To use cultured mucosa as a graft of full thickness, our laboratory has been involved in the development of techniques to grow epidermis together with connective tissue. Human oral mucosa was obtained at dental surgery. Under sterile conditions the tissues were cut into explants of 0.1 $cm^2$ which were placed in the center of 24 well tissue culture dishes and incubated in a growth medium. The growth medium used for epithelial was MEM(Minimum Essential Medium) supplemented with 10% fetal calf serum, 0.5% dimethyl sulfoxide, glutamine (0.292 g/l), epidermal growth factor (40 ug/ml), cholera toxin (30 ng/ml), hydrocortisone (2 ug/ml), insulin (40 ug/ml) and transferin (5 ug/ml). The medium for stratification of epithelial cells was MEM supplemented with 10% fetal calf serum, 0.5% dimethyl sulfoxide and glutamine (0.292 g/l). The medium used for fibroblasts was MEM supplemented with 10% fetal calf serum. With the three types of media used alternatively, a mucosa composed of epidermis and connective tissue was obtained after 3 weeks of culture.
Keratinocyte overgrowth after UVB exposure is believed to contribute to skin photoageing and cancer development. However, little is known about the transcription factors that epigenetically regulate keratinocyte response to UVB. Recently, $HIF-1{\alpha}$ was found to play a role in epidermal homeostasis by controlling the keratinocyte cell cycle, and thus, we hypothesized that $HIF-1{\alpha}$ is involved in UVB-induced keratinocyte growth. In cultured keratinocytes, $HIF-1{\alpha}$ was found to be down-regulated shortly after UVB exposure and to be involved in UVB-induced proliferation. In mice repeatedly treated with UVB, the epidermis became hyperplasic and keratinocytes lacked $HIF-1{\alpha}$ in nuclei. Based on these results, we suggest that the deregulation of $HIF-1{\alpha}$ is associated with UVB-induced hyperplasia of the epidermis. This work provides insight of the molecular mechanism underlying UV-induced photoageing and skin cancer development.
To investigate goose feather follicle development and difference among the dorsal, ventral, and thoracal tracts during embryonic stage, the present study was conducted on 180 embryos at different ages obtained from the Jilin White goose, a Chinese indigenous breed. The study indicated that the epidermis and dermis of goose embryo formed between embryonic day 10 (E10) and 12 (E12). The thickness of the epidermis remained unchanged until hatching; while the thickness of the dermis increased throughout embryonic development. The primary feather follicles formed around E13-E14 and there were no new primary feather follicles forming after E18. The secondary feather follicles formed coincidently at E18. The density of primary and secondary feather follicles on the ventral and thoracal tracts were significantly higher than those on the dorsal tract (p<0.05). For primary and secondary follicles, the diameter of the feather bulbs and the depth of the feather follicles on the dorsal tract were much greater than those on the thoracal and ventral tracts (p<0.01), respectively; while the difference between the ventral and thoracal tracts was not significant (p>0.05). It is concluded that the Jilin White goose is of a single-follicle group structure, differing from mammals which are of multiple-follicle group structure.
Human eyes and skin are frequently exposed to chemicals accidentally or on purpose due to their external location. Therefore, chemicals are required to undergo the evaluation of the ocular and dermal irritancy for their safe handling and use before release into the market. Draize rabbit eye and skin irritation test developed in 1944, has been a gold standard test which was enlisted as OECD TG 404 and OECD TG 405 but it has been criticized with respect to animal welfare due to invasive and cruel procedure. To replace it, diverse alternatives have been developed: (i) For Draize eye irritation test, organotypic assay, in vitro cytotoxicity-based method, in chemico tests, in silico prediction model, and 3D reconstructed human cornealike epithelium (RhCE); (ii) For Draize skin irritation test, in vitro cytotoxicity-based cell model, and 3D reconstructed human epidermis models (RhE). Of these, RhCE and RhE models are getting spotlight as a promising alternative with a wide applicability domain covering cosmetics and personal care products. In this review, we overviewed the current alternatives to Draize test with a focus on 3D human epithelium models to provide an insight into advancing and widening their utility.
Pectin lyase-modified red ginseng extract (GS-E3D) is a newly developed ginsenoside Rd-enriched ginseng extract. This study was designed to investigate the skin safety of GS-E3D. Single oral toxicity, single dermal toxicity, bovine corneal opacity and permeability (BCOP) assay, skin irritation test with $SkinEthic^{TM}$ human epidermis model, skin sensitization local lymph node assay, and human patch test, were examined. The oral and dermal $LD_{50}$ value of GS-E3D was over 2,000 mg/kg in rats. GS-E3D was identified as a non-irritant to skin in BCOP assay, human epidermis models, and patch test from the 32 human subjects. The skin sensitization potential of GS-E3D was less than 25% in local lymph node assay. These results indicate that GS-E3D can be used as a safe ingredient without adverse effects in various skin care products.
The effectiveness of Palmarosa, Neroli and Jasmin blending oil on dry skin of rat induced by kitchen detergent are investigated. The experimental groups were divided the control group, group treated with surfactant, group treated with Palmarosa and Neroli, and group with Palmarosa, Neroli and Jasmin. Observation of epidermis and the alteration of mast cell were performed with photomicroscope. According to the epidermis morphological changes analysis, the A3 group treated with Palmarosa, Neroli and Jasmin blending oil was appeared the most similar with the control group, and the A2 group applied with Palmarosa and Neroli blending oil was sequently displayed similar characteristics. The collagen layer's breakaway resulting from Palmarosa essential oil, the collagen layer's restoration resulting from Neroli essential oil, the collagen layer's retention hyperkeratosis resulting from Jasmin essential oil were observed in the structure of the epidermal layer. In photomicrosope observation of mast cell to examine the inflammatory reactions, the increase in size and number of mast cell were showed in A1 group treated with surfactant compared to the control group. The number of mast cells definitely decreased in groups which were treated with Palmarosa, Neroli and Jasmin blending oil.
This study was carried out to investigate change of ginsenoside contents in red and fresh ginseng according to root part and age by hydrolysis. Neutral total ginsenoside contents by hydrolysis in 6-year main root and lateral root were significantly increased than those by non-hydrolysis, as 41.6 and 32.8%, respectively. However, there was no significant difference in red ginseng. In fresh ginseng, ginsenoside contents of the protopanaxatriol group such as Re, Rf, $Rg_1$, $Rg_2$, and $Rh_1$ were not significantly different, but $Rb_1$, $Rb_2$, $Rb_3$, Rc, and Rd showed significant difference. The increase rate of neutral total ginsenoside content by hydrolysis was higher in epidermis-cortex than stele. Also, the neutral total ginsenoside content was fine root > rhizome > lateral root > main root, respectively. While there was no tendency towards the increase of ginsenoside by hydrolysis with the increase of root age in fine root and rhizome, there was significant decrease in main root and lateral root.
본 연구에서 분만 중에 사망한 여성미라의 자궁 내에 있는 태아미라의 두피를 주사전자현미경과 투과전자현미경을 사용하여 관찰하였다. 주사전자현미경상에서 태아 두피의 표면은 잘 보존된 상태로 관찰되었으며, 각질층에 각화세포도 모양을 그대로 유지하고 있었다. 또한 땀샘과 모발도 원형 그대로 유지하고 있었으며 일부 두피표면에 모발이 빠져서 형성된 모공들이 다수 관찰되었다. 채취한 두피의 횡단면 두께는 약 1mm로 나타났으며 표피와 진피 및 피하조직이 뚜렷하게 존재하였다. 투과전자현미 경상에서 상피세포의 구조나 형태는 관찰되지 않았으며 또한, 세포의 형태를 그대로 유지하고 있는 어떠한 세포들도 전혀 관찰할 수 없었다. 그러나 진피의 교원섬유들은 잘 보존되어 있었고 이들 사이에 Clostridium 속으로 추정되는 부패세균들이 다수 관찰되었다.
왕겨를 증류하여 생성된 왕겨초 증류액을 이용하여 접촉성 피부염에 어떤 영향이 있는지를 검토하였다. 왕겨초 증류액(2%)에 자소옆을 첨가한 샘플은 dinitrochlorobenzene에 의해 유발된 접촉성 피부염 질환 동물모델에서 피부상피조직의 비후정도를 약 20%정도의 수준으로 완화시키며, 이는 면역조직화학적인 방법으로 확인하였다. 이 결과로, 왕겨초 증류액은 아토피 완화 효과를 가지므로 이들의 적합한 조건을 확립한다면 향장소재 또는 이의 조성물로 유용하게 이용될 수 있다고 판단된다.
Urodeles including newt and salamander have remarkable regenerative capacity during the postembryonic life span. Some of the unique features are the formation of the well-developed wound epidermis and the active dedifferentiation process in the early phase of regeneration. These are regarded as key events for the successful regeneration since no further regenerative activity is possible without them. In this study, we investigated the role of retinoic acid (RA) in salamander limb regeneration by blocking RA synthesis using disulfiram, an inhibitor of aldehyde dehydrogenase that oxidizes retinal to RA. Disulfiram treatment resulted in delaying the limb regeneration processes via inhibition of wound epidermis formation and dedifferentiation process. When RA was administered after disulfiram treatment, the inhibitory effect of disulfiram was rescued. In addition, disulfiram treatment after the dedifferentiation stage resulted in the mild retardation of limb regeneration, suggesting that RA might also be involved in the blastema outgrowth. Furthermore, salamander MMP-9 gene expression was also inhibited by disulfiram treatment. Collectively, our findings indicate that endogenous RA may play an important role(s) in the early phase of limb regeneration by regulating the expression of molecules responsible for the modification of intracellular and extracellular environment during salamander limb regeneration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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