• 제목/요약/키워드: dnaK

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Differential Regulation of the Genes of the Streptococcus pneumoniae dnaK Operon by Ca++

  • Kim, Seung-Whan;Bae, Yong-Goo;Pyo, Suhk-Neung;Rhee, Dong-Kwon
    • Molecules and Cells
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    • 제23권2호
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    • pp.239-245
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    • 2007
  • DnaK is a major antigen in Streptococcus pneumoniae, and is induced by a minor shift in temperature (30 to $37^{\circ}C$) but not by ethanol shock. Although HrcA in the presence of $Ca^{{+}{+}}$ represses the expression of both groEL and hrcA, the control of transcription of the dnaK operon is not completely understood. In this study, the dnaK operon of S. pneumoniae (5' hrcA-grpE-dnaK-dnaJ) was cloned and analyzed. It contains large intergenic regions in grpE/dnaK and dnaK/dnaJ. Pulse labeling with [$^{35}S$]-methionine and immunoblot analyses revealed the presence of higher levels of DnaK than of HrcA even in the presence of $Ca^{{+}{+}}$ after heat shock suggesting that $Ca^{{+}{+}}$ differentially regulates the heat shock responses of hrcA and dnaK. By blocking de novo mRNA synthesis with rifampin it was shown that neither the hrcA nor the groEL transcripts were stabilized by heat shock even though dnaK transcripts were stabilized. We conclude that S. pneumoniae uses fine regulation of the transcription of the individual genes of the tetracistronic dnaK operon to cope with the various stresses experienced during infections.

k-convex hull을 이용한 DNA 염기 배열의 가시화 (DNA Sequence Visualization with k-convex Hull)

  • 김민아;이은정;조환규
    • 한국컴퓨터그래픽스학회논문지
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    • 제2권2호
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    • pp.61-68
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    • 1996
  • 본 논문에서는 대용량의 DNA 염기 배열의 정성 정보를 특징짓기 위한 새로운 가시화 방법을 제안한다. DNA 배열은 배열 자체가 방대한 양의 정보를 포함하고 있기 때문에 분석에 많은 어려움이 있다. 우리는 DNA 염기 배열들사이의 상사성 비교를 위해 DNA 염기 배열을 하나의 이미지 도메인으로 변환한다. 프로그램은 random walk plot으로 DNA 염기 배열을 가시화한 후에 k-convex hull로 단순화 시킨다. Random Walk plot은 염기배열을 평면상에 하나의 커브로 표현한다. k-convex hull은 walk plot으로부터 무의미한 부분을 제거함으로서 walk plot을 단순화한다. 이러한 방법은 유전공학자들에게 쉽게 DNA 배열의 특징을 인식하고 분류할 수 있는 직관을 제공한다. 실제 게놈 데이터로 실험한 결과는 논문에서 제안하는 방법이 긴 DNA 염기배열들 사이의 유사성 분석을 위해 좋은 가시화 도구임을 보여준다.

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Relationship Between Genome Similarity and DNA-DNA Hybridization Among Closely Related Bacteria

  • Kang, Cheol-Hee;Nam, Young-Do;Chung, Won-Hyong;Quan, Zhe-Xue;Park, Yong-Ha;Park, Soo-Je;Desmone, Racheal;Wan, Xiu-Feng;Rhee, Sung-Keun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권6호
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    • pp.945-951
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    • 2007
  • DNA-DNA hybridization has been established as an important technology in bacterial species taxonomy and phylogenetic analysis. In this study, we analyzed how the efficiency with which the genomic DNA from one species hybridizes to the genomic DNA of another species (DNA-DNA hybridization) in microarray analysis relates to the similarity between two genomes. We found that the predicted DNA-DNA hybridization based on genome sequence similarity correlated well with the experimentally determined microarray hybridization. Between closely related strains, significant numbers of highly divergent genes (>55% identity) and/or the accumulation of mismatches between conserved genes lowered the DNA-DNA hybridization signal, and this reduced the hybridization signals to below 70% for even bacterial strains with over 97% 16S rRNA gene identity. In addition, our results also suggest that a DNA-DNA hybridization signal intensity of over 40% indicates that two genomes at least shared 30% conserved genes (>60% gene identity). This study may expand our knowledge of DNA-DNA hybridization based on genomic sequence similarity comparison and further provide insights for bacterial phylogeny analyses.

X선과 저에너지 전자선에 의한 DNA 손상 (DNA Damage by X-ray and Low Energy Electron Beam Irradiation)

  • 박연수;노형아;조혁
    • Journal of Radiation Protection and Research
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    • 제33권2호
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    • pp.53-59
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    • 2008
  • X선과 같은 고에너지 방사선에 의한 DNA 손상 중 간접적인 손상을 확인하기 위하여 탄탈륨(Ta) 박막위에 동결건조 과정으로 만들어진 pGEM-3Zf(-) plasmid DNA 단일층(monolayer)의 박막을 만든 다음, 에너지가 1.5 keV인 Al $K{\alpha}$ X선을 0분, 3분, 7분, 10분 동안 초고진공 상태에서 이 DNA 단일층에 조사하여 평균 흡수선량(mean absorbed dose)의 변화에 따른 DNA 손상을 관찰하였다. 또한 3 eV의 낮은 에너지 전자선을 조사하여 그 결과를 X선을 조사한 경우와 비교하였다. X선과 낮은 에너지 전자선으로 조사된 plasmid DNA를 전기영동(electrophoresis) 방법을 이용해 supercoiled DNA와 unsupercoiled DNA로 분리한 후 각각을 정량적으로 분석하였다. Supercoiled DNA는 X선과 3 eV 전자선의 조사에 따른 평균흡수선량이 증가함에 따라 선형적으로 감소했다. 그와 반대로 circular DNA와 crosslinked form 1 DNA는 평균흡수선량이 증가함에 따라 선형적으로 증가했다. 이것은 supercoiled DNA가 낮은 에너지 전자와 상호작용하여 외가닥 절단(single strand break)을 일으켰고 그 결과 unsupercoiled DNA로 변화되었음을 보여준다. 본 실험을 통해 X선과 같은 고에너지 방사선에 의한 DNA의 간접적 손상이 일어남을 관찰할 수 있었고, DNA의 이온화 에너지보다 작은 에너지($0{\sim}10\;eV$)를 갖는 전자에 의해서도 DNA 손상이 일어날 수 있음을 확인할 수 있었다.

哺乳動物細胞에 있어 감마線에 의한 DNA 回復合成과 染色體交換과의 聯關性 (Gamma-ray Induced DNA Repair Synthesis in Relation to Chromosome Exchanges in Mammalian Cells in Vitro)

  • Park, Sang-Dai
    • 한국동물학회지
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    • 제18권1호
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    • pp.41-49
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    • 1975
  • DNA 回復合成과 染色體交換과의 聯關性을 추구하기 위해 감마線을 照射한 BHK-21 과KB 細胞의 DNA 回復合成의 線量反應과 時期를 調査하였다. 감마 線에 의한 DNA 回復合成率은 5kR까지 照射線量에 比例하나 그후 50kR 까지는 變化가 없었다. DNA 回復合成의 初期 線量反應은 細胞에 따라 다르나 照射후 1$\\sim$2時間까지 지속하였다. 감마 線에 의한 染色體交換은 細胞에 따라 다른 感受性을 보였고 DNA 回復合成과의 聯關性을 보여주지 않았다.

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Hybridization by an Electrical Force and Electrochemical Genome Detection Using an Indicator-free DNA on a Microelectrode-array DNA Chip

  • Choi, Yong-Sung;Lee, Kyung-Sup;Park, Dae-Hee
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제26권3호
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    • pp.379-383
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    • 2005
  • This research aims to develop DNA chip array without an indicator. We fabricated microelectrode array by photolithography technology. Several DNA probes were immobilized on an electrode. Then, indicator-free target DNA was hybridized by an electrical force and measured electrochemically. Cyclic-voltammograms (CVs) showed a difference between DNA probe and mismatched DNA in an anodic peak. Immobilization of probe DNA and hybridization of target DNA could be confirmed by fluorescent. This indicator-free DNA chip microarray resulted in the sequence-specific detection of the target DNA quantitatively ranging from $10^{-18}\;M\;to\;10^{-5}$ M in the buffer solution. This indicator-free DNA chip resulted in a sequence-specific detection of the target DNA.

NMR Study of Temperature-Dependent Single-Stranded DNA Binding Affinity of Human Replication Protein A

  • Kim, Min-Gyu;Shin, Tae-Hoan;Choi, Seo-Ree;Choi, Jae-Gyu;Lee, Joon-Hwa
    • 한국자기공명학회논문지
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    • 제20권3호
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    • pp.66-70
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    • 2016
  • The replication protein A (RPA), is a heterotrimer with 70, 32 and 14 kDa subunits and plays a crucial role in DNA replication, recombination, and repair. The largest subunit, RPA70, binds to single-stranded DNA (ssDNA) and mediates interactions with many cellular and viral proteins. In this study, we performed nuclear magnetic resonance experiments on the complex of the DNA binding domain A of human RPA70 (RPA70A) with ssDNA, d(CCCCC), at various temperatures, to understand the temperature dependency of ssDNA binding affinity of RPA70A. Essential residues for ssDNA binding were conserved while less essential parts were changed with the temperature. Our results provide valuable insights into the molecular mechanism of the ssDNA binding of human RPA.

Indicator-free DNA Chip Array Using an Electrochemical System

  • Park, Yong-Sung;Kwon, Young-Soo;Park, Dae-Hee
    • KIEE International Transactions on Electrophysics and Applications
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    • 제4C권4호
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    • pp.133-136
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    • 2004
  • This research aims to develop a DNA chip array without an indicator. We fabricated a microelectrode array through photolithography technology. Several DNA probes were immobilized on an electrode. Then, target DNA was hybridized and measured electrochemically. Cyclic-voltammograms (CVs) showed a difference between the DNA probe and mismatched DNA in an anodic peak. This indicator-free DNA chip resulted in a sequence-specific detection of the target DNA.

Linoleic acid과산화물의 DNA 손상작용 (The DNA Damage by Linoleic Acid Hydroperoxide)

  • 김선봉;강진훈;변한석;김인수;박영호
    • 한국수산과학회지
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    • 제20권6호
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    • pp.569-572
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    • 1987
  • 지질산화생성물의 DNA 손상작용기구를 밝힐 목적으로 자동산화시킨 linoleic acid로부터 과산화물을 분리하고 DNA와 $37^{\circ}C$에서 반응시켜 경시적인 관산화물이 DNA 원상작용을 조사한 결과는 다음과 같다. 과산화물의 농도가 증가함에 따라 DNA가크게 송상되었으며, 반응 2일째에는 $422{\mu}g$ 이상의 농도에서는 DNA가 더욱 크게 손상을 받아 gel plate 상에서는 DNA band가 검출되지 않았다. 또, 이러한 DNA 손상능을 정량적으로 분석한 결과, 반응 1일에 대조구가 $30\%$의 감소율을 나타낸 반면, $844{\mu}g$의 농도에서는 2배량인 $60\%$의 감소율을 나타내었다. 과산화물과 DNA의 반응계에 각종 활성산소소거제를 첨가한 결과, 과산화물의 DNA 손상작용에 대한 활성산소종의 영향은 나타나지 않았다.

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Temperature-dependent tendency of target DNA translocation through a nanocapillary functionalized with probe DNA

  • Lee, Choongman;Youn, Yeoan;Kim, Joo Hyung;Yoo, Kyung-Hwa
    • 한국진공학회:학술대회논문집
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    • 한국진공학회 2016년도 제50회 동계 정기학술대회 초록집
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    • pp.140.1-140.1
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    • 2016
  • We have measured DNA translocation through a nanocapillary functionalized with probe DNA. These DNA-functionalized nanocapillaries selectively facilitate the translocation of target ssDNAs that are complementary to the probe ssDNAs. In addition, translocation of the complementary target ssDNA exhibits two tendencies to translocation speed, such as fast and slow translocation, whereas that of non-complementary target ssDNA yields only one tendency, fast translocation. These observations suggest that the complementary and non-complementary target ssDNAs may be discriminated due to different interaction strengths between target and probe ssDNAs. The temperature dependence measurements of DNA translocation show that slow translocation events are ascribed to the complementary interaction between probe and target ssDNA. This confirms that their dwell time is dependent on the base-pair binding strength. These results demonstrate that mere single-base different target DNA can be selectively detectable by using the probe DNA-functionalized nanocapillaries.

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