단클론항체의 높은 반응특이성을 이용하여, DNV-II의 유전자클로닝에 사용할 목적으로 세포융합법으로 단클론항체를 만들었다. 그 결과 최종적으로 유용하다고 판정된 4개의 단클론항체(C4, Fl, H2, M9)는 매우 높은 반응특이성을 가지고 있어, DNV-I 및 IFV와는 전혀 반응하지 않았으며, 항원으로 사용한 DNV-II와만 특이적으로 반응하였다. 또한 이들 단클론항체들 중 C4, Fl, M9는 DNV의 53KDa 구조단백질과 반응하였고, H2는 46.5KDa 구조단백질과 반응하였다.
누에병 중에 피해가 막대한 전염성 연화병을 방제하기 위하여 바이러스 증식을 특이적으로 억제하는 guanidine 유도체중에서 그 억제효과가 큰 guanidine hydrochloride(GH)를 도입하여 전염성 연화병 바이러스의 증식억제효과에 관하여 조사하였다. 1. 누에에 대한 GH의 약해시험 결과에서는 GH농도 0.01% 수준 이하에서는 약해가 전혀 없었다. 2. FV 감염잠 혼입에 따른 피해조사에서는 화용비율은 무처리(대조) 89.2% (100)에 대하여 1% 감염잠혼입구 70.7%(79), 5% 감염잠 혼입구 38.4%(43)이었으며 1만두수견양은 대조구 21.3kg(100)에 대하여 1% 혼입구 16.7kg(77), 5% 혼입구 8.8kg(41)으로서 전자와 같은 경향으로 나타났다. 3. FV에 대한 GH의 발병억제효과는 GH 0.01% 농도에서 대조구에 비하여 약 10배의 억제효과가 있었다. 4. GH의 투여회수와 발병억제효과에서는 FV접종후 계속 투여하는 것이 가장 효과적이었다. 5. FV 접종후 GH투여시간에 대한 발병억제 효과는 접종과 동시에 투여는 것이 가장 효과적이었다. 6. FV의 GH에 의한 시험관내 불활화조사에서는 GH가 시험관내에서 FV를 불활화시키는 작용이 인정되지 않았다.
가잠의 바이러스성 연화병에 대한 저항성의 유전양식을 구명하기 위한 시험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 유전력 검정 1) FV저항성의 주동인자는 불완전 우성에 의한 상가적효과를 보였다. 2) 미동인자의 효과는 특히 저항성이 강한 계통과 약한 계통과의 교배조에서 나타났다. 3) 유전력은 0.93으로서 거의 유전적 요인에 의한것이며 환경변이는 적다고 생각된다. 2. 원종간의 조합능력 검정 1) 일반조합능력효과는 고도의 유의차가 있었으며, 잠 108이 13.1로 가장 높았고 경추가 -17.7로 가장 낮았다. 2) 특수조합능력효과도 고도의 유의차가 있었으며, 금호$\times$무등에서 13.7로 가장 높았고 잠115$\times$경추에서 -14.8로 가장 낮았다.
Kar, Mithilesh;Rao, P. Sudhakara;Kishore, S.;Kumar, T. Selva;Gopal, Nisha;Nayaka, A.R. Narasimha;Chandrasekaran, K.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제18권1호
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pp.8-12
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2009
A study has been made to know the effect of a phytoecdysteroid 'Sampoorna' on uniform maturation of silkworms during spinning and its effect on diseased silkworms infected by major silkworm disease viruses, Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) and Bombyx mori infectious flacherie virus (BmIFV). In the present investigation, the effect of the phytoecdysteroid "Sampoorna" on Grasserie disease caused by BmNPV have shown an average cocoon melting of 11.91% with a disease incidence of 5.83%. The values of 't' test for different treatments of BmNPV indicated low survival rate and cocoon traits were drastically reduced. Another major disease Flacherie caused by BmIFV has shown considerable levels of larval disease incidence (22-32%) and cocoon melting (3-7.67%) with an average melting of 12.95% and 20.24% disease incidence. There is a drastic reduction in survival rate, cocoon yield and other economic traits. The control batches were indicated negligible values for disease incidence and cocoon melting with Sapoorna application and without the inoculation of the two disease-causing viruses. The application of Sampoorna on already infected batches with major pathogens triggered high mortality and disease incidence and melting percentage was also significantly increased with reduced economic traits. Hence, it is suggested that application of Sampoorna in infected batches should be done only in the extreme conditions of rearing. Application of Sampoorna on healthy batches led to uniform maturation and improvement in productivity with the added advantage of better quality cocoons and labour saving.
가잠에 있어서 피해가 많은 전염성 연화병(Flacherie Virus; FV)과 농핵병 바이러스(Densonucleosis virus; DNV)의 증식에 관한 연구를 행하기 위하여 서당밀도 구배 초원심분리법에 의한 양바이러스의 정제 및 전자현미경에 의한 관찰, 바이러스 감염잠의 중장과 체액에서의 핵산과 단백질의 변동 및 감염중장 피막세포의 전자현미경에 의한 병리조직학적 관찰 등, 일연의 조사를 통하여 다음과 같은 연구결과를 얻었다. 1. 서당밀도구배에 의한 초원심분리법을 이용하여 FV 및 DNV를 분획한 결과, base line이 낮고 좌우상칭의 단일 peak를 나타내는 전형적인 바이러스 분획을 얻었으며, 또한 이들 바이러스의 negative 염색에 의한 전자현미경 관찰에서 FV는 27nm, DNV는 21nm의 균일한 구형입자임이 확인되었다. 2. 두 바이러스 감염잠의 체중은 바이러스 접종 6일 후부터, 중장중은 바이러스 접종 3일 후부터 건전잠에 비해 뚜렷한 감소를 나타냈다. 3. DNA의 양적 변화는 FV 및 DNV 감염잠에서 공히 중장에서는 전기간을 통해 건전잠에서 보다 높았고, 체액에서는 바이러스 접종 초ㆍ중기에는 큰 변화가 없고 바이러스 접종 7일 이후에는 건전잠에서 보다 훨씬 낮았다. 4. RNA의 양적 변화는 FV 및 DNV 감염잠에서 다같이 바이러스 접종 초기에 중장에서는 건전잠에 비해 높았고, 체액에서는 건전잠에 비해 매우 낮았으나, 바이러스 접종 말기에는 중장 및 체액의 경우 공히 건전잠에서 보다 현저히 낮았으며 그 정도는 DNV 감염잠에서 더 심했다. 5. FV 및 DNV 감염잠에서 중장과 체액의 단백질은 바이러스 접종 중기까지는 건전잠에 비해 큰 변화가 없었으나, 접종 말기에서는 건전잠에서 보다 월등히 낮았다. 6. 바이러스 접종 8일 후의 FV 및 DNV 감염잠 중장 RNA 전기영동상은 건전잠의 중장 RNA인 26S, 17S, 5S 및 4S의 4종 band와 동일했다. 7. FV 및 DNV 감염잠의 중장 단백질 전기영동상은 바이러스 접종 1일과 5일 후에는 건전잠의 것과 큰 차이가 없고, 접종 8일 후에는 건전잠에 존재하는 이동도가 낮은 L band가 양 바이러스 감염잠에서는 공히 소실되는 반면, 건전잠에서 볼 수 없는 이동도가 중간인 M band가 새로이 나타났으며 비교적 이동도가 높은 건전잠의 N band는 양 바이러스 감염잠에서는 2개로 분리되었다. 8. 체액단백질의 전기영동상은 FV 및 DNV감염잠 공히 건전잠의 것과 유사하나, 바이러스 접종 8일 후에는 양적인 감소를 나타내어 건전잠의 약 40%에 지나지 않았다. 9. FV 감염중장조직을 pyronin-methyl green 2종 염색을 하여 광학현미경으로 관찰한 결과, 바이러스 접종 8일 후의 중장원동세포내에서 A형 및 B형 봉입체가 형성되었음을 확인하였다. 10. FV감염 중장조직세포의 전자현미경 관찰에서는 바이러스 접종 5일 후에 배상세포의 'cytoplasmic wall'이 비대해지고 그 내부에 virus-specific vesicle이 형성되었으며, 바이러스 접종 8일 후에는 virus-specific vesicle, 바이러스 입자, linear structure, tubular structure 및 전자밀도가 높은 matrix 등의 바이러스 감염에 대한 특이적인 구조물이 배상세포의 세포질에서 관찰되었으며, microvilli내에서 바이러스 입자의 존재도 확정되었다. 특히 virus-specific vesicle 주위에서는 전자밀도가 높은 구형의 바이러스 입자 유사체가 관찰되었는데, 이것은 virus-specific vesicle 주위에서 바이러스 조립이 일어나는 것을 추정된다. 한편 원통세포 내에서 봉입체 관찰되고, 변형소구화된 배상세포가 중장강으로 탈락되는 것이 관찰되었다. 11. DNV감염 중장조직을 acridine orange 염색을 하여 형광현미경으로 관찰한 결과, DNV접종 5일 후에 본 바이러스 증식 장소인 원동세포핵의 비대가 뚜렷이 관찰되었다. 12. 전자현미경에 의해 DNV감염 중장조직세포를 관찰한 결과, 바이러스 접종 5일 후에 원동세포 핵내의 인이 소형 과립으로 붕괴되어 산재되었고, 접종 8일후에는 전자밀도가 높은 virogenic stroma가 출현하였으며, 감염 말기로 추정되는 핵내의 전자밀도가 전자보다 낮고 더욱 확대되어 핵의 대부분을 차지하는 virogenic stroma도 관찰되었다. 또한 이들 virogenic stroma내에서 바이러스 입자유사체가 관찰되는 것으로 보아 이 virogenic stroma는 바이러스 전구물질의 합성 및 바이러스 조립장소임을 시사하고 있다.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제12권2호
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pp.95-100
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2006
Central Sericultural Research and Training Institute, Mysore have evolved several highly productive bivoltine hybrids which can produce international grade raw silk. Among them $CSR2{\times}CSR4,\;CSR2{\times}CSR5,\;CSR3{\times}CSR6,\;CSR17{\times}CSR16,\;CSR18{\times}CSR19$ and $CSR12{\times}CSR6$ are being popularized in the field. There is a minimum difference in their economic characters but they appear to differ in survival. Though they are productive under high input management conditions, they are very susceptible to different diseases under normal rearing practices. No systematic attempts have been made to test their susceptibility status / resistance. Thus the present study is a modest attempt to screen the above six productive bivoltine hybrids to two important pathogens viz., Bombyx mori Nuclear Polyhedrosis Virus (BmNPV) and Bombyx mori Infectious Flacherie Virus (BmIFV) along with existing hybrid, $KA{\times}NB4D2$ to assess their susceptibility / resistance. The results shows that the productive hybrid $CSR2{\times}CSR4$ is the most resistant to BmNPV and it is suggested by its highest $LC_{50}$ value followed by $CSR12{\times}CSR6,\;KA{\times}NB4D2,\;CSR3{\times}CSR6,\;CSR17{\times}CSR16,\;CSR18{\times}CSR19,\;CSR2{\times}CSR5$. Based on the $LC_{50}$ value and $LT_{50}$ values for BmIFV, the hybrid $KA{\times}NB4D2$ was found to be the most resistant (1st position) one followed by $CSR3{\times}CSR6$ (2nd position) $CSR2{\times}CSR$ (3rd position) and $CSR12{\times}CSR6$ (4th position) $CSR17{\times}CSR16$, $CSR18{\times}CSR19$ (5th position) and $CSR2{\times}CSR5$ being the least. The response of 7 bivoltine hybrids to both the pathogens BmNPV and BmIFV indicates that, the hybrids $CSR2{\times}CSR4$, $CSR12{\times}CSR6$ and $KA{\times}NB4D2$ were found to be the most resistant when compared to others. Further, $KA{\times}NB4D2$ being less productive hybrid with a shell ratio of 20.08%, the other two hybrids $CSR2{\times}CSR4$ (Cocoon shell ratio, 21.44%) and $CSR12{\times}CSR6$ (cocoon shell ratio, 23.45%) can be considered to be most productive with superior quality cocoon and resistant to both BmNPV and BmIFV pathogens. The overall study indicated that the hybrid $CSR2{\times}CSR5$ is the most susceptible hybrid to both the pathogens.
This experiment was undertaken to examine the injurious environment conditions for occuring of the virus disease, grasserie and cytoplasmic polyhedrosis in rearing of silk worms, to observe of cytoplsamic polyhedrosis diseased silkworms with histological preparation and to define the virus origin on the gattine and the disease of shrinked form after moulting (Okichijimi). The results obtained are as follows. 1) The grasserie in spring season rearing was remarkably infected in highly percent with 20.1 % in high temperature condition during 3rd to 4th instar, the high temperature during 1st to 2nd instar and 5th instar in 16.5% and 16.3%, respectively. In the fall season rearing, the disease was infected by the feeding of soft leaves plot in 5.3% and 4.8%, respectively with significant difference in 5% level, accordingly, it was thought to the nutritional condition is a factor in occuring of the disease. 2) In spring season rearing, the number ofl infected silk worms of cytoplasmic polyhedrosis was increased in the high temperautre and high humidity conditions, and in fall season rearing, order of the low temperature and high humidity plot, first feeding plot and feeded with hard leaves plot were found insome high infected ratio of the disease than control plot. 3) The occuring of cytoplasmic polyhedrosis was observed even in control rearing plot with the examining of anatomical and histological preparation in spring and fall. 4) It was found that the high diseased ratio of the gattine and disease of shrinked form after moulting in 21.8% of control and 93.2% in feeded with inocylated plot in the biosassay of inoculum. It was defined as a virus flacherie acoording to the Danaka and Shimizu's examine method.
국내 양잠농가에 분포되어 있는 FV를 분리하여 그 성상을 파악하기 위하여 경기 3, 경북 4개 농가에서 연화병 증상을 나타내는 병잠을 모집, 바이러스를 분리하여 그 형태 및 크기, 핵산 및 단백질 성상과 항원성을 일본산 FV와 비교 검토한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 경기 2, 경북 2개 농가의 연화병 증상을 나타내는 병잠으로부터 바이러스를 분리하였다. 2. 향남산 바이러스는 직경이 27$\pm$1.7nm의 구형입자였으며, 유천산 바이러스는 27$\pm$1.7nm 및 21$\pm$0.8nm의 구형 입자가 혼재되어 있었다. 3. 향산성 바이러스의 핵산은 RNA로 일본산 FV와 동일한 전기영동상을 보였다. 4. 구성단백질은 4개의 polypeptide로 되어 있으며 그 분자량은 각각 35,000, 33,000, 31,000, 11,400 dalton으로 일본산 FV와 동일하였다. 5. 향남산 바이러스는 일본산 FV와 같은 항원성을 가진 바이러스이며, 유천산 바이러스는 일본산 FV 및 DNV-1과 같은 항원성을 가진 2종류의 바이러스였다. 6. 이상의 결과로부터 향남 및 유천에서 분리한 직경 27$\pm$1.7nm의 구형 바이러스는 일본산 FV와 동일한 FV로 판명되었고, 유천에서 분리한 직경 21$\pm$0.8nm의 구형 바이러스는 DNV-1으로 추정되었다.
잠병이 잠작에 미치는 영향을 조사하기 위하여 경기도 용인군 남사면 방아리, 경북 칠곡군 약목면 그리고 경북 칠곡군 북삼면의 양잠농가를 대상으로 잠병에 대한 피해율을 조사한 결과는 다음과 같다. 1) 잠병에 의한 감수율은 춘잠기에는 5.5%, 추잠기에는 8.9%이었고 년간 평균 7.2%였으며 하견을 병해견으로 환산한다면 8.3%였다. 2) Virus 다각체병과 연화병에 의한 병해율은 전발병의 치잠기에는 17.8%, 장잠기에는 82.2%로서 높은 비율을 나타내었다. 3) 평균산견량은 상자당 27.74kg이었는데 추정산견량에 대하여 잠병에 의한 감수량은 2.411kg이었다. 4) 원인불명의 감수량이 3.611kg으로서 잠병에 의한 감수량의 약 1.5배였다. 이 원인불명의 감수량은 주로 유실잠과 하견이 많았기 때문이다. 5) 잠작이 비교적 안정된 농가수는 춘기에는 54.7%, 추기에는 21.9%였다. 6) 잠병이외의 피해율은 10.70%였고 전감잠비율은 17.87%였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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