Most of microalgae shift their metabolic pathways toward the fatty acid biosynthesis following nitrogen deprivation. Recent studies on Nannochloropsis species, oleaginous microalgae, have been performed to investigate the regulation of contents and compositions of fatty acids under stressful condition. The objective of this experiment is to identify the effect of nitrogen on cell growth and fatty acids production in Nannochloropsis oculata K-1281 and compare fatty acid composition response to nitrogen deficiency between N. oculata LB2164 and K-1281. The fatty acids content in N. oculata K-1281 was increased up to 210%, while the growth rate was decreased under nitrogen deficient condition. The contents of C16:0 and C16:1 increased dramatically in both N. oculata K-1281 and LB2164, while the contents of C20:4 and C20:5 increased in N. oculata LB2164. The fatty acids content and composition in N. oculata K-1281 returned following addition of nitrogen after nitrogen starvation. These results demonstrated that fatty acid contents and compositions under nitrogen deficiency will provide the understanding of fatty acid synthesis in microalgae.
Essential fatty acids (EFA) are fatty acids that must be obtained from the diet because they can not be biosynthesized by human or animals. Gamma fatty acids contain gamma-linolenic acid (GLA, 18:3n-6) and dihomo-gamma-linolenic acid (DHGLA, 20:3n-6) as intermediate metabolites of linoleic acid (LA, 18:2n-6), which is an EFA found in vegetable oils. GLA is an important essential fatty acid that is required by human and animals to function normally. Recently, studies have indicated that GLA may be an essential component of the cell membrane, as well as an active component of dietary supplements and medicine. GLA must beadministered through the diet because it is converted into DHGLA in the body quickly and completely. DHGLA is a key material involved in the metabolism of LA. GLA is biosysthesized by the rate limiting step of ${\Deltac}^6$-desaturase, which is an enzyme that desaturates LA, there by allowing it to be converted into DHGLA via chain elongation. In addition, DHGLA exerts bioactive effects via action as a precursor of eicosanoid series 1. Breast milk contains an abundant amount of GLA; however, GLA is also available directly in evening primrose oil, black currant seed oil, borage oil and hemp seed oil. In addition, GLA enriched animal and plant can be produced using biotechnology, and highly pure GLA can be extracted using supercritical fluids, such as supercritical carbon dioxide, which will allow economically feasible production of GLA for use in medicines.
재조합 E. coli를 이용한 MCL-PHA의 생산에서 fatty acid pathway로부터 PHA 생합성 전구체 물질들이 만들어진다는 사실과 함께 이에 관여하는 enzymes이 밝혀지고 있다. 본 논문에서는 protein homology search로부터 탐색된 paaG와 ydbU genes의 PHA 생합성에서의 역할을 확인하기 위하여 paaG와 ydbU gene이 각각 knock-out된 mutant E. coli strains 를 제작하였다. 제작된 mutant E. coli들은 모균주들보다 낮은 PHA 농도와 함량을 가졌으며, 이러한 결과들로부터 paaG와 ydbU는 fatty acid pathway에서 PHA synthesis의 전구체 물질들을 공급한다는 사실을 확인하였다. 또한, 새로운 FadB homologous enzyme YgfG를 탐색하였으며, ygfG gene이 overexpression된 균주와 ygfG mutant를 제작하여 PHA 합성을 실험한 결과 ygfG도 paaG와 ydbU와 유사한 역할을 한다는 사실을 밝혔다. 이러한 연구결과들은 E. coli에서의 MCL-PHA 단량체들의 합성 경로를 확인하여 효과적인 PHA 생산 균주를 제작할 수 있게 할 것이다.
Metabolic alterations of Cordyceps bassiana mycelium were investigated under the following culture medium and light conditions: dextrose agar supplemented with 0.5% yeast extract (SDAY) medium with light (SL), SDAY medium without light (SD), nut medium without light (ND), and iron-supplemented SDAY medium without light (FD). The levels of asparagine, aspartic acid, glutamic acid, glutamine, histidine, lysine, ornithine, and proline were significantly higher under SD and SL conditions. The levels of most of the alcohols, saturated fatty acids, unsaturated fatty acids, fatty acid esters, sterols, and terpenes were higher under the ND condition than in the other conditions, but beauvericin was not detectable under the ND condition. The FD condition was favorable for the enhanced production of aminomalonic acid, malic acid, mannonic acid, and erythritol. Thus, the metabolic characteristics of C. bassiana can be manipulated by varying the cultivation conditions, rendering this fungus potentially favorable as a nutraceutical and medicinal resource.
Bio-hydrogenation of $C_{18}$-unsaturated fatty acids released from the hydrolysis of dietary lipids in the rumen, in general, occurs rapidly but the range of hydrogenation is quite large, depending on the degree of unsaturation of fatty acids, the configuration of unsaturated fatty acids, microbial type and the experimental condition. Conjugated linoleic acid (CLA) is incompletely hydrogenated products by rumen microorganisms in ruminant animals. It has been shown to have numerous potential benefits for human health and the richest dietary sources of CLA are bovine milk and milk products. The cis-9, trans-11 is the predominant CLA isomer in bovine products and other isomers can be formed with double bonds in positions 8/10, 10/12, or 11/13. The term CLA refers to this whole group of 18 carbon conjugated fatty acids. Alpha-linolenic acid goes through a similar bio-hydrogenation process producing trans-11 $C_{18:1}$ and $C_{18:0}$, but may not appear to produce CLA as an intermediate. Although the CLA has been mostly derived from the dietary $C_{18:2}$ alternative pathway may be existed due to the extreme microbial diversity in the reticulo-rumen. Regardless of the origin of CLA, manipulation of the bio-hydrogenation process remains the key to increasing CLA in milk and beef by dietary means, by increasing rumen production of CLA. Although the effect of oil supplementation on changes in fatty acid composition in milk seems to be clear its effect on beef is still controversial. Thus further studies are required to enrich the CLA in beef under various dietary and feeding conditions.
This study was conducted to determine the effects of saturated long-chain fatty acids (LCFA) on cell proliferation and triacylglycerol (TAG) content, as well as mRNA expression of ${\alpha}s1$-casein (CSN1S1) and genes associated with lipid and protein synthesis in bovine mammary epithelial cells (BMECs). Primary cells were isolated from the mammary glands of Holstein dairy cows, and were passaged twice. Then cells were cultured with different levels of palmitate or stearate (0, 200, 300, 400, 500, and 600 ${\mu}M$) for 48 h and fetal bovine serum in the culture solution was replaced with fatty acid-free BSA (1 g/L). The results showed that cell proliferation tended to be increased quadratically with increasing addition of stearate. Treatments with palmitate or stearate induced an increase in TAG contents at 0 to 600 ${\mu}M$ in a concentration-dependent manner, and the addition of 600 ${\mu}M$ was less effective in improving TAG accumulation. The expression of acetyl-coenzyme A carboxylase alpha, fatty acid synthase and fatty acid-binding protein 3 was inhibited when palmitate or stearate were added in culture medium, whereas cluster of differentiation 36 and CSN1S1 mRNA abundance was increased in a concentration-dependent manner. The mRNA expressions of peroxisome proliferator-activated receptor gamma, mammalian target of rapamycin and signal transducer and activator of transcription 5 with palmitate or stearate had no significant differences relative to the control. These results implied that certain concentrations of saturated LCFA could stimulate cell proliferation and the accumulation of TAG, whereas a reduction may occur with the addition of an overdose of saturated LCFA. Saturated LCFA could up-regulate CSN1S1 mRNA abundance, but further studies are necessary to elucidate the mechanism for regulating milk fat and protein synthesis.
Rapeseed (Brassica napus L.) oil with high oleic acid content is of great interest for both food and non-food uses. The 'Tamla' variety, characterized by oleic acid content of approximately 69%, was treated with 1% ethyl methane sulfonate (EMS) to induce mutations in the fatty acid biosynthesis pathway. $M_1$ plants were selfed and subsequent generations ($M_2$, $M_3$, and $M_4$ mutants) were analyzed to identify mutants having increased levels of oleic acid. $M_2$ mutants showed oleic acid content ranging from 13.5% to 76.9% with some mutants (TR-458 and TR-544) having up to 74.7% and 76.9% oleic acid, which was an increase of nearly 5% and 7%, respectively, compared to untreated cv 'Tamla'. We selected two $M_3$ mutants with >75% oleic acid content. One mutant (TR-458-2) had increased oleic acid (75.9%) and decreased linoleic acid (12.5%) and linolenic acid (4.4%) contents. The other (TR-544-1) showed increased oleic acid content (75.7%) and decreased linoleic acid (13.5%) and linolenic acid (3.3%) contents. The accumulation or reduction of oleic acid content in the selected $M_4$ mutants was also accompanied by a simultaneous decrease or increase in linoleic and linolenic acid contents. The high-oleic lines could be utilized further in breeding programs for improvement of rapeseed oil quality.
Arachidonic acid (AA, C20 : 4, $\omega$-6) and eicosapentanoic acid (EPA,C20 : 5, $\omega$-3), which are polyunsaturated fatty acids forming eicosanoids, were tested for their effects on blood pressure in Wistar rats and SHR. AA is the most important precursor for the biosynthesis of eicosanoids which include the prostaglandins, prostacyclin (PGI$_2$), thromboxane $A_2$ (TXA$_2$) and the leukotriens. TXA$_2$is a potent vasoconstrictor and a powerful inducer of platelet aggregation causing myocardial infarction and hypertention. In contrast, PGI$_2$ induces vasodilation and inhibits platelet aggregation. In this study, AA markedly increased blood pressure, but its effect was antagonized by both EPA, a structural analog of AA, and dazmegrel, a TX synthetase inhibitor. Also, AA enhanced the antihypertensive effects of hydralazine and captopril, and EPA reduced TXA$_2$ production. These results indicate that the hypotensive effects of EPA might be closely related to the decrease in TXA$_2$ biosynthesis due to competitive inhibition by structural similarity of the EPA to the AA, the precursor of TXA$_2$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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