The hyphal tip laccase of Coprinus congregatus which is a membrane-associated enzyme and shows diffdrdnt banding patterns of PAGE analysis when compared with the enzyme of liquid culture (Choi et al. 1987) has been successfully secreted to culture medium in liquid shake culture by lowering the pH of medium to 4.0. When the fungus is cultivated in YpSs(pH 4.0) liquid, only the hyphal tip laccase is found in the medium after 6 hr incubation and there is no liquid-type enzyme when examined by PAGE analysis.
The cultivtion efficiencies of enzyme treated nightsoil liquid manure were investigated. As a result of applying the liquid manure prepared by the nightsoil digestion due to aerobic or anoxic conditions with enzyme treatement to cultivate greenstuffs as compared with the controls (conventional cultivation) due to application of none enzyme treated fertilizer, the yield was markedly increased. In the cases of kidney bean, seedleaves were increased over 2~4 times and stem growth and diameter was increased 40% as compared the controls. Finally, cultivation yield of liquid manure prepared by the nightsoil aerobic or anoxic digestion with enzyme treatment were more increased as compared with the controls.
This study was attempted to simplify the complex steeping mechanism and propose the scientific approach of microorganism. As Enzyme activity showed that as steeping hours increase, the а-amylase activity increased. Most commonly microorganisms in steeping liquid were Corynebacter spp., Candida spp. and Lactobacillus spp. According to results, steeping acidifies the character of glutinous rice, affec-ting the starch's n-amylase and bring about component's changes. As Candide spp. and Lactobaillus spp. of the steeping liquid increase, the character of liquid is acidifying.
This study was carried out to develop an effective liquid-phase double antibody enzyme immunoassay for determining of progesterone. The optimum conditions of assay system, 1st and 2nd antibodies, enzyme conjugate, and time reaction were invested. The bovine plasma progesterone level in dairy cattle and korean native bulls were also analyzed. The results obtained were as follows; 1. The reproducibility of petroleum ether was superior to that of ethyl ether as extract solvent of progesterone in plasma. 2. The optimum dilution rate of 1st and 2nd antibody was 30,000 and 10 times, respectively. Affer the reaction of enzyme conjugate to progesterone 1st antibody, and then 2nd antibody competition reaction was enough for over 1hr. 3. Average plasma progesterone level in 4 pregnant and 9 nonpregnant Holstein was $2.5{\pm}0.5$ and $0.7{\pm}0.2ng/m{\ell}$, respectively. Average plasma progesterone level of 10 Korean native bulls was $0.1{\pm}0.001ng/m{\ell}$ From these results, by using liquid phase double antibody enzyme immunoassay for progesterone is applicable to detect of early pregnancy diagnosis, factorial analysis of reproductive disorder, and also reproductive physiological function such as monitoring of cyclicity during the post-partum period.
From the outer membrane portion of Gram-negative Klebsiella pneumoniae, the activity of 2-furaldehyde dehydrogenase depending upon beta-nicotinamide adenine dinucleotide was detected. Cytoplasmic membrane was preferentially extracted from crude membrane with $Mg^{2+}$ and Triton X-100, and then outer membrane was collected by ultracentrifugation. The crude enzyme was obtained by solubilization of outer membrane with lysozyme, ethylene diamine tetraacetate and Triton X-100. Thereafter 2-furaldehyde dehydrogenase was partially purified through column chromatography on QAE-Sephadex Q-50 and Sephadex G-150 and the enzyme activity was analyzed by means of high performance liquid chromatography. The optimal pH for the activity of the enzyme was about 9.5 and the optimal temperature was about $85^{\circ}C$. The partially purified enzyme retained tis activity at $85^{\circ}C$ for 5 hours. The optimal concentration of Triton X-100 for the activity of the enzyme was about 1.5% in the reaction mixture.
This experiment was carried out to determine the progesterone concentration of bovine plasma by liquid phase double antibody enzyme immunoassay. The optimum conditions of assay-system, double (first and second) antibody and carrier (normal rabbit serum) were investigated. The optimum dilution rate of first antibody, second antibody and normal rabbit serum was $10{\times}10^3$ to $15{\times}10^3$, 20 and $1{\times}10^3$ times, respectively.
This study was carried out to investigate the effect of enzyme complex on odor emission from swine slurry and the process of making swine liquid manure. Ammonia and hydrogen sulfide concentrations were significantly decreased by using the enzyme complex of liter per ton level of liquid swine slurry in the manure storage tank according to the time. Characteristics of liquid swine slurry were affected by the enzyme complex, total nitrogen and ammonia nitrogen contents were reduced compare with control. Ammonia and hydrogen sulfide concentrations in the finishing pig building and offensive odor compound on the boundary line of swine farm were significantly decreased by spraying in swine finishing building. In conclusion, the results obtained from this study suggest that using the enzyme complex of liter per ton level of liquid swine slurry for making liquid swine manure may improve the quality of swine liquid fertilizer and reduce odor emission. Also farm scale enzyme complex treatment may improve air quality in finishing pig building and deduce offensive odor compound of swine farm.
This study focus was primarily the development of liquid starters for Aspergillus oryzae and Aspergillus niger prepared with wheat bran as a low cost culture medium. For the preparation of the liquid media wheat bran was added at rates of 0, 5, 10, 15 and 20% and the Aspergillus sp. strains were then inoculated to these prepared broths. The results indicated that the more that wheat bran was contained in the medium, the more mycelia was produced for A. oryzae and A. niger. The highest enzyme activities were obtained with a 10~15% adding rate of wheat bran for both strains. Changes in the enzyme activities of the liquid starters during various incubation times (0, 24, 48, 72 and 96 hrs), indicated that the highest enzyme activities were seen between 48 and 72 hrs of culture. In addition, a comparative study was carried out on the production of enzymes using wheat as a substrate in nuruk, with liquid starter made from fermented agents according to the same concentrations used with the wheat bran. The pH, acidity, amino acidity, reducing sugar content and enzyme activity (${\alpha}$-amylase, glucoamylase, acidic protease) of wheat nuruk made with liquid starter were compared with those of wheat nuruk made with solid starter. The results suggest that the liquid starter is superior in both cases.
Bacillus strains capable of producing fibrinolytic enzyme were isolated from traditional fermented Korean soybean paste and Japanese fermented soybean (Natto). Among the 16 strains, a selected Bacillus sp. was identified as bacillus firmus, with 80.7% homology, by API kit analysis. Seed starter or B. firmus NA-1 was prepared with 5% soymilk prepared from micronized soybean powder. To produce fibrinolytic enzyme by B. firmus NA-1 the liquid culture was performed with NB broth (pH 7.0) fortified with 1% galactose, 0.1% tryptone, and 0.5% $K_2$HPO$_4$, by shaking with 180 rpm at 37$^{\circ}C$. Fibrinolytic enzyme activity reached the highest value at 7.8 unit/mL (plasmin unit) after fermentation for 72 hr. The crude fibrinolytic enzyme showed higher relative activity in the range of pH 7.0∼9.0. The activity of crude fibrinolytic enzyme was well maintained even after concentration by the vacuum evaporation at 5$0^{\circ}C$ for 1 hr.
Five types of agricultural wastes were used for the production of xylanolytic enzyme by Aspergillus flavus K-03. All wastes materials supported high levels of xylanase and ${\beta}-xylosidase$ production. A high level of proteolytic activity was observed in barley and rice bran cultures, while only a weak proteolytic activity was detected in corn cob, barley and rice straw cultures. Maximum production of xylanase was achieved in basal liquid medium containing rice barn as carbon source for 5 days of culture at pH 6.5 and $25^{\circ}C$. The xylanolytic enzyme of A. flavus K-03 showed low thermostability. The times required for 50% reduction of the initial enzyme activity were 90 min at $40^{\circ}C$, 13 min at $50^{\circ}C$, and 3 min at $60^{\circ}C$. Xylanolytic activity showed the highest level at pH $5.5{\sim}10.5$ and more than 70% of the original activity was retained at pH 6.5 and 7.0. The higher stability of xylanolytic enzymes in the broad range of alkaline pH is useful for utilization of the enzymes in industrial process requiring in alkaline conditions. Moreover, the highest production of xylanolytic enzyme was obtained when 0.5% of rice bran was supplied in basal liquid medium. SDS-PAGE analysis revealed a single xylanase band of approximately 28.5 kDa from the culture filtrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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