The objective of this study was to develop a simultaneous method of 8 penicillin antibiotics including amoxicillin, ampicillin, cloxacillin, dicloxacillin, nafcillin, oxacillin, penicillin G and penicillin V in meat using LC-MS/MS. The procedure involves solid phase extraction with HLB cartridge and subsequent analysis by LC-MS/MS. To optimize MS analytical condition of 8 compounds, each parameter was established by multiple reaction monitoring in positive ion mode. The chromatographic separation was achieved on a $C_{18}$ column with a mobile phase of 0.05% formic acid and 0.05% formic acid in acetonitrile at a flow rate of 0.2 mL/min for 20 min with a gradient elution. The developed method was validated for specificity, linearity, accuracy and precision in beef, pork and chicken. The recoveries were 71.0~106%, and relative standard deviations (RSD) were 4.0~11.2%. The limit of detection (LOD) and the limit of quantification (LOQ) were 0.003~0.008 mg/kg and 0.01~0.03 mg/kg, respectively, that are below maximum residue limit (MRL) of the penicillins. This study also performed survey of residual penicillin antibiotics for 193 samples of beef, pork and chicken collected from 9 cities in Korea. Penicillins were not found in all the samples except a sample of pork which contained cloxacillin (concentration of 0.08 mg/kg) below the MRL (0.3 mg/kg).
A simultaneous determination was developed for 9 aminoglycoside antibiotics (amikacin, apramycin, dihydrostreptomycin, gentamicin, hygromycin B, kanamycin, neomycin, spectinomycin, and streptomycin) in meat by liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Each parameter was established by multiple reaction monitoring in positive ion mode. The developed method was validated for specificity, linearity, accuracy, and precision based on CODEX validation guideline. Linearity was over 0.98 with calibration curves of the mixed standards. Recovery of 9 aminoglycosides ranged on 60.5~114% for beef, 60.1~112% for pork and 63.8~131% for chicken. The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) were 0.001~0.009 mg/kg and 0.006~0.03 mg/kg, respectively in livestock products including beef, pork and chicken. This study also performed survey of residual aminoglycoside antibiotics for 193 samples of beef, pork and chicken collected from 9 cities in Korea. Aminoglycosides were not found in any of the samples.
Fusarium head blight (FHB) is a severe disease problem that affects the quality and yield of barley grain. The evaluation of FHB resistance is difficult because environmental conditions greatly influence FHB infection and development. The objectives of this study were to: 1) establish an efficient screening method for selecting resistant barley to FHB, 2) compare FHB severity between the cut-spike method and pot-plant method for development of mass screening, and 3) estimate FHB resistance for barley germplasms. Barley cultivars and lines were evaluated for reaction to FHB in controlled-greenhouse condition. Spikes were spray-inoculated with a suspension $(5.0\times10^5\;macroconidia\;mL^{-1})$ of Fusarium graminearum SCK-O4 strain, and then kept in a greenhouse at $18-25^{\circ}C$ with $80-100\%$ relative humidity. Inoculation were employed at 3 different heading growth stages (heading date, three days after heading, and five days after heading). The inoculation was performed in 2 consecutive days in order to avoid escapes. The inoculated plants were maintained in the greenhouse at 4 different free moisture periods (1, 3, 5, and 7 days). The percentage of FHB severity was scored from 0 to 9 according to the rate of infected kernels per spike, and three spikes were evaluated per replication with 3 replicates. There were significant differences of FHB severity depending on the different free moisture periods, but not by the inoculation at different heading stages. The optimum evaluation point of FHB severity in the greenhouse condition was on the 7th day under free moisture condition after inoculation at the heading date. Infection level in cut-spike method highly correlated with that in pot-plant method. This suggested that cut-spike method is useful in evaluating of FHB resistance in barley. Six cultivars, such as Jinkwang, Buheung, Atahualpha 92, Chevron-b, Gobernadora-d, and MNBrite-c, were selected as resistant varieties to FHB. Correlation coefficient for the FHB severity evaluated by the pot-plant method between two seasons was 0.794, indicating the stability and accuracy of the screening method.
Park, Jin Ho;Seol, Min-A;Eum, Soon-Jae;Kim, Il Ryong;Lim, Hye Song;Lee, Jung Ro;Choi, Wonkyun
Journal of Plant Biotechnology
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v.47
no.4
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pp.309-315
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2020
Advances in biotechnology have led to progress in crop genetic engineering to improve agricultural productivity. The use of genetically modified (GM) crops has increased, as have consumers' and regulators' concerns about the safety of GM crops to human health, and ecological biodiversity. As such, the identification of GM crops is a critical issue for developers and distributors, and their labeling is mandatory. Multiplex polymerase chain reaction (PCR) has been developed and its use validated for the detection and identification of GM crops in quarantine. Herein, we established a simultaneous detection method to identify four GM maize events. Event-specific primers were designed between the junction region of transgene and genome of four GM maize lines, namely 5307, DAS-40278-9, MON87460, and MON87427. To verify the efficiency and accuracy of the multiplex PCR we used specificity analysis, limit of detection evaluation, and mixed certified reference materials identification. The multiplex PCR method was applied to analyze 29 living, modified maize volunteers collected in South Korea in 2018 and 2019. We performed multiplex PCR analysis to identify events and confirmed the result by simplex PCR using each event-specific primer. As a result, rather than detecting each event individually, the simultaneous detection PCR method enabled the rapid analysis of 29 GM maize volunteers. Thus, the novel multiplex PCR method is applicable for living modified organism volunteer identification.
Kim, Jin-Hee;Park, So-Young;Lim, Hyun-Kyun;Park, Ah-Yeon;Kim, Ju-Sun;Kang, Sam-Sik;Youm, Jeong-Rok;Han, Sang-Beom
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.28
no.7
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pp.1187-1194
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2007
The three major active isoflavonoids (calycosin-7-O-β -glucoside, isomucronulatol 7-O-β-glucoside, formononetin) and two main saponins (astragaloside I, astragaloside IV) in an extract of Radix Astragali were determined using rapid, sensitive, reliable HPLC/UV and LC-ESI-MS/MS methods. The separation conditions employed for HPLC/UV were optimized using a phenyl-hexyl column (4.6 × 150 mm, 5 μm) with the gradient elution of acetonitrile and water as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min and a detection wavelength of 230 nm. The specificity of the peaks was determined using a triple quadrupole tandem mass spectrometer equipped with an electrospray ionization (ESI) source that was operated in multiple reaction monitoring (MRM) in the positive mode. These methods were fully validated with respect to the linearity, accuracy, precision, recovery and robustness. The HPLC/UV method was applied successfully to the quantification of three major isoflavonoids in the extract of Radix Astragali. The results indicate that the established HPLC/UV and LC-ESI-MS/MS methods are suitable for the quantitative analysis and quality control of multi-components in Radix Astragali.
A synthetic peptide was prepared based on the antigenic region of Paragonimus westermani pre-procathepsin L, and its applicability for immunodiagnosis for human paragonimiasis (due to Paragonimus heterotremus) was tested using an ELISA to detect IgG4 antibodies in the sera of patients. Sera from other helminthiases, tuberculosis, and healthy volunteers were used as the references. This peptide-based assay system gave sensitivity, specificity, accuracy, and positive and negative predictive values of 100%, 94.6%, 96.2%, 100%, and 88.9%, respectively. Cross reactivity was frequently seen against the sera of fascioliasis (75%) and hookworm infections (50%). Since differential diagnosis between paragonimiasis and fascioliasis can be easily done by clinical presentation and fascioliasis serology, this cross reaction is not a serious problem. Sera from patients with other parasitoses (0-25%) rarely responded to this synthetic antigen. This synthetic peptide antigen seems to be useful for development of a standardized diagnostic system for paragonimiasis.
In Korea, the Air Quality Conservation Act and the Petroleum and Petroleum Substitute Fuel Business Act stipulate certain quality standards for fuels distributed in Korea, thereby striving to reduce vehicle performance and emissions. Domestic petroleum products import and produce all the crude oil from each oil refiner so that the quality of the petroleum product is different according to the characteristics of the crude oil. As a result, vehicles have been improved by using the physical properties calculated through the physical property measurement that has tried to improve the accuracy of the measurement of the energy consumption efficiency of the automobile by using standard fuel from abroad. In this study, the same test procedure and method as the test method of domestic gasoline vehicle emission are applied using four samples of gasoline and the latest gasoline vehicle which are actually distributed, and the performance evaluation is performed. The purpose of this study is to contribute to improvement of vehicle technology and fuel quality by collecting necessary basic data and obtaining data on the effect of differences in gasoline property on vehicle emissions. The results of the test showed that the emission of gases (NMOG, CO) from gasoline vehicles was the most influenced by the sulfur content, unlike the previous studies that the vehicles emission had the greatest influence on the distillation characteristics and the specific gravity of aromatic compounds. The catalytic reaction such as the poisoning action of the three-way catalyst which is the abatement device was interfered and the emission was increased. The distillation characteristics and specific gravity of aromatic compounds were found to affect the emission of vehicles. According to the physical properties of the fuel, the emission difference was 28.0% in the urban mode and 17.6 % in the highway mode.
Pan-Enterovirus (Pan-EV) infects millions of children and infants worldwide every year. As severe infections have recently been reported, the need for monitoring has consequently intensified. Pan-EV is a categorical name for waterborne enteroviruses belonging to the Picornaviridae family, and includes a wide range of pathogens including Coxsackievirus (CoxV), Echovirus (EcoV) and Enterovirus (EV). In this study, we proposed an optimal RT-nested PCR method for diagnosis of various types of Pan-EV in an aquatic environment and developed a positive control. Considering detection sensitivity, specific reaction, and final identification, one condition capable of amplifying 478 bp among the four candidates in the 1st round PCR (RT-PCR) and one condition in the 2nd round PCR (nested PCR) were selected. Through the detection of nucleic acids extracted from 123 groundwater samples and the detection sensitivity test based on artificial spiking in the sample, the methods are optimal for non-disinfected water samples such as groundwater. We developed a positive control for Pan-EV detection that can be amplified to different sizes under the two conditions. Accuracy could be further improved by testing for contamination from the control group. The method proposed in this study and the positive control developed are expected to be used in monitoring Pan-EV in aquatic environments including groundwater through future research using more samples.
Kim Sun Kyu;Yim Bong Been;Jung Eui Suk;Kim Sun Tae
Journal of Korean Society for Atmospheric Environment
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v.22
no.1
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pp.117-126
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2006
The purpose of this study is to develop a badge-type passive sampler for the measurement of short-term nitrogen dioxide and to evaluate its performance. The principle of the method is a colorimetric reaction of nitrogen dioxide with sulfanilic acid, N-1-naphthylethylendiamine, and phosphoric acid. First, it has been shown that the filter paper should be rinsed with ultrapure water and ultrasound, and then dried in a vacuumed desiccator. The concentration and volume of absorption reagent (triethanolamine) were $20\%$ and 100 ${\mu}L$, respectively. The extraction time was determined as 60 min. Second, duplicate measurements (n= 116) were carried out for evaluating the precision of the passive sampler. The relative error and the correlation coefficient between duplicates are $3.4\pm 3.0\%$ and 0.994, respectively. In addition, the $95\%$ confidence interval of intraclass correlation coefficient and the estimated value are 0.992$\sim$0.996 and 0.994, respectively. Third, a paired t-test was carried out for evaluating the accuracy of the passive sampler (n=40). In the result of the test, the $95\%$ confidence interval of the difference was -1.710 ppb <$\gamma$< 0.788 ppb. Finally, the average concentration of blanks, measurement detection limit, limit of detection, and limit of quantification are $2.4\pm 0.4$ ppb, 104 ppb, 3.8 ppb, and 7.0 ppb, respectively.
The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of an intervention program using dietary consult and physical exercise conducted by public health center in Chuncheon city for obese adults. This study used a pretest-posttest design. The subjects were 58 out of 90 obese adults with body mass index (BMI) greater than $25kg/m^2$ who completed all education sessions for 8 weeks. Data on dietary habits, dietary behaviors, nutritional knowledge, anthropometric parameters and biochemical indices and daily nutrient intakes assessed by a 24-hour recall were collected before and after the intervention program., in order to evaluate program effectiveness. After the intervention, there were positive changes in exercise status and dietary habits and nutrition knowledge accuracy. Especially, the answer of 'I drink a cup of milk every day' were significantly improved (p<0.001), and the answer of 'I don't overeat', which is a dietary attitude question was significantly improved (p<0.05). Dietary intakes of most of nutrients were not significantly different between pre-test and post-test. But calcium (p<0.05), potassium (p<0.05), vitamin A (p<0.01), vitamin E (p<0.05), and folic acid (p<0.05) were significantly increased in the female group after the intervention. Weight (p<0.05), BMI (p<0.01), blood pressure (p<0.001), were significantly decreased after program, but changes of skeletal muscle mass, body fat mass were not significant. Resting heart rate (p<0.01), flexibility (p<0.001), whole body reaction (p<0.05), grip strength (p<0.01) and balance (p<0.01) showed positive changes after the intervention. Blood glucose level in serum was significantly decreased (p<0.001). These results indicated that dietary education and exercise program was effective not only for weight reduction but also for the improvement of physical fitness in obese adults.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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