본 연구는 부산지역 하천에서 plasmid 매개성 광범위 ${\beta}-lactam$ 분해효소(extended spectrum ${\beta}-lactamase;\;ESBL$)를 생성하는 세균을 분리하여 생성된 광범위 ${\beta}-lactam$ 분해효소를 유형별로 분류하기 위함이다. Escherichia coli 6균주와 Klebsiella pneumoniae 15균주가 피전달균주인 Escherichia coli J53 $Azid^{R}$에 plasmid 매개성 광범위 ${\beta}-lactam$ 분해효소 생성 인자를 전달하였다. PCR 후 얻은 유전인자를 plasmid로 매개된 광범위 ${\beta}-lactam$ 분해효소 유전자의 염기서열 분석결과, E. coli와 K. pneumoniae 유전자를 BCM Search Launcher 및 GenBank nucleotide database를 통하여 검색한 결과 ESBL 유형은 TEM-52형과 SHV-12형이었다. TEM-52는 E. coli와 K. pneumoniae 양쪽에서 분리되었다. 그러나 SHV-12는 K. pneumoniae에서만 분리되었다. 이상의 결과로부터 plasmid 매개성 광범위 ${\beta}-lactam$ 분해효소를 생성하는 세균이 한국에서는 이미 임상범위를 넘어 자연계까지 확산되었음을 알 수 있었다.
가정쓰레기 매립지 토양에서 분리된 Enterobacter sp. SNU-1453은 Enteric bacteria에 속하는 종(species)으로서 혐기 발효 시 효과적으로 수소를 생산하였다. 이러한 fermentative bacteria는 여러 가지 외부 요인에 의해 다른 metabolism을 나타내어 수소생산량에 영향을 준다. 혐기 발효가 진행됨에 따라 배지의 pH가 급격히 감소하여 미생물 성장과 수소생산에 영향을 미치므로, pH에 따른 metabolism변화를 관찰함으로써 수소생산을 극대화하기 위한 최적 pH 조건을 선정하여 제어할 필요가 있다. 본 연구에서는 수소생산에 대한 pH의 효과 및 pH 제어에 따른 metabolic flux를 분석하였다. 실험 결과 이 분리 균주는 매우 넓은 영역의 pH(4-7.5)에서도 수소를 생산하였으며, pH 7에서 가장 높은 수소생산량을 나타내었다. pH 7로의 제어는 butanediol pathway로부터 수소 생산에 더 유리한 mixed acid fermentation pathway로 metabolic flux를 변화시킴을 알 수 있었다.
음식물류폐수와 축산분뇨를 1:1로 혼합한 폐수를 대상으로 고온/중온의 이상혐기소화공정을 실시하였고 혼합폐수내 병원성미생물의 존재 및 소화과정중 미생물상의 변화를 살펴보았다. 혼합원액내 미생물은 대장균, 분변성 장내세균, 대장균군 등의 장내세균총을 비롯하여 식중독을 일으키는 포도상구균과 살모넬라, 이질의 원인균인 쉬겔라, 유가공제품내 대표적 병원성세균인 리스테리아 및 효모 등이 검출되었다. 혐기소화의 안정화시기는 반응후 21일이 지나서부터 시작하였으며, 이 시기를 전후하여 산 발효조와 메탄발효조에서 각각 80% 및 90% 내외의 가파른 감소율을 보이며 대부분의 미생물이 감소되었다. 안정화이후 유기물의 평균분해율은 메탄발효조에서 60% 내외를 기록하였다. 메탄 발효조를 거친 소화액내 미생물개체수는 반응종료 시점에서 대부분 불검출 되었으나, 리스테리아와 포도상구균의 경우, 비교적 완만한 감소세를 보이며 반응최종일까지 검출이 되고 있음을 확인하였다.
Salmonella typhi infection, which was the most frequent enteric infection in Korea, has been decreasing, while the infection of other serogroups of Salmonella has been increasing since the later part of 1970s. In 1986, the number of serogroup B isolated by us increased to 46, which corresponds 21.1% of all enteropathogenic bacteria isolated from stool specimens. Salmonella isolates resistant to antimicrobial agents were extremly rare in Korea, in the 1970s. However, 7 of 13 serogroup B isolates showed resistance to ampicillin or to chloramphenicol in 1984. Among the serogroup B isolates in 1986, 71.7% and 69.6% were resistant to ampicillin and to chloramphenicol respectively. The minimum inhibitory concentrations of ampicillin and chloramphenicol against these isolates were >$128\;{\mu}g/ml$ and $128\;{\mu}g/ml$ respectively.
The gut is the largest organ that helps with the immune function. Gut health, especially in young pigs has a significant benefit to health and performance. In an attempt to maintain and enhance intestinal health in pigs and improve productivity in the absence of in-feed antibiotics, researchers have evaluated a wide range of feed additives. Some of these additives such as zinc oxide, copper sulphate, egg yolk antibodies, mannan-oligosaccharides and spray dried porcine plasma and their effectiveness are discussed in this review. One approach to evaluate the effectiveness of these additives in vivo is to use an appropriate disease challenge model. Over the years, researchers have used a number of challenge models which include the use of specific strains of enterotoxigenic Escherichia coli, bacteria lipopolysaccharide challenge, oral challenge with Salmonella enteric serotype Typhimurium, sanitation challenge, and Lawsonia intercellularis challenge. These challenge models together with the criteria used to evaluate the responses of the animals to them are also discussed in this review.
Swine proliferative enteritis(SPE) caused by inかsoma intracellularis is a common enteric disaese of grower and finisher pig. Swine affected with SPE show variable clinical signs including diarrhea, weight loss, aberrant growth and death. The characteristic lesion of ileitis at necropsy is marked thickening of the last section of the small intestine. The inner lining of the thickened intestine proliferates almost like a cancer and curved rod bacteria(L intracellularis) are always seen inside the intestinal wall. Infected swine shed the organism in the feces. Isolation and growth of pure L intracellularis in vitro requires a suitable cell culture. This procedure is difficult and not a practical means of diagnosis, thus the polymerase chain reaction(PCR) test of feces can be used to determine whether a pig is shedding the infective organism. A sensitive assay based on amplification of a 319bp DffA fragment of the L intracellularis of Swine proliferative enteritis was attempted for the detection of the organism in the 62 feces of swine. L intracellularis was identified on three herds and detected in 6 fecal samples, representing a infection rate of 9.7%. The PCR was very sensitive and specific on the individual level. The PCR technique could be very useful for the diagnosis of this disease.
A new technique has been developed for the preparation of Lactobacillus microcapsules to enhance the stability against high temperature, humidity, gastric acid and bile acid. Employing fluidized bed coating, primary sub-coating was processed in non-organic solvent system, so that Lactobacillus did not directly contact with organic solvent. Secondary enteric-coating was processed in organic solvent with low temperature $(below\;33^{\circ}C)$ technique, which minimized the heat labilability of Lactobacillus. Survival rate of Lactobacillus within microcapsule was not less than 95% and acid tolerance was above 30% in the artificial gastric acid. Further more it was dissolved in the artificial intestine juice within 2-3 hr. Average size of Lactobacillus microcapsules was $450\;{\mu}m$(25-50 mesh) and its viability was above 90% in the direct tableting.
The aim of this study was to assess the Clinical Usefulness of Helicobacter pylori Stool Antigen (HpSA) immunochromatographic assay for the diagnosis of H. pylori infection. In this study, we had compared HpSA-immunochromatographic assay with CLO test and UBT test. From a total of 140 patients (M:F=88:52) with upper endoscopy, biopsy specimens were obtained for CLO test. Stool specimens was collected from all patients and tested using a HpSA-immunochromatic assay. H. pylori infection status was defined as infected if the results of both CLO test and UBT test were positive. CLO test and UBT test findings showed that 92 patients were H. pylori positive and 48 patients were H. pylori negative. According to this definition, the sensitivity, specificity, and positive or negative predictive value (PPV, NPV) of HpSA-immunochromatographic assay were 97.8%, 100%, 100%, and 96%, respectively. Cross reactivity test of HpSA-immunochromatographic assay were performed with 10 enteric bacteria strains in fecal habitat, and there were no false positive reaction. We evaluated the usefulness of HpSA assay for eradication therapy with 10 of 92 H. pylori positive patients, positive results of them at pre-eradication therapy were converted to negative at post-eradication. The HpSA-immunochromatographic assay is a highly sensitive and specific non-invasive diagnostic method for detection of H. pylori infection, a useful diagnostic method for H. pylori in post eradication stage.
Klebsiella pneumoniae 의 phoA 유전자를 함유하는 DNA를 plasmid pACYC184에 클로닝 하였다. 클로닝된 DNA의 크기는 4.0 kb이었으며 제한효소지도를 작성한 결과 3개의 PstI 절단부위와 4개의 PvuII 절단부위가 발견되었다. Klebsiella pneumoniae 의 phoA 유전자의 염기서열은 Escherichia coli와 매우 유사하여 80%의 유사성을 보였으며 이는 이 두 균종이 서로 유전적으로 매우 가까운 관계에 있음을 시사하였다.
Ruminal methane production functions as the main sink for metabolic hydrogen generated through rumen fermentation and is recognized as a considerable source of greenhouse gas emissions. Methane production is a complex trait affected by dry matter intake, feed composition, rumen microbiota and their fermentation, lactation stage, host genetics, and environmental factors. Various mitigation approaches have been proposed. Because individual ruminants exhibit different methane conversion efficiencies, the microbial characteristics of low-methane-emitting animals can be essential for successful rumen manipulation and environment-friendly methane mitigation. Several bacterial species, including Sharpea, uncharacterized Succinivibrionaceae, and certain Prevotella phylotypes have been listed as key players in low-methane-emitting sheep and cows. The functional characteristics of the unclassified bacteria remain unclear, as they are yet to be cultured. Here, we review ruminal methane production and mitigation strategies, focusing on rumen fermentation and the functional role of rumen microbiota, and describe the phylogenetic and physiological characteristics of a novel Prevotella species recently isolated from low methane-emitting and high propionate-producing cows. This review may help to provide a better understanding of the ruminal digestion process and rumen function to identify holistic and environmentally friendly methane mitigation approaches for sustainable ruminant production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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