가축 매몰지내 침출수의 누출은 인간과 다른 가축들에게 쉽게 질병을 확산시킬 수 있는 중요한 문제이다. 본 연구에서는 매몰된지 5개월 이내의 초기 16개 가축매몰지에 대한 침출수의 물리화학적 특성과 분자미생물학적 방법을 이용하여 침출수내 존재하는 호기성 미생물을 분석하였다. 총대장균군, 총유기탄소, 암모니아이온 및 질산성질소가 관련된 참고문헌자료에 비하여 높게 나타났다. 또한 암모니아 이온과 질산성질소는 국내 먹는물 기준치를 초과하여 나타났다. 16S rNA 서열 분석법을 사용하여 호기성 조건에서 침출수의 미생물 분포를 분석한 결과, 높은 빈도의 Bacillus pumilus, Lysinibacillus sphaericus 및 Bacillus sphaericus이 관찰되었지만, Bucillus cereus와 Salmonella와 같은 식중독 미생물은 발견되지 않았다. 본 연구는 가축매몰지로부터 형성되는 침출수에 대한 지질 매체 내에서의 거동특성, 처리 및 위해성 평가에 대한 기초자료로 활용 가능할 것이다.
Listeria spp. were isolated from the samples submitted from various seafood plants such as raw materials, products, swab samples of plants floor and conveyor belts through the whole processing procedures. All the samples were collected from 3 kinds of seafood plants such as a imitation crab meat plant, jeotgal plant and frozen seafood plant. And also serotypes of the identified L. monocytogenes were determined. Among the 301 strains of isolated Llsteria spp., 96 strains, 179 strains and 26 strains were identified as L. monocytogenes, L. innocua and L. welshimeri, respectively. While among the 145 strains of Listeria spp. isolated from the imitation crab meat plant, $74\;(51.0\%)$ strains, $64\;(44.1\%)$ strains and $7\;(4.8\%)$ strains were identified as L. monocytogenes, L. innocua and L. welshimeri, respectively. In the case of the 126 strains of Listeria spp. isolated from the frozen seafood plant, $22\;(17.5\%)$ strains of L. monocytogenes,$93\;(73.8\%)$ strains of L. innocua, and $11\;(8.5\%)$ strains of L. wdshimeri were detected. Among the 30 strains isolated from a jeotgal plant, $22\;(73.3\%)$ strains of L. innocua and $8\;(26.7\%)$ strains of L. welshimeri were detected. The detection rates of L. monocytogenes, one of the very important food poisoning bacteria especially in frozen and/or refrigerated seafoods, were relatively high as $77.1\%$ (74/96 strains) in a imitation crab meat plant and $22.9\%$ (22/96 strains) in a frozen seafood plant, but not detected from jeotgal plant. Distribution of L. monocytogenes serotypes and characterization were examined. The serotypes of 96 L. monocytogenes isolated from pork skin, pork fat, the floor and conveyor belts were 1/2a $(59.4\%)$, l/2b $(6.2\%)$, 1/2c $(12.5\%)$ and unknown serotypes $(21.9\%)$. Unknown serotypes were divided into three specific groups by the O antigen they have.
To evaluate the availability of Cudrania tricuspidata Bureau as a natural source of antimicrobials, the antimicrobial activity of methanol extracts of harvested parts was investigated using the paper disc diffusion method. The extracts from leaves and root bark had broad antimicrobial activity against various bacteria, including Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Listeria monocytogenes, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis, Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis, Vibrio vulnificus, and Pseudomonas aeruginosa and inhibited Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, and Listeria monocytogenes, agents of food poisoning especially well. The extract from ripe fruit had a very high antimicrobial activity against Staphylococcus aureus with a 20.2 mm of clear zone at 50 mg/mL sample concentration. These results indicated that Cudrania tricuspidata could be used as new source for developing natural antimicrobial agents.
Poultry products are an important source of Salmonella enterica. An effective way to reduce food poisoning due to Salmonella would be to breed chickens more resistant to infection. Unfortunately host responses to Salmonella are complex with many factors involved. To learn more about responses to Salmonella in young chickens of 2 wk old, a cDNA Microarray containing 13,319 probes was performed to compare gene expression profiles between two chicken groups under control and Salmonella infected conditions. Newly hatched chickens were orally infected with S. enterica serovar Enteritidis. Since the intestine is one of the important barriers the bacteria encounter after oral inoculation, intestine gene expression was investigated at 2 wk old. There were 588 differentially expressed genes detected, of which 276 were known genes, and of the total number 266 were up-regulated and 322 were down-regulated. Differences in gene expression between the two chicken groups were found in control as well as Salmonella infected conditions indicating a difference in the intestine development between the two chicken groups which might be linked to the difference in Salmonella susceptibility. The differential expressions of 4 genes were confirmed by quantitative real-time PCR and the results indicated that the expression changes of these genes were generally consistent with the results of GeneChips. The findings in this study have lead to the identification of novel genes and possible cellular pathways, which are host dependent.
Due to wide abuse of antibiotics both in human and livestock use, the advent and spread of multidrug resistant (MDR) pathogens becomes a serious health problem all over the world. Since the development of new antibiotics is at a standstill in pharmaceutical industry, the choice of therapeutic antibiotics is getting narrower. In this study, in an effort to search new antibiotics, the antimicrobial activity of Paenibacillus DY1 isolated from Korean soil was characterized on its growth inhibition spectrum against various health threatening MDR strains, with its stability and chemical structure. Extracellular culture filtrate of Paenibacillus DY1 effectively inhibits the growth of all the tested MDR enteropathogenic Eshcherichia coli, enterohemolytic E. coli, and enterotoxigenic E. coli strains, at a similar level to that on the nonresistant control E. coli strains. It showed significant growth inhibition effect against the causative agents of class one legal communicable disease, MDR Salmonella typhi, MDR Salmonella paratyphi A, food poisoning bacteria, MDR Salmonella typhimurium, and other MDR Salmonella spp. The growth of all of 10 different MDR Shigella spp. strains and 6 different Vibrio spp. strains tested was also inhibited. The antimicrobial activity of Paenibacillus DY1 was well preserved after heat treatment, and was also stable in both alkaline and acidic environment. The antimicrobial activity was partially purified with Diaion HP20 column and TLC. By NMR study, the putative structure of the activity was postulated as an alkane having hydroxyl groups.
1975년 5월부터 10월까지 자리돔의 식품위생학적인 안전성을 검토하기 위하여 자리돔의 서식해수, 어획직후의 자리돔, 시판자리돔, 자리물회 및 자리무침 회의 일반세포수, coliform group MPN 및 parahaemolyticus의 유무를 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다, 1) 서식해수의 일반세균수는 평균 $1.7\times10^2/ml$ 정도였고 coliform group MPN은 4/ml이하였다. 2) 어획직후의 자리돔은 일반세균수가 평균 $3.2\times10^3/g$였고 coliform group MPN은 300g이하였다. 3) 시판되고 있는 자리돔의 일반세균수는 8월 중순경에는 평균 $1.1\times10^6/g$ 9월중순경에는 $2.2\times10^6/g$ 였다. 4) 자리무침회 및 자리물회의 일반세균수는 각각 $1.1\times10^7/g,\;4.9\times10^5/g\~1.7\times10^7/g$였다. 5) 자리무침회와 자리물회에서는 V.purahamolyticus 균이 검출 되지 않았으나 서식해수와 자리돔에서는 V. parahaemolyticus 균이 검출 되었는데 식중독을 일으킬수 있는 균량은 아니였다. 5) 자리돔 및 각종 자리돔회의 일반세균수, coliform group MPN 및 V. parahaemolyticus는 8월과 9월에 오염도가 가장 높았다. 본 연구의 지도와 많은 조언을 주신 부산수산대학 식품공학료 최위경, 이강호, 이응호, 박사들과 실험을 도와 준 제주대거 이창환, 박철우, 이진영 제군에게 감사를 드리는 바이다.
Salmonella typhimurium 항원에 면역된 산란계의 계란항체(IgY)생산 및 증가를 측정한 결과, 산란계가 이들 항원에 면역반응을 일으켜 2주 후 혈청과 난황에서 정상군에 비하여 뚜렷한 항체가 생성능을 보였으며. 혈청내의 IgG생성에 비하여 계란항체(IgY)의 생성이 다소 낮은 것으로 나타났다. 혈청 및 난황내의 단백질 함량은 정상군에 비하여 약간 높은 경향을 나타내어 산란계의 혈청 및 난황내의 단백질이 이들 항원에 의하여 증가하는 것으로 나타났다. DEAE-Sephacel column을 통과한 분획은 두 개의 peak를 나타내었다. 각 분획의 IgY농도를 ELISA법으로 확인한 결과 시험관 350-635$m\ell$에 해당되는 두번째 peak에서 대부분 측정되었다. 분리 정제된 IgY의 분자량을 측정한 결과, heavy chain 72-75KD, light chain 30-40KD정도였다. 이상의 결과에서, 본 실험에서 사용된 IgY는 항원에 대한 특이성 및 생화학적 특성 등을 고려해 볼 때, 식품산업 소재, 의약품 소재, 연구용 kit와 진단용 kit 및 축산분야 등 여러 분야에 응용될 수 있으리라 기대된다.
Salmonella typhimurium 항원에 의해서 면역된 계란 특이항체(IgY)를 분리 정제하여, Anti-S. typhimurium 항체의 온도에 대한 활성을 실험한 결과 6$0^{\circ}C$에서 30분 가열시 91.5%, $65^{\circ}C$에서 15분 가열 시 각각 73.2%의 활성도를 나타내었으며, 8$0^{\circ}C$에서 15분간 가열 시는 거의 활성이 없는 것으로 나타났다. pH에 대한 안정성은 pH 7부터 pH 4까지는 각각 98.7%의 활성도를 유지하다가 pH 3부터 급격히 감소하여, pH 2에서는 9.6%로 거의 활성도를 나타내지 않았다. 항균활성은 생균수 측정에서는 항균활성을 확인할 수 없었으나, 응집반응과 disc diffusion susceptibility test에서 측정한 anti-S, typhimurium 항체의 항균활성도는 미약하나 확연한 미생물 억제현상을 확인할 수 있었다. 이상의 결과에서, 본 실험에서 사용된 IgY는 항원에 대한 항체특성 및 항균효과 등을 고려해 볼 때 앞으로 식중독균 제거 및 예방 치료뿐만 아니라 식품산업 소재, 각종 질병예방을 위한 의약품 소재, 연구용 kit와 진단용 kit 및 축산분야 등 다양한 분야에서 응용될 수 있으리라 기대 된다
Clostridium perfringens는 그람 양성, 막대 모양, 혐기성, 포자 형성을 하는 병원균으로서 Clostridiaceae과에 속한다. C. perfringens는 인간의 장관과 척추동물 내에서 식중독을 포함하는 질병을 유발한다. 높은 특이성으로 목표 세균을 죽이는 박테리오파지는 병원세균을 제어하는 방법들 중 하나로 여겨져 왔다. 본 연구에서는 C. perfringens를 감염시킬 수 있는 박테리오 파지 CP3의 유전체 염기서열 초안을 보고한다. 본 박테리오파지의 G + C 비율은 34.0%이며, 52,068 bp로 구성된 유전체 DNA를 지니고 있었다. 이 유전체는 74개의 단백질 유전자를 포함하고 있었으며, RNA는 확인되지 않았다.
최근 식중독 원인균으로 많이 보고되고 있는 Bacillus cereus균의 분포상태와 그 생리적 특성을 조사하기 위하여 1980년 5월부터 11월사이에 밥 32개, 김밥 20개, 떡 23개, 쌀 13개, 보리 13개 등 5종 총 101개 시료를 대상으로 B. cereus균의 분포상태와 그 생리화학상태, 용혈성과 증식속도 그리고 포자의 내열성을 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 미반류 75개 시료중에서 약 $35\%$에 상당하는 26개 시료와, 그 원료 26개 시료중 약 $54\%$에 상당하는 14개 시료에서 B. cereus균이 검출되었다. 또한 미반류에서는 B. cereus균의 검출율은 낮았으나 균주는 $10^{5-6}/g$으로 많았으며 쌀과 보리에서는 검출율은 높았으나 균주는 $10^3/g$ 정도로 적었다. 2. 총 40균주에 대한 생화학 실험결과 catalase, egg yolk reaction, gelatin hydrolysis, gucose fermentation 시험은 $100\%$ 양성반응을, 그리고 xylose, arabinose, mannitol oxidation 시험결과는 $100\%$ 음성반응을 나타내었다. 그밖에 Voges-Proskauer, citrate utilization, nitrate reduction, starch hydrolyis 시험결과는 균주에 따라 양성 또는 음성반응을 나타내었다. 3. 용혈성 양성균주는 40균주중 $70.0\%$에 상당하는 28균주였으며, 식중독 발생과 관계있는 용혈성 양성, 미분액화능 음성인 균주는 $38\%$에 상당하는 15균주이었다. 4. B. cereus균은 $10^{\circ}C$와 $50^{\circ}C$에서는 증식하지 않았으며 그 외 배양온도별 비증식속도와 평균 세대시간은 $20^{\circ}C$에서는 각각 $0.34hr^{-1},\;2.02hr$ 이었고, $30^{\circ}C$에서는 $0.73hr^{-2},\;0.95hr,\;35^{\circ}C$에서는 $0.79hr^{-1},\;0.88hr$, 그리고 $40^{\circ}C$에서는 $0.49hr^{01},\;1.44hr$이었다. 5. 포자의 내열성은 $D_{90}=29min,\;D_{95}=8.7min,\;D_{98}=3.7min$ 그리고 $D_{101}=2.3min$ 이었으며, z-value는 약 $10.5^{\circ}C$이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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