysis revealed no useful restriction sites for 6-bp recognition enzymes for distinguishing the 3 sequences from one another, but some distinctive restriction patterns were recognized by the 4-bp recognition enzymes AccII and HhaI. This analysis was also confirmed by PCR-RFLP experiments on medicinal mushrooms.

• 한국균학회지
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• 제32권2호
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• pp.119-124
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• 2004

쓴송이버섯으로부터 분리한 혈전용해효소(TSFE)의 활성은 11.42 U/mg이었으며, N-terminal amino acid 서열은 Ala-Thr-Tyr-Lys-Ile-X-Ser-Ala-Thr-His-Gln-X-X-Leu-Val로 지금까지 발표되지 않은 새로운 효소였다. MALDI-TOF와 ICP/MS로 분자량은 18788.25 Da이며, $Zn^{2+}$을 함유하는 금속효소임을 알게 되었다. 이 효소는 $40^{\circ}C$까지 열에 안정하고, 특히 합성된 기질 Lys pNA를 강하게 분해하였다. $Zn^{2+}$와 $Co^{2+}$에 의해 활성이 증가되고, EDTA, 1,10-phenanthroline, $Hg^{2+}$에 의해서는 활성이 완전히 소멸되었다. 이 효소는 섬유소원의 $A{\alpha}$ chain은 분해하지만, $B{\beta}$ chain과 ${\gamma}$ chain은 분해하지 못했다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제37권4호
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• pp.316-321
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• 2009

국내 토양으로부터 Chondromyces crocatus KYC2823을 순수 분리하고, 또 다른 5균주를 동반 세균이 함께 존재하는 상태로 분리하였다. 균주 KYC2823은 경북 청도군에서 채취한 토양시료에서 분리하였으며, 자실체 형태와 특이한 향의 발산을 포함한 여러 특성이 전형적인 C. crocatus임을 보였다. 이에 더해, 16S rDNA 염기서열이 C. crocatus의 새 표준균주로 제안된 Cm c5과 99.8% 유사하였다. 한편, PCR을 이용한 polyketide 생합성 유전자 조각의 클로닝 및 분석은 균주 KYC2823이 전자전달계 저해물질인 ajudazol과 actin cytoskeleton의 기능에 영향을 미치는 물질인 chondramide의 생합성 유전자, 그리고 아직까지 클로닝되지 않은 polyketide 계열 물질의 생합성 유전자를 가지고 있음을 보여주었다.

• Mycobiology
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• 제38권4호
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• pp.274-281
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• 2010

Cordyceps cardinalis was reported in Japan and the USA in 2004, and its fruiting bodies have recently been cultured in Korea. Herbarium specimens preserved at the Cordyceps Research Institute, Mushtech, Korea were revised and identified as C. cardinalis, based on morphological characters and conidial structures. Most of the C. cardinalis specimens were collected from Mt. Halla in Jeju-do. The effects of various nutritional sources and environmental conditions such as temperature and pH on mycelial growth of C. cardinalis were studied. Oatmeal agar, Martin's peptone dextrose agar, and Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract resulted in the best mycelial growth. Among carbon sources, cereals, and nitrogen sources, maltose, oatmeal, and peptone resulted in the best mycelial growth respectively. Mineral salts helped to increase growth rate but only resulted in thin mycelial density, similar to water agar. A temperature of $25^{\circ}C$ and a pH of 7 resulted in the highest mycelial growth. Based on these results, a Cordyceps cardinalis composite medium (CCM) was formulated with 1% maltose, 2% oatmeal, 1% peptone, and 2% agar. Use of the CCM resulted in slightly better mycelial growth than that of other commonly used agar media. Only organic nitrogen sources imparted a reddish pigmentation to the agar media, but this character diminished after several subcultures. A 7 day culture duration resulted in the best mycelial growth.

• 생약학회지
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• 제31권2호
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• pp.163-167
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• 2000

Cordyceps is reputed for its broad biological activities and as a tonic for replenishing vital function in Chinese traditional medicines. As an attempt to obtain fundamental data for the development of a new type Cordyceps, the effects of the fruiting bodies of cultivated fungus of Paecilomyces japonica grown on silkworm larvae on hyperglycemia induced by streptozotocin(STZ) and by epinephrine in rats and in mice as well as on immunological functions in mice were investigated. The 70% methanol extract of the fungus, when administered orally at 100 and 300 mg/kg in STZ-induced hyperglycemic rats, caused a significant decrease in blood glucose level 3hr after sample treatments. The methanol extract, when administered p.o. at the same dose levels in epinephrine-induced hyperglycemic mice, also caused a significant decrease in serum glucose levels as well as a significant reversal of the liver glycogen contents suggesting its hypoglycemic activity might be due to glycogen breakdown in the liver. Treatment of normoglycaemic mice with the methanol extract of the fungus exhibited a significant glucose tolerance up to 3hr after oral glucose load(2.0 g/kg). The methanol extract also showed immuno-stimulating activity as measured by carbon clearance in mice and a significant antifatigue effect as measured by weight loaded forced swimming performance in mice.

• 한국버섯학회지
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• 제15권3호
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• pp.124-128
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• 2017

국내 상황버섯 재배 종인 Phellinus baumii (PB, Jangsu sanghwang), P. linteus (PLK, Korea Sangwhang), 그리고 P. linteus HN00k9 (PLH) 자실체의 methanol 추출물의 혈소판 응집 억제와 ATP release 감소효과를 조사하였다. PB, PLK, PLH methanol 추출물을 전 처리하고 혈소판 응집촉진물인 collagen (2.5 ug/ml), ADP (10 uM), thrombin (0.1 U/ml) 처리에 50ug/ml에서 200 ug/ml 농도에서 50%에서 95%의 혈소판응집억제 효과가 나타났으며 ATP release 감소효과는 200 ug/ml 농도에서 ADP(10 uM) 처리 혈소판에서 60%에서 50%로 나타났으며 이는 Phospholipase C의 inhibitor인 U73122 (4 uM)과 calcium chelator인 EDTA (1 mM)에 비하여 20%이상 높게 나타났다. 본 결과로부터 상황버섯 PB, PLK, PLH 메탄올 추출물은 심혈관계질병을 예방 하는 유용한 소재로 활용 가능 할 것으로 사료 된다.

• 대한의생명과학회지
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• 제6권4호
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• pp.261-268
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• 2000

할미송이버섯으로부터 혈전용해효소 (FE-2)를 DEAE-cellulose, Mono-S column으로 분리 정제하였다. 이 효소는 분자량이 18.2 kDa 이었으며, ICP-MS (inductively coupled plasma mass spectrometer) 분석 결과 $Zn^{2+}$을 포함하고 있었다. 15번째까지의 N-terminal amino acid 서열은 A-L-Y-V-G-X-S-P-X-Q-Q-S-L-L-V이고, pH 7.5에서 활성이 가장 큰 염기성 단백질 분해효소로, EDTA와 1,10-phenanthroline에 의해 활성이 감소되는 metalloprotease였다. $Mg^{2+}$, $Zn^{2+}$, Fe$^{2+}$, Co$^{2+}$의 첨가 시 활성이 증가하였으나 Hg$^{2+}$의 경우 활성이 완전히 소멸되었다. 이 효소 (FE-2)는 단백질 분해효소 저해제인 E-64 (trans-epoxysuccinyl-L-leucylamido-(4-guanidino)-butane), PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride), pepstatin 과 2-mercaptoethanol의 영향을 받지 않으며, 섬유소원 (fibrinogen)과 반응 시 $A\alpha$ chain과 B$\beta$ chain은 분해시키지만 $\gamma$ chain과는 반응하지 않았다.

• 한국균학회지
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• 제26권4호통권87호
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• pp.502-510
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• 1998

장수버섯 자실체로부터 분리된 강력한 항보체 활성 다당체인 FF-AP1을 정제하고 이것의 화학적 특성을 구명하기 위해 본 실험을 수행한 결과는 다음과 같다. ConA-Sepharose 4B affinity chromatography에 의해 FF-AP1은 $FF-AP1{\alpha}$와 $FF-AP1{\beta}$로 더 분리되었으며 이 중 항보체 활성의 주 유효 다당체인 $FF-AP1{\beta}$는 $10\;{\mu}g/ml$ 농도에서도 약 70%의 항보체 활성도를 나타내었다. $FF-AP1{\beta}$는 약 9.6%의 단백질을 함유한 산성다당체이며 glutamic acid와 aspartic acid의 함량이 상대적으로 다른 아미노산들에 비해 높았다. 이것의 분자량은 gel filtration법에 의해 15,000인 것으로 추정되었고 적외선 분광 분석에서 $890cm^{-1}$ 부근의 소peak를 탐지함으로써 ${\beta}$ glucosidic 결합의 존재를 확인하였다. Gas chromatography에 의한 구성당 조성 분석 결과, 주 구성당이 glucose, mannose, 및 galactose인 galacto-manno-glucan이었고, 소량의 rhamnose, xylose, fucose와 uronic acid도 탐지되었다.

• 한국균학회지
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• 제23권2호통권73호
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• pp.176-189
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• 1995

98종의 한국산버섯의 그람음성균에 대한 항균활성을 검색한 결과 20종의 버섯의 80% 에탄올(E) 및 증류수(H) 추출물이 Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Serratia marcescens, Shiegella sonnei, Shiegella dysenteiae, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium 및 Pseudomonas aeruginosa에 대하여 항균력을 나타내며, 특히 R. sinuatus, S. luteus, B. umbriniporus, 그리고 A. tabescens의 E 추출물은 다른 버섯에 비하여 여러 종류의 그람음성균에 대하여 다양한 항균활성을 보였다. Abortiporus biennis, Phellinus gilvus, 및 Polyporus dispansus의 E 추출물은 S. typhi에 대하여 강력한 항균력을 나타내었으며 이들의 MIC는 $10\;{\mu}g/ml$이었다. 25종 버섯의 곰팡이균에 대한 항균활성을 검색한 결과 Armillariella tabescens의 E 추출물이 Trichopyton mentagrophytes에 대하여 항균력을 가지며 이의 MIC는 $300\;{\mu}g/ml$이었다.

• 한국균학회지
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• 제28권1호
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• pp.60-65
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• 2000

할미송이버섯으로부터 3단계를 거처 분자량이 각각 18 kDa(FE-1)과 18.2 kDa(FE-2)인 두 개의 혈전용해효소를 분리 정제하였다. 이 효소들은 지금까지 알려진 혈전용해 효소의 질량에 비해 비교적 작았고 두 효소(FE-1과 FE-2)의 15번째까지의 N-terminal amino acid서열은 A-L-Y-V-G-X-S-P-X-Q-Q-S-L-L-V로 같았다. FE-1은 ICP-MS의 결과 $Zn^{2+}$을 mole당 0.98 mole 포함하고 있는 metalloprotease로 pH 7.5와 $55^{\circ}C$에서 가장 큰 활성을 나타내고, 1,10-phenanthroline의 첨가 시 저하된 활성은 $Zn^{2+}$나 $Co^{2+}$의 첨가에 의해 재생되었다.