피부에서 엘라스틴(elastin)은 중요한 탄력섬유의 구성성분 중의 하나이다. 피부주름(skin wrinkle) 형성은 콜라겐(collagen)의 합성과 분해가 중요한 요인으로 작용한다고 알려져 있지만, 최근 많은 연구에서 엘라스틴의 재형성과 분해 또한 주름형성 기전에서 중요한 작용을 하는 것으로 보고되고 있다. 엘라스타제(elastase)는 엘라스틴을 분해하는 일종의 메탈로프로테이나제(metalloproteinase)이며, 자외선 B (ultraviolet B, UVB) 조사 후에 활성이 증가하는 것으로 알려져 있다. 따라서 증가된 엘라스타제의 활성은 피부의 탄력성 감소와 주름 형성의 주요한 원인이 될 것이다. 본 연구에서는 항산화 효과가 있으며, 각종 견과류나 과일에 함유된 폴리페놀(polyphenol)성분인 탄닌산(tannic acid)을 사람의 섬유아세포(CCD-25Sk fibroblasts)에 처리하여 엘라스타제 활성과 트로포엘라스틴 생성에 미치는 영향을 조사하였다. 탄닌산은 농도의존적으로 사람의 섬유아세포 엘라스타제 활성을 유의성 있게 억제시켰다. 그러나 트로포엘라스틴 합성이나 발현증가에는 유의성 있는 효과를 보이지 않았다. 이러한 결과들로부터 탄닌산은 엘라스타제의 활성을 억제시켜 엘라스틴의 3차원적 구조를 유지하는데 기여하는 것으로 사료된다. 따라서 탄닌산은 주름생성을 억제하는 물질로 개발 가능할 것으로 기대된다.
The serine proteases such as human leukocyte elastase (HLE) and porcine pancreatic elastase (PPE) are classified in the chymotrypsin family, and possibly the most destructive enzymes having the ability to degrade virtually all of the connective components in the body. In the present study, the extracts of water and methanol of Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum) inhibited significantly the PPE activity. The fractions eluated on Amberlite XAD-2 from methanol extract were further purified on the repeated $SiO_2$ column chromatography and the fractions A, B and C were eluated. The fractions A, B and C at 3 mg/ml inhibited significantly the PPE activity up to 66%, 95% and 85%, respectively. In conclusion, the fraction A assumed as lignans or phenylpropanes, and fraction B and C assumed as triterpenoids showed the PPE inhibitory effects on the PPE and that these compounds in mistletoe may be used for treatment of pathological processes such as age-dependent tissue loss or inflammation.
본 연구에서는 비교적 가격이 저렴하고 부작용이 없으면서 효능이 우수한 노화 억제 관련 생리 기능성 제품을 개발하고자 먼저 다양한 종류의 약용식물을 대상으로 물과 메탄올 추출물을 제조한 후 이들의 항산화 활성, SOD 활성과 elas-tase저해 활성을 측정하여 우수 약용식물을 선발한 후 이들로부터 노화 억제 관련 생리 활성 물질들의 추출 최적 조건을 검토하였다. 124종의 약용식물에 대한 물과 메탄올 추출물 가운데 항산화 활성은 도인(Prunus persica)의 메탄올 추출물이 98.4$\%$로 가장 높았고, SOD 활성은 구기자(Lycium chinense)의 물 추출물이 197$\%$로, elastase 저해활성은 상엽(Morus alba) 메탄올 추출물이 41$\%$로 가장 높았다 또한 항산화물질은 도인(Prunus persica)을 메탄올로 1 :20 현탁시킨 후 40$^{\circ}C$, 12시간 추출하였을 때 가장 많이 추출되었고 SOD 활성 물질은 구기자(Lycium chinense)를 1:30의 물로 30$^{\circ}C$, 12시간, elastase 저해 물질은 상엽 (morus alba)을 메탄올로 50$^{\circ}C$에서 12시간 진탕시켰을 때 가장 많이 추출되었다.
Objectives : Recently, the demands for the effective and safe depigmentating and anti-aging agents of the skin have increased due to the medical, pharmaceutical and cosmetic reasons. The aim of this study is to search new materials from the traditional herbal medicines which inhibit the aging process of skin in vitro.Methods : Human dermis cell (HS68) was used to test the effect of Rhus verniciflua Stokes (RVS). 80% ethanol or water extracts were screened for their inhibitory activities against elastase. Elastase inhibition effect was tested by microplate reader instrument. And MMP-1 suppression effect of RVS was tested by western blot. These cells were investigated the viability by MTS assay. And also the inhibition effect of tyrosinase by RVS was tested.Results : RVS (final concentrstion 1 ㎎/㎖ appeared over 30% of inhibition of elastase activity. So we are investigated anti wrinkle effects of Rhus verniciflua Stokes look through MMP-1 inhibition activity, also Extracts of RVS showed higher anti-tyrosinase activity than arbutin as final concentration 1 mg/ml. These results suggest that herbal medicines could be strong potential sources of inhibition of anti-aging and whitening effects for the skin.Colclusions : RVS was the best suppressor candidate of elastase activity among other control oriental drugs. It was found that RVS did not have toxicity to cells. We found proper concentration of RVS to treat in HS68 culture and investigated not only wrinkle care effect but also whitening effect of RVS.
Im, Kyung Hoan;Baek, Seung A;Choi, Jaehyuk;Lee, Tae Soo
Mycobiology
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제47권4호
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pp.494-505
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2019
In this study, the antioxidant, anti-xanthine oxidase, anti-melanogenic and anti-wrinkle effects of methanol (ME) and hot water (HE) extracts from the fruiting bodies of Phellinus vaninii were investigated. The 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl free radical scavenging activity of 2.0 mg/mL HE (95.38%) was comparable to that of butylated hydroxytoluene (96.97%), the reference standard. The hydroxyl radical scavenging activities of ME (98.19%) and HE (97.55%) were higher than that of butylated hydroxytoluene (92.66%) at 2.0 mg/mL. Neither ME nor HE was cytotoxic to murine melanoma B16-F10 cells at 25-750 ㎍/mL. Although the xanthine oxidase (XO) inhibitory effects of ME and HE were significantly lower than that of allopurinol, the values were higher than 84 percent. The in vitro tyrosinase inhibitory activities of ME and HE were comparable to kojic acid at 2.0 mg/mL. The cellular tyrosinase and melanin synthetic activities of ME and HE on B16-F10 melanoma cells at 500 ㎍/mL were higher than arbutin, indicating that the inhibitory effects of arbutin on the tyrosinase and melanin synthesis were higher than those of ME and HE. The collagenase inhibitory activity of HE was comparable to EGCG at 2.0 mg/mL, however, the elastase inhibitory activity of ME and HE was lower than EGCG at the concentration tested. The study results demonstrated that the fruiting bodies of Ph. vaninii possessed good antioxidant, anti-xanthine oxidase, cell-free anti-tyrosinase, cellular anti-tyrosinase, anti-collagenase, and moderate anti-elastase activities, which might be used for the development of novel anti-gout, skin-whitening, and skin anti-wrinkle agents.
숙지황(Rehmannia glutinosa)으로부터 유용성분 추출은 40% 에탄올 추출물에서 $5.1{\pm}0.2mg/g$으로 가장 높은 phenolic compound 함량을 나타내었다. 숙지황 추출물의 항산화활성은 전자공여능의 경우 물 추출물과 40% ethanol 추출물 모두에서 85~93%의 높은 전자공여능이 확인되었으며, ABTS radical cation decolorization의 경우 물 추출물과 40% ethanol 추출물이 55~62%의 비슷한 수준의 항산화효과를 효과를 나타내었고, antioxidant protection factor (PF)는 $200{\mu}g/ml$의 농도에서 물 추출물과 40% ethanol 추출물 모두에서 1.6~1.9 PF의 높은 항산화력이 확인되었고, TBARs는 물 추출물과 40% ethanol 추출물이 비슷한 수준의 항산화효과를 효과를 나타내는 것으로 측정되었다. 숙지황 추출물의 고혈압억제효과는 물 추출물에서 87.2%, 40% ethanol 추출물에서 81.1%의 저해활성을 나타내었다. 관절염억제효과는 매우 낮게 측정 되었으며, 피부상재균에 대한 항균효과는 확인되었다. 숙지황 추출물의 tyrosinase 저해 활성은 40% ethanol 추출물에서 70%의 높은 저해효과가 확인되어 미백효과를 기대할 수 있었다. 주름 생성과 관련된 elastase 저해 효과는 물 추출물에서 76%, ethanol 추출물 57%의 높은 elastase 억제효과를 관찰할 수 있었다. 숙지황 추출물에 대한 hyaluronidase 저해활성은 40% ethanol 추출물에서만 $200{\mu}g/ml$ phenolic의 농도에서 약 5%의 매우 낮은 hyaluronidase 저해활성을 나타내었다.
In this study, the anti oxidative effects, inhibitory effects on elastase, and components of Securinega suffruticosa extracts were investigated. The free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activities ($FSC_{50}$) and reactive oxygen species ROS) scavenging activities ($OSC_{50}$) of extract/fractions from Securinega suffruticosa were measured. The aglycone fraction ($9.04\;{\pm}\;0.51\;{\mu}g/mL$) and 50 % ethanol extract ($1.05\;{\pm}\;0.41\;{\mu}g/mL$) showed the most effective scavenging activities. The protective effects on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The aglycone fraction exhibited the most prominent cellular protective effect (${\tau}_{50},\;102.77\;{\pm}\;5.37$ min at $10{\mu}g/mL$). The inhibitory effect of ethyl acetate fraction on tyrosinase were of examined ($210.0\;{\pm}\;1.02\;{\mu}g/mL$). The inhibitory effect of aglycone fraction on elastase were also investigated ($17.6\;{\pm}\;1.26\;{\mu}g/mL$). These results indicate that extract/fractions of Securinega suffruticosa can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging $^1O_2$ and other ROS, and protect cellular membranes against ROS. Securinega suffruticosa extract could be used as a new cosmeceutical ingredient for whitening and anti-wrinkle products.
배경: 약용식물 속새 풀에서 항산화물질의 존재는 확인되지 않았다. 목적: 본 연구는 속새 풀의 추출물의 항산화와 elastase inhibition 효과를 조사하는 것이었다. 방법: 속새의 줄기와 뿌리 부분을 채집하여 열수(HW) 및 에틸알코올(70EOH, 100EOH)로 추출한 물질들의 항산화 기능을 측정하였다. 결과: 줄기의 추출 수율은 HW추출에서 에틸알코올 추출보다 높았다. 폴리페놀 함유량은 줄기보다 뿌리 추출물에서는 유의하게 높았다. 70EOH 추출물의 총 플라보노이드 함량은 줄기 보다는 뿌리 추출물에서 유의하게 높았다. 뿌리 추출액의 elastase 저해 기능은 추출액 100 ppm에서는 46%의 효과가 있었고, 줄기에서는 49%의 효과가 있었다. ABTS 유리기 소거 기능 순서는 추출액 50 ppm 농도에서는 HW<70EOH<100EOH< 비타민E(99.7%)의 비율로 제거되었다. DPPH 유리기 소거능의 순서는 추출물 농도가 100 ppm일 때에 HW<100EOH<70EOH<비타민E(96.2%)로 나타났다. 양성 대조군인 비타민E의 제거율은 다른 추출물보다도 신속하고도 높게 진행되었다. 결론: 속새 풀 추출물에는 다량의 항산화물질이 존재하며 엘라스타제 저해 기능 효과도 높게 나타났다. 그런고로 속새 풀은 중요한 기능성 식물 중의 하나라고 판단한다.
Objectives : The purpose of this study is to confirm the anti-inflammatory, antioxidant and anti-aging efficacy of Pyeonggangaeuljihyeol-tang(PGJT) extract. Methods : In order to confirm the anti-inflammatory activity of PGJT extract, the inhibitory effect on NO PGE2 production were evaluated and the expression level of iNOS, COX-2 and IL-6 mRNA were measured through qRT-PCR, Antioxidant activity was evaluated for radical scavenging activity using DPPH and ABTS, anti-aging activity was evaulated for collagenase, elastase, tyrosinase and L-DOPA oxidation inhibitory activity. Results : PGJT extract shows anti-inflammatory effect by inhibiting the production of NO and PGE2 by reducing the expression level of iNOS, COX-2 and IL-6 mRNA, antioxidant effect by increasing DPPH and ABTS scavenging abillity in a concentration dependent manner. In addition, the anti-aging effect was confirmed by inhibiting collagenase, elastase, tyrosinase production and L-DOPA oxidation. Conclusion : This suggests that PGJT showed an overall excellent anti-inflammatory effect and an inhibitory effect on the activity of antioxidant and anti-aging related enzymes.
Tetracycline계 약제가, 류마치양 관절염을 비롯한 염증성 질환들의 주된 병인으로 알려지고있는 호중구 elastase의 활성도를 억제하였으며, 특히 oxytetracycline, demeclocycline, 그리고 tetracycline 등은 분자 구조적 차이에 따라 elastase의 효소 활성도에 대하여 다양한 억제율을 나타내었다. 측쇄 구조의 5번 위치에 $OH{^-}$기가 첨가된 oxytetracycline이 가장 높은 억제율을 나타내었다. 억제 양상에 있어서도 tetracycline이 비경쟁적 저해 형태를 보인 반면에, oxytetracycline은 경쟁적 저해 형태를 나타내었으며, Ki값은 각각 4.9mM과 0.39mM로 산출 되었다. 또한 항균 효과를 나타내는 활성 부위를 제거시킨 de-dimethylaminotetracycline을 합성하여 효소 활성도 억제 실험에 사용한 결과, tetracycline과 유사한 효소 억제 작용을 나타냄을 확인하였다. 이상의 연구 결과에서, tetracycline의 효소 활성도 억제 작용은 항균 효과를 나타내는 활성 부위와 상관없이 독립된 기전에 의해서 일어나는 약리 작용이며, 측쇄 구조의 $OH{^-}$기가 이 작용에 영향을 주는 일부 원인인 것으로 추정할 수 있으며, 이를 tetracycline계 약제가 염증 부위에서 나타내는 분자 단계에서의 새로운 약리 기전으로 제시하고자 한다. 또한 de-dimethylaminotetracycline은 항균제의 장기 사용시에 발생할 수 있는 저항균의 출현과는 무관하므로, 다른 부작용에 대한 연구가 선행될 경우, elastase에 의해 야기되는 만성 질환들의 치료제로써 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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