For the purpose of evaluating protective components against alcohol-induced toxicity, the active components enhancing alcohol metabolism was pursued from water soluble fraction by ethanol precipitation and DEAE-cellulose chromatographic technique. As a result, various high molecular weight fractions from Aloe vera and Aloe arborescens, on a single oral administration in rats were found to cause a significant decrease in the blood ethanol concentration as well as enhancement of liver cytosolic ADH and ALDH activities and among which, a strong acidic high molecular weight fraction was demonstrated to exhibit the most potent enhancing activity on ethanol metabolism.
천연생리활성물질 소재로서 파고지 추출물의 안전성을 검증하기 위하여 렛트에 대한 단회 경구투여 독성 평가와 복귀돌연변이평가를 실시하였다. 파고지 에탄올 추출분말 2 g/kg, 5 mL를 암${\cdot}$수 각각 5마리씩 경구 투여한 후 14일 동안의 일반증상, 체중변화 및 부검시의 육안적 소견을 관찰한 결과, 사망례, 일반증상 및 체중변화는 관찰되지 않았고 부검결과에서도 특이할 만한 육안적 이상소견은 관찰되지 않아, 파고지 추출물은 $LD_{50}$값이 렛트 체중 kg당 2g 이상이며 단회 경구 투여에 대한 독성을 가지는 않는 것으로 평가되었다. 파고지 추출분말의 복귀돌연변이 유발성 여부는, 히스티딘 요구성 Salmonella Typhimurium TA98, TA100, TA1535, TA1537 균주 및 트립토판 요구성 Escherichia coli WP2uvrA(pKM101) 균주를 이용하여 S9 mix 첨가 여부에 따라 실험하였다. 용량설정시험 결과, S9 mix 첨가 여부에 관계없이 사용한 모든 시험균주에서 생육저해가 관찰되었다. 시험물질의 석출은 S9 mix 첨가 여부와 상관없이 사용한 모든 시험균주의 1,250, 2,500 및 5,000 ${\mu}g/plate$에서 관찰되었지만 콜로니 계수에는 영향이 없었다. 따라서, 본 시험의 용량은 S9 mix 미첨가 TA100, TA1537 균주 및 S9 mix 첨가 RA1535 균주의 경우에는 생육저해가 관찰된 625 ${\mu}g/plate$를, S9 mix 첨가 여부에 관계없이 TA98 균주 및 S9 mix 첨가TA100, TA1537, WP2uvrA(pKM101) 균주의 경우에는 생육저해가 관찰된 1,250 ${\mu}g/plate$를, S9 mix 미첨가의 TA1535 및 WP2uvrA(pKM101) 균주의 경우에는 2,500 ${\mu}g/plate$를 최고용량으로 하였고, 그 이하 공비 2로 최고용량을 포함한 5용량의 시험물질군과 음성대조군 및 양성대조군으로 하여 실험을 실시하였다. 그 결과, 모든 시험균주에서 시험물질에 의한 복귀변이 콜로니수는 S9 mix의 첨가 여부에 관계없이 용량의존적으로 증가되지 않았으며, 음성대조군과 비교하여 2배 이상의 증가를 보이지 않았다. 시험물질에 의한 균주의 생육저해는 S9 mix첨가 여부에 관계없이 사용한 모든 시험균주의 최고용량에서 관찰되었다. 시험물질의 석출은 S9 mix 첨가 여부에 관계없이 1,250 및 2,500 ${\mu}g/plate$에서 관찰되었지만 콜로니 계수에는 영향이 없는 것으로 나타났다.
Objectives: The aim of this study was to estimate the single oral toxicity of Peucedani Radix (PR) ethanol extracts. PR is one of the important herbs for removal of phlegm, the viscous turbid pathological product that can accumulate in the body and cause a variety of diseases. However, research on the pharmacologic toxicity of PR is lacking. Methods: In this study, PR was orally administered to 5-week-old male ICR mice at an oral dose of 2,000, 3,000, or 5,000 mg/kg. After a single-dose administration, the mortality and behavioral changes were observed daily and body weights were measured every two days. After 14 days, the organ weight, organ index, macroscopy, hematological analysis, and serum biochemistry analysis were determined. Results: No mortality, body weight changes, abnormal behavioral changes, or anatomical signs of toxicity were found. The organ weight, organ index, hematological analysis, and serum biochemistry analysis were also within the normal ranges. Conclusions: These results suggest that the 50% lethal dose of PR is more than 5,000 mg/kg. This could indicate that PR is a safe drug without acute toxicity and side effects.
울금(Curcuma longa L., turmeric)은 생강과(Zingiberaceae)에 속하는 다년생 초본 식물로 전통적으로 한약재, 향신료 및 식용으로 사용되어 왔다. 강력한 항산화 작용, 울금 에탄올 추출물의 항산화 활성, 항돌연변이성, 항염증, 항암성 및 항균성 효과 등이 보고되고 있다. 그러나 울금에 대한 생리활성 연구는 이미 많이 이루어져 있는 반면 울금에 대한 독성평가는 이루어지지 않았다. 본 연구는 울금 에탄올 추출물에 대한 안정성을 확보하기 위하여 단회경구투여 독성시험을 BALB/c 마우스를 이용하여 실시하였다. 울금 에탄올 추출물은 0, 20, 200, 2,000 mg/kg 농도로 경구 투여하였으며, 14일간 관찰 후 희생시켰다. 울금 에탄올 추출물 투여 후 운동성, 비정상적 임상증상, 부검 소견상, 체중의 유의적인 변화는 관찰되지 않았다. 혈액 생화학적 측정과 다양한 장기의 무게에서도 유의적인 변화를 관찰할 수 없었다. 이들 결과로 미루어볼 때 울금 에탄올 추출물의 단회 투여에 따른 치사량은 2,000 mg/kg 이상을 상회할 것으로 추정되며 급성독성에 어떠한 유해성이 없다는 것을 의미한다.
Lauryl alcohol을 추출제로 사용한 에탄올 추출발효를 통하여 다음과 같은 결론을 얻을 수 있었다. 1. GC를 이용한 분배계수의 측정은 Fredenslund의 UNIFAC법을 이용한 계산치보다는 고천 낮은 값을 보이나 Minier의 측정치와는 잘 일치하고, 에탄올 농도 2-10%일때 분배계수는 0.6에 달했다. 2. 물과 에탄올은 비점이 비슷하여 95% 이상의 고순도 에탄올을 단증류로 얻기 어렵지만, LaOH는 비점($225^{\circ}C$)이 높아 에탄올과 비점차가 많이 나므로 대기압하에서 단 한번의 단증류로 87% 이상의 에탄올을 거의 모두 회수할 수 있었다. 3. TBP의 경우와 마찬가지로, LaOH의 농도가 높아 질수록 lag phase는 연장도지만, 기질 소모속 도는 추출제가 없는 경우와 비교했을때 크게 변하지 않았으며, 적응과정을 거침으로써 LaOH에 의한 lag phase 지연호과가 제거되었고, 고정화 방법 또한 lag phase를 줄이는데 교과적인 방법이었다. 4. $400\;g/\;{\ell}$ 포도당 용액의 회분 추출발생에서 LaOH/medium의 비가 4였을때 포도당은 거의 전화가 되었으며, 전체에탄올생산성은 $2.75g/\;{\ell}.hr$로 비유출의 $0.99g/\;{\ell}{\cdot}hr$보다 2.78배 증가하였다. 5. 고정화 연속 혼합 발효조에서 기질유량 $25\;{m{\ell}}/hr$, LaOH유량 $100\;{m{\ell}}/hr$일때 생산성은 $5.23\;g/{\ell}.hr$로 비유출의 $3.06\;g/{\ell}.hr$보다 1.7배 증배하였다. 6. film fermentor에서 기질농도 $200\;g/{\ell}$, 기질유출 $25\;{m{\ell}}/hr$, LaOh 유량 $100\;{m{\ell}}/hr$일때 생산성이 $5.01\;g/{\ell}.hr$로 연속 혼합 발효조에서 보다 낮은 값을 보였으나, 대체로 비슷한 양상을 보였으며, 비에탄올생산성은 고천 더 놓은 값을 나타내었고, 연속 혼합 발효조 안의 bead 내 효모보다 낮은 전단력을 받기 때문에 세포가 덜 유출되었다.
본 연구는 천연물 소재인 정금나무 열매(Vaccinum oldhami fruit) 에탄올 추출물을 이용하여 항염증 효과에 대하여 검증하였다. 대식세포인 RAW 264.7 세포를 이용하여 정금나무 열매 추출물로 처리했을 때 세포 생존율을 확인한 결과 $500{\mu}g/ml$ 농도에서 118%를 나타내었다. 대식세포를 이용하여 정금나무 열매 추출물의 농도가 증가함에 따라서 변화하는 NO 생성량을 측정한 결과 최고농도 $1,000{\mu}g/ml$에서 47.3%로 감소한 것을 확인할 수 있었다. 정금나무 열매 에탄올 추출물을 Western blot을 이용하여 단백질 발현을 측정한 결과 처리한 세포군에서 농도가 증가함에 따라 iNOS와 COX-2의 단백질 발현양이 감소하여 최고 농도인 $500{\mu}g/ml$에서 각각 36.13%, 29.61%의 발현 억제를 보여주었다. Reverse-transcription PCR을 통하여 mRNA 발현양을 측정한 결과 iNOS와 COX-2의 mRNA 발현양이 감소하여 $500{\mu}g/ml$ 농도에서 62.25%, 90.07%로 내었다. 이러한 결과로 보아 정금나무 열매 에탄올 추출물의 항염증에 관한 그 효능을 확인할 수 있었고, 따라서 정금나무 열매 추출물을 이용한 천연 항염증 화장품 소재개발 이용 가능성을 넓힐 수 있을 것으로 사료된다.
정향의 mathanol 추출물로 HCI-ethanol 위손상 실험을 하여 그 방어 효과를 확인하고 이를 계통 분획한 후 각 분획에 대한 HCI-ethanol 위손상실험, 기초위액 분비실험, indomethancin 위손상실험, acetic acid 궤양 실험을 하여 추출물에 대한 급성독성과 급.만성위염 및 위손상에 대한 실험한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) $LD_{50}$은 경구투여시 3000 mg/Kg 이사이었다. (2)HCL.ethanol 위손상실험에서 EtOAc fr. 165mg/Kg과 BuOH fr. 215mg/Kg에서 손상의 크기를 유의성있게 감소시켰다. (3) Acetic Acid 궤양 실험에서 위궤양의크기가 BuOH 분획 215mg/Kg으로 유의성 있게 감소되었다. 이상의 결과로서 생각은 급만성 위염 및 위손상에 대한 세포보호 작용이 있으며 그 작용기전은 위액분비의 억제작용에 인한 것이며 그 유효성분은 대부분 butanol 분획에 존재하는 것으로 생각된다.
Carob waste is a useful raw material for the second-generation ethanol because 50% of its dry weight is sucrose, glucose, and fructose. To optimize the process, we have studied the influence of the initial concentration of sugars on the fermentation performance of Saccharomyces cerevisiae. With initial sugar concentrations (S0 ) of 20 g/l, the yeasts were derepressed and the ethanol produced during the exponential phase was consumed in a diauxic phase. The rate of ethanol consumption decreased with increasing S0 and disappeared at 250 g/l when the Crabtree effect was complete and almost all the sugar consumed was transformed into ethanol with a yield factor of 0.42 g/g. Sucrose hydrolysis was delayed at high S0 because of glucose repression of invertase synthesis, which was triggered at concentrations above 40 g/l. At S0 higher than 250 g/l, even when glucose had been exhausted, sucrose was hydrolyzed very slowly, probably due to an inhibition at this low water activity. Although with lower metabolic rates and longer times of fermentation, 250 g/l is considered the optimal initial concentration because it avoids the diauxic consumption of ethanol and maintains enough invertase activity to consume all the sucrose, and also avoids the inhibitions due to lower water activities at higher S0 .
Objective : This experimental study was performed to investigate the effects of Houttuyniae Herba extract on anti-inflammation and anti-oxidation. Methods : The cytotoxicity of Houttuyniae Herba water extract and ethanol extract about viability of Raw 264.7 cell were tested using a colormetric tetrazolium assay(MTT assay). We investigated the inhibitory effects of Houttuyniae Herba water extract and ethanol extract on Propionibactrium acnes using paper disk diffusion method. To investigate the anti-inflammation effects of Houttuyniae Herba water extract and ethanol extract on LPS-induced macrophage Raw 264.7 cell, we used ELISA kit. We evaluated anti-oxidation effects of Houttuyniae Herba water extract and ethanol extract on HaCaT cell by Enzyme recycling method. Results : 1. In Houttuyniae Herba water extract and ethanol extract, cell toxicity depended on the density and wasn't difference between two extracts. 2. Houttuyniae Herba water extract and ethanol extract has not the significant inhibition effect of Propionibactrium acnes. 3. Concentration of 50, $100{\mu}g/m{\ell}$ Houttuyniae Herba water extract inhibited the production of NO in the Raw 264.7 cell stimulated with LPS. 4. All extracts except for $20{\mu}g/m{\ell}$ Houttuyniae Herba water extract showed anti-oxidation effect by decreasing the DPPH radicals. Conclusion : These results indicate that Houttuyniae Herba extract has anti-inflammation and anti-oxidation effects. If further study is performed, the use of Houttuyniae Herba extract will be valuable and benificial in the therapy of Propionibactrium acnes.
본 연구에서는 최적의 조건에서 추출된 지누아리 추출물의 항산화능과 항염능을 확인하였다. 다양한 ethanol 수용액으로 지누아리의 유용물질을 추출하여 DPPH, ABTS, nitrite 라디컬 소거능을 측정하고, 폴리페놀 및 플라보노이드 함량을 분석하였다. 20% ethanol 수용액으로 추출한 경우에 라디컬 소거능이 가장 우수하였고, 폴리페놀과 플라보노이드의 함량 또한 가장 높았다. 이로부터 20% ethanol 수용액이 지누아리의 항산화 및 항염 물질을 효율적으로 추출하였음을 확인하였다. 한편, RAW 264.7 세포주를 이용하여 지누아리 추출물의 세포독성과 항염능을 확인하였다. 지누아리 추출물은 200 ㎍/mL의 농도에서 독성을 나타내지 않았고, 이 농도에서 50% 이상의 NO 생성 억제능을 나타냈다. 이러한 결과로 지누아리 추출물은 항산화 및 항염 특성을 지니는 기능성 화장품 원료로 사용 가능함을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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