Human Erythropoietin (EPO) gene is cloned in quail fibrosarcoma cell, QT35. Because molecular weight of EPO is similar to that of serum albumin, cell culture with serum containing medium makes purification of EPO very difficult. Using fractional factorial study, we have developed serum free medium for the recombinant QT35 cell lines, QT N4D4 and QT SY-IMP, which have cloned EPO with glutamine synthetase (GS) gene amplification system and with puromycin selective marker, respectively. Among the seven frequently used medium components, fibronectin, BSA, and EGF were the most important for EPO production. However, sufficient fibronectin supplement to the medium did not make any good attachment of QT35 to culture plate over 3 days. Therefore, to maximize EPO production, we attempted a medium-shift at confluence from serum containing medium to serum free medium(QT SFM6). Using the medium-shift protocol with QT SFM6, nearly the same productivity of EPO was achieved comparing with that without medium-shift. This result was true in both QT35 cell lines in three types of culture, i.e. T flask, microcarrier and roller bottle cultures.
Kim, Hyun;Eom, Hyun-Ju;Lee, Jun-Soo;Seo, Jin-Ho;Han, Nam-Soo
한국생물공학회:학술대회논문집
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2005.04a
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pp.68-72
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2005
Leuconostoc citreum is one of the representative strains of Leuconostoc spp. that show fast growth rates in fermented vegetables. Sequential experimental designs including the Plackett-Burman design, fractional factorial design, steepest ascent analysis, central composite design and response surface methodology were introduced tooptimize and improve the medium for Leuconostoc citreum. Fifteen medium ingredients were examined and glucose (20 g/l), yeast extract (12.5 g/l), sodium acetate trihydrate (6.12 g/l), potassium phosphate (42.55 g/l) and dibasic ammonium citrate (4.12 g/l)were chosen as the best components to give a critical and positive effect for cell-growth. The biomass was increased to 2.79 g/l (169%), compared to the 1.65 g/l in MRS medium.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.4
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pp.544-548
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2003
To produce acetic acid from Mume (Prunus mume Sieb. et Zucc) fruits, fermentation conditions were optimized by a response surface methodology (RSM) using the fractional factorial design with 3 variables and 5 levels. The coefficient of determination ($R^2$) of response surface regression equation for acetic acid production was 0.9462. Optimum conditions for acetic acid production were involved with 8.76% of alcohol content 26.27$^{\circ}C$ of fermentation temperature and 8.42% of sugar content. Finally, predicted level of acetic acid production at these conditions was 3.23%.
Kim, Hyun;Eom, Hyun-Ju;Lee, Jun-soo;Han, Jin-soo;Han, Nam-Soo
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.9
no.4
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pp.278-284
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2004
Leuconostoc citreum is one of the representative strains of Leuconostoc spp. that show fast growth rates in fermented vegetables. Sequential experimental designs including the Plackett-Burman design, fractional factorial design, steepest ascent analysis, central composite design and response surface methodology were introduced to optimize and improve the medium for L. citreum. Fifteen medium ingredients were examined and glucose ($20 g/\ell$), yeast extract ($12.5g/\ell$), sodium acetate trihydrate ($6.12g/\ell$), potassium phosphate ($42.55g/\ell$), and dibasic ammonium citrate ($4.12g/\ell$), were chosen as the best components to give a critical and positive effect for cell-growth. The biomass was increased to ($2.79g/\ell$), (169%), compared to the $1.65g/\ell$ in MRS medium.
Covalent cross-links between a number of proteins and peptides explain why transglutaminase may be widely used by food processing industries. The objective of this work was optimization of the fermentation process to produce transglutaminase from a new microbial source, the Streptomyces sp. P20. The strategy adopted to modify the usual literature media was: (1) fractional factorial design (FFD) to elucidate the key medium ingredients, (2) central composite design (CCD) to optimise the concentration of the key components. Optimization of the medium resulted in not only an 86% increase in microbial transglutaminase activity as compared to the media cited in the literature, but also a reduction in the production cost. Optimal fermentation conditions - namely temperature and agitation rate - were also studied, using CCD methodology. Usual conditions of $30^{\circ}C$ and 100 rpm were within the optimal area. All other parameters for enzyme production were experimentally proven to be optimum fermentation conditions.
To get the appropriate welding process variables, mathematical modeling in conjunction with many experiments is necessary to predict the magnitude of weld bead shape. Even though the experimental results are reliable, it has a difficulty in accurately predicting welding process variables for the desired weld bead shape because of nonlinear and complex characteristics of welding processes. The welding condition determined for the desired weld bead shape may cause the weld defect if the welding current/voltage/speed combination is improperly selected. In this study, the $2^{n-1}$ fractional factorial design method and correlation parameter were used to investigate the effect of the welding process variables on the fillet joint shape, and the multiple non-linear regression analysis was used for modeling the gas metal arc welding(GMAW)parameters of the fillet joint. Finally, a fuzzy rule-based method and a neural network method were proposed so that the complexity and non-linearity of arc welding phenomena could be effectively overcome. The performance of the proposed neuro-fuzzy system was evaluated through various experiments. The experimental results showed that the proposed neuro-fuzzy system could effectively check the welding conditions as to whether or not weld defects would occur, and also adjust the welding conditions to avoid these weld defects.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.32
no.4
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pp.255-265
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2008
This paper presents the optimization process of evaporator for a vapor compression cooling system for high heat flux CPU. The CPU thermal capacity was given by 300W. Evaporating temperature and mass flow rate were $18^{\circ}C$ and 0.00182kg/s respectively. R134a was used as a working fluid. Channel width(CW) and height(CH) were selected as design factors. And thermal resistance, surface temperature of CPU, degree of superheat, and pressure drop were taken as objective responses. Fractional factorial DOE was used in screening phase and RSM(Response Surface Method) was used in optimization phase. As a result, CW of 2.5mm, CH of 2.5mm, and CL of 484mm were taken as an optimum geometry. Surface temperature of CPU and thermal resistance were $33^{\circ}C\;and\;0.0502^{\circ}C/W$ respectively. Thermal resistance of evaporator designed in this study was significantly lower than that of other cooling systems such as water cooling system and thermosyphon system. It was found that the evaporator considered in this work can be a excellent candidate for a high heat flux CPU cooling system.
Farid, Mohamed Abdel-Fattah Mohamed;Kamel, Zinat;Elsayed, Elsayed Ahmed;El-Deen, Azza Mohamed Noor
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.58
no.3
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pp.209-218
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2015
Fructooligosaccharides have been mainly produced by microbial fructosyltransferases (FTase) enzymes. The present work focuses on the optimization of medium composition and cultivation parameters affecting FTase produced by Penicillium aurantiogriseum AUMC 5605 in shake flask cultivation. FTase production was optimized in two steps using DeMeo's fractional factorial design. A 1.46-fold increase in FTase production (105.4 U/mL) was achieved using the optimized culture medium consisting of (g/L): sucrose, 600; yeast extract, 10; $K_2HPO_4$, 5; $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.5; $(NH_4)_2SO_4$, 1.0 and KCl, 0.5. The obtained results showed that the maximum FTase enzyme activity was produced at initial cultivation pH values ranging from 6.0-6.5, at agitation speed of 200 rpm and using vegetative fungal cells as inoculum. Moreover, results showed that optimization of medium composition and some cultivation parameters resulted in an increase of about 93.7% in the enzyme activity than the nonoptimized cultivation conditions after 96 h of cultivation. Additionally, maximum production and specific production rates recorded 2340 U/L/h and 102 U/L/h/g cells, respectively.
Kim, Sun-Hyoung;Jeong, Sung Eun;Hong, Seong-Joo;Lee, Choul-Gyun
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.6
no.1
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pp.31-40
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2014
The production of astaxanthin in the microalga Haematococcus pluvialis has been investigated using a sequential methodology based on the application of two types of statistical designs. The employed preliminary experiment was a fractional factorial design $2^6$ in which the factors studied were: excessive irradiance and nitrate starvation, phosphate deficiency, acetate supplementation, salt stress, and elevated temperature. The experimental results indicate that the amount of astaxanthin accumulation in the cells can be enhanced by excessive irradiance and nitrate starvation whereas the other factors tested did not yield any enhancement. In the subsequent experiment, a central composite design was applied with four variables, light intensity, nitrate, phosphate, and acetate, at five levels each. The optimal conditions for the highest astaxanthin production were found to be $1040{\mu}E/(m^2{\cdot}s)$ light intensity, 0.04 g/L nitrate, 0.31 g/L phosphate, 0.05 g/L acetate concentration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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