Glaucoma is the second leading cause of irreversible blindness, and primary open-angle glaucoma (POAG) is the most common type. Due to inadequate diagnosis, treatment is often not administered until symptoms occur. Hence, approaches enabling earlier prediction or diagnosis of POAG are necessary. We aimed to identify novel drugs for glaucoma through bioinformatics and network analysis. Data from 36 samples, obtained from the trabecular meshwork of healthy individuals and patients with POAG, were acquired from a dataset. Next, differentially expressed genes (DEGs) were identified to construct a protein-protein interaction (PPI) network. In both stages, the genes were enriched by studying the critical biological processes and pathways related to POAG. Finally, a drug-gene network was constructed, and novel drugs for POAG treatment were proposed. Genes with p < 0.01 and |log fold change| > 0.3 (1,350 genes) were considered DEGs and utilized to construct a PPI network. Enrichment analysis yielded several key pathways that were upregulated or downregulated. For example, extracellular matrix organization, the immune system, neutrophil degranulation, and cytokine signaling were upregulated among immune pathways, while signal transduction, the immune system, extracellular matrix organization, and receptor tyrosine kinase signaling were downregulated. Finally, novel drugs including metformin hydrochloride, ixazomib citrate, and cisplatin warrant further analysis of their potential roles in POAG treatment. The candidate drugs identified in this computational analysis require in vitro and in vivo validation to confirm their effectiveness in POAG treatment. This may pave the way for understanding life-threatening disorders such as cancer.
The study aimed to compare the necrotic enteritis (NE)-induced transcriptome differences between the spleens of Marek's disease resistant chicken line 6.3 and susceptible line 7.2 co-infected with Eimeria maxima/Clostridium perfringens using RNA-Seq. Total RNA from the spleens of two chicken lines were used to make libraries, generating 42,736,296 and 42,617,720 usable reads, which were assembled into groups of 29,897 and 29,833 mRNA genes, respectively. The transcriptome changes were investigated using the differentially expressed genes (DEGs) package, which indicated 3,255, 2,468 and 2,234 DEGs of line 6.3, line 7.2, and comparison between two lines, respectively (fold change ${\geq}2$, p<0.01). The transcription levels of 14 genes identified were further examined using qRT-PCR. The results of qRT-PCR were consistent with the RNA-seq data. All of the DEGs were analysed using gene ontology terms, the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) database and the DEGs in each term were found to be more highly expressed in line 6.3 than in line 7.2. RNA-seq analysis indicated 139 immune related genes, 44 CD molecular genes and 150 cytokines genes which were differentially expressed among chicken lines 6.3 and 7.2 (fold change ${\geq}2$, p<0.01). Novel mRNA analysis indicated 15,518 novel genes, for which the expression was shown to be higher in line 6.3 than in line 7.2 including some immune-related targets. These findings will help to understand host-pathogen interaction in the spleen and elucidate the mechanism of host genetic control of NE, and provide basis for future studies that can lead to the development of marker-based selection of highly disease-resistant chickens.
Lee, So Eui;Gupta, Ravi;Jayaramaiah, Ramesha H.;Lee, Seo Hyun;Wang, Yiming;Park, Sang-Ryeol;Kim, Sun Tae
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.5
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pp.458-466
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2017
Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), the causative agent of bacterial blight, is a major threat to rice productivity. Here, we performed RNA-Seq based transcriptomic analysis of Xoo transcripts isolated under in planta growth (on both susceptible and resistant hosts) and in vitro culture conditions. Our in planta extraction method resulted in successful enrichment of Xoo cells and provided RNA samples of high quality. A total of 4,619 differentially expressed genes were identified between in planta and in vitro growth conditions. The majority of the differentially expressed genes identified under in planta growth conditions were related to the nutrient transport, protease activity, stress tolerance, and pathogenicity. Among them, over 1,300 differentially expressed genes were determined to be secretory, including 184 putative type III effectors that may be involved in Xoo pathogenicity. Expression pattern of some of these identified genes were further validated by semi-quantitative RT-PCR. Taken together, these results provide a transcriptome overview of Xoo under in planta and in vitro growth conditions with a focus on its pathogenic processes, deepening our understanding of the behavior and pathogenicity of Xoo.
Objective: To explore the molecular mechanisms of fatty liver hemorrhagic syndrome (FLHS) in laying hens, an experiment was conducted to reveal the differences in histopathological observation and gene expression between FLHS group and normal group. Methods: We compared the histopathological difference using hematoxylin and eosin staining and proceeded with RNA sequencing of adipose tissue to search differentially expressed genes and enriched biological processes and pathways. Then we validated the mRNA expression levels by real-time polymerase chain reaction and quantified protein levels in the circulation by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: We identified 100 differentially expressed transcripts corresponding to 66 genes (DEGs) were identified between FLHS-affected group and normal group. Seven DEGs were significantly enriched in the immune response process and lipid metabolic process, including phospholipase A2 group V, WAP kunitz and netrin domain containing 2, delta 4-desaturase sphingolipid 2, perilipin 3, interleukin-6 (IL-6), ciliary neurotrophic factor (CNTF), and suppressor of cytokine signaling 3 (SOCS3). And these genes could be the targets of immune response and be involved in metabolic homeostasis during the process of FLHS in laying hens. Based on functional categories of the DEGs, we further proposed a model to explain the etiology and pathogenesis of FLHS. IL-6 and SOCS3 mediate inflammatory responses and the satiety hormone of leptin, induce dysfunction of Jak-STAT signaling pathway, leading to insulin resistance and lipid metabolic disorders. Conversely, CNTF may reduce tissue destruction during inflammatory attacks and confer protection from inflammation-induced insulin resistance in FLHS chickens. Conclusion: These findings highlight the therapeutic implications of targeting the JAK-STAT pathway. Inhibition of IL6 and SOCS3 and facilitation of CNTF could serve as a favorable strategy to enhance insulin action and improve glucose homoeostasis, which are of importance for treating obesity-related disorders for chickens.
Cheng, Peng;Cheng, You;Li, Yan;Zhao, Zhenguo;Gao, Hui;Li, Dong;Li, Hua;Zhang, Tao
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.13
no.8
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pp.3605-3609
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2012
Lung cancer seriously threatens human health, so it is important to investigate gene expression changes in affected individuals in comparison with healthy people. Here we compared the gene expression profiles between smokers with and without lung cancer. We found that the majority of the expressed genes (threshold was set as 0.1 RPKM) were the same in the two samples, with a small portion of the remainder being unique to smokers with and without lung cancer. Expression distribution patterns showed that most of the genes in smokers with and without lung cancer are expressed at low or moderate levels. We also found that the expression levels of the genes in smokers with lung cancer were lower than in smokers without lung cancer in general. Then we detected 27 differentially expressed genes in smokers with versus without lung cancer, and these differentially expressed genes were foudn to be involved in diverse processes. Our study provided detail expression profiles and expression changes between smokers with and without lung cancer.
Xiang, Zhi Feng;Zhang, Jin Zhou;Li, Xue Bin;Xie, Hong Bin;Wang, Qing Hua
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.23
no.1
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pp.17-24
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2010
In the antral follicle phase, several layers of cumulus cells surround the oocyte and play an important support and regulation role in oocyte development and maturation via intercellular communications and interactions between oocytes and cumulus cells. However, information on stage specific gene expression in swine during the phase is not well understood. To investigate the function of cumulus cells during in vitro maturation of porcine oocytes and gene expression, suppression subtractive hybridization (SSH) was performed to screen genes that were differentially expressed between cumulus-oocyte complexes (COCs) and naked oocytes (NOs). Utilizing mRNAs from in vitro maturation oocytes, a SSH cDNA library from COCs as the tester and NOs as the driver was constructed. The SSH cDNA library was then screened using dot blot analysis. Results showed that a total of 70 clones randomly selected from the library were differentially expressed. Among these, 41 exhibited high homology to known genes and 11 were novel expressed sequences tags (ESTs). Four differentially expressed genes, including bfgf, sprouty 2, egr and btc, were further studied by real time quantitative PCR; results confirmed an increased expression of respective mRNA in COCs compared with NOs, which suggests that these factors may play an important role in oocyte development and maturation.
Oocyte maturation refers to the process that prophase I arrested germinal vesicle(GV) drives the progression of meiosis to metaphase II(MII) to have the capacity for fertilization and embryo development. To better understand the molecular mechanism(s) involved in oocyte maturation, we identified differentially expressed genes(DEGs) between GV and MII mouse oocytes using a new innovative annealing control primer (ACP) technology. Using 20 ACPs, we successfully cloned 32 DEGs between GV and Mll oocytes, and 26 out of these 32 DEGs were functionally known genes. Four genes including Pscd2 were GV-specific, 10 genes including PKD2 and CSN3 were highly expressed in GV oocytes(GV-selective), and 12 genes including Diva were highly expressed in MII oocytes (MII-selective). Ail of the genes identified in this study were first reported in the oocyte expression using ACP system and especially, we could characterize the existence of PKD-CSW signaling pathwayin the mouse oocytes. Results of the present study would provide insight for studying molecular mechanisms regulating oocyte maturation.
Analysis of expressed sequence tags (ESTs) is an efficient approach for gene discovery, expression profiling, and development of resources useful for functional genomics studies. As part of studies on the immune system of olive flounder, a total of 251 EST sequences from gill cDNA library were generated to identify and characterize important genes in the immune machanisms of olive flounder. Of the 251 clones, 126 clones (50.2%) were identified as orthologues of known genes from olive flounder and other organisms. Among the 126 EST clones, 16 clones (12.7%) were representing 9 unique genes identified as homologous to the previously reported olive flounder ESTs, 100 clones (79.4%) representing 103unique genes were identified as orthologs of known genes from other organisms. We also identified several kinds of immune associated proteins, indicating EST as a powerful method for identifying immune related genes of fish as well as identifying novel genes. Further studies using cDNA microarrays are needed to identify the differentially expressed transcripts after disease infection.
Proceedings of the Korean Statistical Society Conference
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2003.10a
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pp.173-177
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2003
When we have both a paired data set and two independent data sets, neither a paired t-test nor a two-sample t-test can be used to detect differences between two samples. In order to identify differentially expressed genes in a mixed data set, a new test statistic is proposed.
Objective: In recent years, long noncoding RNAs (lncRNAs) have been identified in many species, and some of them have been shown to play important roles in muscle development and myogenesis. However, the differences in lncRNAs between Kazakh cattle and Xinjiang brown cattle remain undefined; therefore, we aimed to confirm whether lncRNAs are differentially expressed in the longissimus dorsi between these two types of cattle and whether differentially expressed lncRNAs regulate muscle differentiation. Methods: We used RNA-seq technology to identify lncRNAs in longissimus muscles from these cattle. The expression of lncRNAs were analyzed using StringTie (1.3.1) in terms of the fragments per kilobase of transcript per million mapped reads values of the encoding genes. The differential expression of the transcripts in the two samples were analyzed using the DESeq R software package. The resulting false discovery rate was controlled by the Benjamini and Hochberg's approach. KOBAS software was utilized to measure the expression of different genes in Kyoto encyclopedia of genes and genomes pathways. We randomly selected eight lncRNA genes and validated them by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR). Results: We found that 182 lncRNA transcripts, including 102 upregulated and 80 downregulated transcripts, were differentially expressed between Kazakh cattle and Xinjiang brown cattle. The results of RT-qPCR were consistent with the sequencing results. Enrichment analysis and functional annotation of the target genes revealed that the differentially expressed lncRNAs were associated with the mitogen-activated protein kinase, Ras, and phosphatidylinositol 3-kinase (PI3k)/Akt signaling pathways. We also constructed a lncRNA/mRNA coexpression network for the PI3k/Akt signaling pathway. Conclusion: Our study provides insights into cattle muscle-associated lncRNAs and will contribute to a more thorough understanding of the molecular mechanism underlying muscle growth and development in cattle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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